Farmacología de la red y validación de los mecanismos antidepresivos de Qiangzhifang en un modelo de rata con depresión crónica inducida por estrés

Esta investigación tiene como objetivo investigar cómo actúa Qiangzhifang contra la depresión, identificar ingredientes activos clave y comprender sus mecanismos de acción. Este estudio llena el vacío en la comprensión de los mecanismos específicos y los componentes activos de Qiangzhifang para rastrear la depresión.

Estudiaremos cómo afecta Qiangzhifang al sistema inmunológico para encontrar la depresión y explorar sus posibles nuevas aplicaciones terapéuticas.

[Narrador] Para comenzar, construya el dispositivo de sujeción de ratas seleccionando un tubo de plástico transparente con un diámetro y longitud adecuados para el tamaño de la rata, lo que permite que la rata se pare y gire hacia adentro mientras evita que se escape. Con un perforador de soldador eléctrico, cree agujeros en los lados del tubo de plástico y en la tapa para garantizar una circulación de aire adecuada. Divida las ratas en cuatro grupos, asegurándose de que cada grupo esté formado por 10 ratas. Una hora después de la administración intragástrica diaria del medicamento, coloque suavemente a las ratas en los dispositivos de sujeción, excluyendo a las del grupo de control, y asegúrese de que estén en una posición cómoda. Administrar fluoxetina a 2,7 miligramos por kilogramo por día al grupo de fluoxetina y Qiangzhifang a dos gramos por kilogramo por día al grupo Qiangzhifang por sonda usando un volumen de dosis de un mililitro por 100 gramos de peso corporal para ambas soluciones. Llene las botellas de agua potable de los animales de experimentación con agua pura o una solución acuosa de sacarosa al 1%. Coloque cada solución en una botella separada, luego pese las botellas. Coloque una botella de solución de sacarosa y una botella de agua pura en la ingesta de agua de cada jaula para ratas. Uno a la izquierda y otro a la derecha para el libre acceso a la bebida. Después de 30 minutos, cambie las posiciones de las botellas para evitar la preferencia lateral. Después de una hora, retire todas las botellas de agua. Péselos rápidamente para medir los valores de consumo de ambas soluciones. Luego calcule la relación de preferencia semanal de sacarosa usando la ecuación dada. Pese las ratas semanalmente a una hora fija de las siete de la mañana. Para controlar los cambios en el peso corporal. Ajuste la iluminación en la caja de campo abierto para una distribución uniforme y una visibilidad clara de las ratas en el software de seguimiento. Utilice el sistema de seguimiento y análisis de video para dividir la superficie inferior de la caja de campo abierto en nueve cuadrículas cuadradas iguales con ocho cuadrículas adyacentes a las paredes como área periférica y el centro como área central. Coloque la rata en el área central de la caja de campo abierto y registre su movimiento durante cinco minutos usando el sistema de seguimiento. Después de probar cada rata, limpie la cámara de campo abierto con etanol al 75% para eliminar el olor residual y evitar interferencias con el comportamiento de la siguiente rata. Introduzca la distancia total de las actividades de campo abierto y el número de entradas en la cuadrícula central en los registros de pruebas de campo abierto. Tome un cilindro de agua de plexiglás transparente y llénelo con agua a una temperatura de 23 a 25 grados centígrados. Ajuste la profundidad del agua de acuerdo con el peso del animal, asegurándose de que la cola de la rata se mantenga a cierta distancia por encima del fondo. Después de activar la cámara y el sistema de adquisición de señales, coloque lentamente las ratas en el cilindro de agua, manteniendo el silencio durante todo el experimento. Observe y registre la duración de la inmovilidad flotante dentro de los 300 segundos. Al final de la sesión, retire inmediatamente las ratas del agua y séquelas. Después de cada sesión, vuelva a colocar el agua en el cilindro para evitar cualquier influencia en la siguiente rata. Access, la base de datos de farmacología de los sistemas de medicina tradicional china o TCMSP, la base de datos de hierbas y la base de datos TCMID. Utilice los nombres de las ocho medicinas tradicionales chinas en Qiangzhifang como palabras clave para buscar compuestos activos y objetivos de las hierbas. Recopile información de objetivos de TCMSP y la base de datos de predicción de objetivos suizos. Establecer el valor del filtro en probabilidad mayor que cero. Ahora navegue a la base de datos de GeneCards y busque la palabra clave depresión. Después de obtener los objetivos genéticos asociados con la depresión, descargue la hoja de cálculo electrónica, filtre los puntajes genéticos que son más altos que el promedio y compile una lista de objetivos relacionados con la depresión. Ahora acceda a la herramienta de generación y cargue los objetivos compuestos seguidos de los archivos de destino de la enfermedad. Grafique los genes superpuestos entre los presuntos objetivos compuestos y los objetivos de la enfermedad. Luego descargue la imagen del diagrama. Finalmente, acceda a la base de datos de cadenas y pegue los genes superpuestos, específicamente la lista de objetivos superpuestos contra la depresión de Qiangzhifang en el cuadro de diálogo de la lista de nombres. Seleccione homo sapiens en la sección de organismos y haga clic en Buscar, seguido de Continuar. Seleccione la opción de exportaciones de la barra de título y descargue la tabla de resumen de la red de interacción proteína-proteína en formatos PNG y TSV. En la prueba de preferencia de sacarosa después de 28 días, el grupo de estrés de restricción crónica tuvo una preferencia de sacarosa significativamente menor que el control. Mientras que los grupos tratados con Qiangzhifang y Fluoxetina mostraron valores significativamente más altos en comparación con el grupo de estrés. El aumento de peso corporal se redujo significativamente en el grupo de estrés de restricción crónica en comparación con el control después de 28 días, pero aumentó significativamente en los grupos de Qiangzhifang y fluoxetina en comparación con el grupo de estrés. Los gráficos de movimiento en campo abierto mostraron una exploración reducida del área central en el grupo de estrés. Mientras que ambos grupos de tratamiento exhibieron una actividad visiblemente más central. La distancia total recorrida en la prueba de campo abierto no mostró diferencias significativas entre todos los grupos. El tiempo en el área central también se redujo significativamente en el grupo de estrés y aumentó significativamente en ambos grupos de tratamiento. Además, el tiempo de inmovilidad en la prueba de natación forzada fue mayor en el grupo de estrés y se redujo significativamente con ambos tratamientos.