Name: Establecimiento de un sistema de cocultivo de organoides tumorales colorrectales derivados de pacientes y linfocitos infiltrantes de tumores (TIL) (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-06-27T13:50:00.000+00:00
Duration: 8 min 42 s
Description: Aprende a establecer un sistema de cocultivo de organoides tumorales colorrectales derivados de pacientes con linfocitos infiltrantes de tumores (TIL). Este método permite estudiar interacciones inmunitarias y evaluar terapias personalizadas contra el cáncer colorrectal.

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</ol>

<table><tbody><tr><td>DMEM/F-12 avanzado</td><td>Gibco</td><td>12634028</td><td></td></tr><tr><td>2-Mercaptoetanol</td><td>sigma</td><td>63689</td><td></td></tr><tr><td>4% de paraformaldehído</td><td>BBI</td><td>E672002-0100</td><td></td></tr><tr><td>7-AAD</td><td>Bioleyenda</td><td>420403</td><td></td></tr><tr><td>A83-01</td><td>Tocris</td><td>2939</td><td></td></tr><tr><td>Suplemento B27</td><td>Gibco</td><td>17504-44</td><td></td></tr><tr><td>CD107a-PE-cianina7</td><td>Bioleyenda</td><td>328618</td><td></td></tr><tr><td>CD279-PE</td><td>Bioleyenda</td><td>329906</td><td></td></tr><tr><td>Anticuerpo monoclonal CD3 (OKT3)</td><td>Invitrogen</td><td>14-0037-82</td><td></td></tr><tr><td>CD3-FITC</td><td>Bioleyenda</td><td>300406</td><td></td></tr><tr><td>CD45 (dominio intracelular) (D9M8I)&nbsp;</td><td>CST</td><td>13917S</td><td></td></tr><tr><td>CD4-APC/cianina7</td><td>Bioleyenda</td><td>300518</td><td></td></tr><tr><td>CD8-APC</td><td>Bioleyenda</td><td>344722</td><td></td></tr><tr><td>CDX-2</td><td>MXB</td><td>RMA-0631</td><td></td></tr><tr><td>CK20</td><td>MXB</td><td>Kit-0025</td><td></td></tr><tr><td>CK7</td><td>MXB</td><td>Kit-0021</td><td></td></tr><tr><td>Dylight 488, IgG anti-conejo de cabra</td><td>Abbkine</td><td>A23220</td><td></td></tr><tr><td>Dylight 549, IgG anti-ratón de cabra</td><td>Abbkine</td><td>A23310</td><td></td></tr><tr><td>FEAG</td><td>Peprotech</td><td>AF-100-15</td><td></td></tr><tr><td>EpCAM</td><td>CST</td><td>36746T</td><td></td></tr><tr><td>Suero fetal bovino (FBS)</td><td>Cellmax</td><td>SA211.02</td><td></td></tr><tr><td>FGF 10</td><td>Peprotech</td><td>100-26</td><td></td></tr><tr><td>Gastrin (Humano)</td><td>Tocris</td><td>3006</td><td></td></tr><tr><td>GlutaMax 100x</td><td>Gibco</td><td>35050-061</td><td></td></tr><tr><td>Hepes</td><td>Sigma</td><td>H4034</td><td></td></tr><tr><td>HEPES</td><td>Sigma</td><td>H4034</td><td></td></tr><tr><td>Kit de separación de células CD3+ humanas (RUO)</td><td>RWD</td><td>K1201-10</td><td></td></tr><tr><td>Proteína recombinante IFN-gamma humana</td><td>PeproTech</td><td>300-02-20UG</td><td></td></tr><tr><td>Ki-67</td><td>CST</td><td>9449s</td><td></td></tr><tr><td>Matrigel</td><td>Corning</td><td>354234</td><td></td></tr><tr><td>N-acetilcisteína</td><td>Sigma</td><td>Referencia A9165</td><td></td></tr><tr><td>Nicotinamida</td><td>Sigma</td><td>N0636</td><td></td></tr><tr><td>Nivolumab (anti-PD-1)</td><td>Vendedor</td><td>A2002&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>Penicilina/Estreptomicina</td><td>Sigma</td><td>V900929</td><td></td></tr><tr><td>penicilina-estreptomicina</td><td>NCM Biotech</td><td>C100C5</td><td></td></tr><tr><td>Primocina</td><td>Invivogen</td><td>Hormiga-pm-1</td><td></td></tr><tr><td>Tampón de lisis de glóbulos rojos</td><td>termo-invitrogen</td><td>00-4300-54</td><td></td></tr><tr><td>IL-2 humana recombinante (sin portador)</td><td>Bioleyenda</td><td>589104</td><td></td></tr><tr><td>RPMI 1640</td><td>Gibco</td><td></td><td></td></tr><tr><td>SB202190</td><td>Vendedor</td><td>S1077</td><td></td></tr><tr><td>Tinción azul de tripano 0,4%</td><td>termo-invitrogen</td><td>T10282</td><td></td></tr><tr><td>Ultra-LEAF Anticuerpo CD28 antihumano purificado</td><td>Bioleyenda</td><td>302934</td><td></td></tr><tr><td>Anticuerpo CD3 antihumano purificado Ultra-LEAF</td><td>Bioleyenda</td><td>317325</td><td></td></tr><tr><td>Y-27632</td><td>Vendedor</td><td>S1049</td><td></td></tr></tbody></table>

establecimiento de un sistema de cocultivo de organoides tumorales colorrectales derivados de pacientes y linfocitos infiltrantes de tumores (til)

Establishment of a Co-culture System of Patient-Derived Colorectal Tumor Organoids and Tumor-Infiltrating Lymphocytes (TILs)

Establecimiento y caracterización de las DOP del CRC Se obtuvieron muestras tumorales de pacientes con CCR. Se utilizó tejido tumoral de CCR recién resecado para establecer PDOs y TILs, que posteriormente se emplearon en experimentos de cocultivo de PDO-TIL (Figura 1).
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/68346/68346fig1.jpg"> 
Figura 1: Es...

Establecimiento de un sistema de cocultivo de organoides tumorales colorrectales derivados de pacientes y linfocitos infiltrantes de tumores (TIL)

Colorectal cancer (CRC) is the third most common cancer worldwide. Tumor-infiltrating lymphocytes (TILs) have been identified as an important prognostic ...

establishment-co-culture-system-patient-derived-colorectal-tumor

Research

Investigación

JoVE Journal

Cancer Research

Investigación del cáncer

Un método simple para establecer organoide del tumor de colon murino primaria se describe. Este método utiliza la característica de que las células de tumor de colon sobrevivir y crecer en organoides en medios que contienen factores de crecimiento limitadas, mientras que el colon normal epiteliales no lo hacen.

In vitro organoide Cultura de tumores de colon primarios Ratón

Describimos el establecimiento de tumores colorrectales ortotópicos mediante la inyección de células tumorales o organoides en el ciego de ratones y el subsiguiente aislamiento de células tumorales circulantes (CTC) de este modelo.

Aislamiento de células tumorales circulantes en un modelo de ratón ortotópico de cáncer colorrectal

Se desarrolló un sistema modelo in vitro para capturar los cambios arquitectónicos del tejido durante la progresión del carcinoma escamoso pulmonar (LUSC) en un cocultivo tridimensional (3D) con fibroblastos asociados al cáncer (CAC). Este sistema organoide proporciona una plataforma única para investigar las funciones de diversos cambios tumorales-intrínsecos y extrínsecos que modulan el fenotipo tumoral.

Sistema de cocultura multidimensional para modelar la progresión del carcinoma escamoso pulmonar

Los organoides derivados del paciente (DOP) son una herramienta poderosa en la investigación traslacional del cáncer, que refleja tanto la heterogeneidad genética y fenotípica de la enfermedad como la respuesta a las terapias personalizadas contra el cáncer. Aquí, se detalla un protocolo consolidado para generar DOP de cáncer de vejiga primario humano en preparación para la evaluación de análisis fenotípicos y respuestas a medicamentos.

Cultivo de organoides del cáncer de vejiga como herramientas de medicina de precisión

Aquí se proporciona un protocolo detallado para establecer organoides mamarios humanos a partir de resecciones de tumores de mama derivados de pacientes o tejido mamario normal. El protocolo proporciona instrucciones completas paso a paso para el cultivo, la congelación y la descongelación de organoides mamarios derivados de pacientes humanos.

Establecimiento y cultivo de organoides mamarios derivados de pacientes

Los organoides tumorales han revolucionado la investigación del cáncer y el enfoque de la medicina personalizada. Representan un modelo tumoral clínicamente relevante que permite a los investigadores estar un paso por delante del tumor en la clínica. Este protocolo establece organoides tumorales a partir de muestras frescas de tejido tumoral pancreático y xenoinjertos derivados de pacientes de origen adenocarcinoma de páncreas.

Establecimiento de organoides tumorales derivados del cáncer de páncreas y fibroblastos a partir de tejido fresco

Este protocolo describe un método para aislar simultáneamente organoides cancerosos, fibroblastos asociados al carcinoma (CAFs) y fibroblastos (CF) no asociados al tumor del mismo paciente con carcinoma escamoso esofágico (ESCC). El uso de estos materiales compatibles con pacientes podría evitar problemas derivados de la variabilidad entre pacientes y proporcionar una plataforma experimental adecuada para la investigación en ESCC.

Establecimiento de organoides tumorales, fibroblastos asociados al carcinoma y fibroblastos equivalentes del mismo paciente con cáncer de esófago

El siguiente protocolo se centra en el establecimiento de un cultivo primario de sarcoma de tejidos blandos derivados del paciente (STS). Este modelo podría ayudarnos a entender mejor el fondo molecular y perfil farmacológico de estos raros tumores malignos y podría representar un punto de partida para futuras investigaciones destinadas a mejorar la gestión de STS.

Establecimiento de un cultivo primario de Sarcoma de tejidos blandos derivados del paciente

Para permitir la detección altamente sensible de lo cáncer colorrectal humano difundiendo células (CRC) colonizando los tejidos, aquí mostramos un protocolo para la transducción eficiente de partículas lentivirales proteína fluorescente verde (GFP) en células de organoides derivados de PDX CRC antes de su inyección en ratones receptores, con observación en el microscopio estéreo-fluorescencia.

Alta sensibilidad detección de micrometástasis de GFP Lentivirus-transduced organitas cultivados de un Tumor de Colon paciente derivado

Este protocolo describe la generación de modelos de xenoinjerto ortotópico derivados del paciente inculcando intravesicamente células carcinoma de células uroteliales de alto grado o inyectando intrarectalmente células cancerosas colorrectales en combinación diabética/grave no obesa ratones de inmunodeficiencia (NOD/SCID) para el crecimiento tumoral primario y metástasis espontáneas bajo la influencia de células estromales de ganglios linfáticos, lo que imita la progresión de las enfermedades...

Modelos de xenoinjerto ortotópico derivados del paciente para el carcinoma de células uroteliales humanas y el crecimiento tumoral del cáncer colorrectal y la metástasis espontánea

Aprende a establecer un sistema de cocultivo de organoides tumorales colorrectales derivados de pacientes con linfocitos infiltrantes de tumores (TIL). Este método permite estudiar interacciones inmunitarias y evaluar terapias personalizadas contra el cáncer colorrectal.

Establecimiento de un sistema de cocultivo de organoides tumorales colorrectales derivados de pacientes y linfocitos infiltrantes de tumores (TIL) (Video) | JoVE Journal

Establecimiento de un sistema de cocultivo de organoides tumorales colorrectales derivados de pacientes y linfocitos infiltrantes de tumores (TIL)

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