3 de julio de 2025
La microscopía confocal in vivo es una técnica de imagen prometedora con alta resolución. Presentamos el siguiente procedimiento para que los clínicos detecten Demodex en el margen del párpado in vivo.
Estamos desarrollando un protocolo estandarizado de microscopía confocal in vivo para detectar el párpado de los ácaros demodex para ampliar la adopción clínica. Estamos ajustando el último protocolo estandarizado de IVCM, que limita la detección de ácaros demodex in vivo en la práctica clínica. Proporciona una detección in vivo no invasiva, indolora y rápida con un seguimiento fácil, eliminando el dolor de denominación y los problemas leves de residuos.
[Narrador] Para comenzar, limpie la lente del dispositivo con toallitas limpiadoras de lentes. Use bolas de algodón empapadas en alcohol para desinfectar bien el reposacabezas y la mentonera. Presione las dos palancas negras juntas y tire de la mentonera hacia adelante hasta que se enganche para asegurarse de que esté en la posición horizontal correcta. Ahora, gire el tornillo de ajuste para alejar la cámara del paciente antes del examen. Aplique aproximadamente 0,02 mililitros de gel oftálmico a base de carbómero en la superficie frontal de la lente del microscopio del dispositivo. A continuación, retire una tapa estéril desechable de polimetilmetacrilato de su cubierta protectora. Presione los lados de la tapa firmemente sobre la lente del microscopio sin tocar la superficie anterior. Luego, aplique una gota de sustituto de lágrimas de gel en la superficie frontal de la tapa. Cree un nuevo archivo de paciente en el software. Ahora, aplique una gota de clorhidrato de proparacaína en el margen del párpado a examinar. Mueva la cámara de escaneo hacia la izquierda desde el punto de vista del operador. Luego, gire la lente del objetivo de la cámara CCD para ajustar la imagen de control perpendicularmente al eje óptico de la cámara láser del escáner. Inicie un nuevo examen utilizando el software. En la pestaña Datos de examen, seleccione Heidelberg Retina Tomograph Cornea en la lista desplegable Dispositivo y observe el cuadro de diálogo Configuración del módulo de córnea. Elija FOV 400 en la lista desplegable Lente de campo y haga clic en Aceptar para confirmar. Luego, espere a que se abra la ventana de adquisición y verifique la visualización de la imagen en vivo de la cámara láser de escaneo y la imagen de control. A continuación, establezca los factores en la ventana de adquisición. Seleccione 1x en el menú desplegable Factor de zoom CCD para establecer el tamaño de la imagen de control. Marque las casillas brillo automático y automático para habilitar el control automático del brillo. Asegúrese de que el Tipo de escaneo de sección esté seleccionado. Para adquirir una imagen de referencia, desactive el control automático de brillo. A continuación, ajusta el plano focal con el pin de ajuste hasta que la imagen en vivo se oscurezca y, posteriormente, aparezca un reflejo brillante, que indica la superficie anterior del tapón de polimetilmetacrilato. Haga clic en Restablecer en la sección Micrómetro de posición de enfoque y espere a que el valor llegue a 0. Luego, marque la casilla Brillo automático y desactive Restablecimiento automático. Ahora, ajuste la altura de la mesa de examen. Coloque la barbilla del paciente en el mentón y la frente contra el reposacabezas. Ajuste la elevación de la mentonera con el tornillo negro para que los párpados superiores del paciente se alineen con las marcas rojas en la columna del reposacabezas. Indique al paciente que mire hacia abajo, hacia la fuente de luz fija, y mantenga una mirada fija. Con un hisopo de algodón, voltee el párpado superior y exponga completamente la raíz de la pestaña y el margen palpebral. Gire el tornillo de ajuste para alinear el reflejo del rayo láser a nivel del párpado superior. Luego, mueva la cámara láser de escaneo hasta que el margen del párpado superior entre en contacto suavemente con el centro de la tapa de polimetilmetacrilato. Escanee cuidadosamente la raíz de la pestaña desde el lado temporal hasta el nasal con movimientos horizontales diminutos del margen palpebral. Gire la lente del microscopio en el sentido de las agujas del reloj o en el sentido contrario a las agujas del reloj para modificar el enfoque y observar folículos y raíces completos. Grabe todas las imágenes sospechosas de demodex con el pedal. Después de salir del examen, seleccione Ordenar por tiempo de adquisición rápido en el cuadro de diálogo Opciones para mostrar imágenes desde el lado temporal hasta el nasal. En 2024, el número de sujetos sometidos a microscopía confocal in vivo para la detección de demodex aumentó significativamente en todos los grupos de edad en comparación con 2023, y el mayor número se observó en el grupo de edad de 21 a 30 años. El procedimiento operativo estándar introducido en 2024 permitió la inclusión de sujetos desde los cuatro años hasta más de 90 años.
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Este artículo presenta un protocolo estandarizado de microscopía confocal in vivo para la detección de ácaros Demodex en el borde del párpado. El método es no invasivo y tiene como objetivo mejorar su adopción clínica.
La microscopía confocal in vivo (IVCM) estandarizada para la detección de ácaros Demodex en el borde del párpado aborda una necesidad crítica de imágenes no invasivas, reproducibles y cuantitativas en la investigación de la superficie ocular. Este protocolo permite una evaluación rápida y indolora en un amplio rango de edad, favoreciendo la continuidad traslacional y reduciendo la variabilidad del procedimiento en flujos de trabajo de descubrimiento temprano y validación clínica. La adopción de la IVCM mejora la confiabilidad predictiva en modelos de enfermedades oculares y facilita la estandarización generalizada para la comparabilidad entre estudios.
La MCI integra la continuación del descubrimiento hasta la fase preclínica al proporcionar una modalidad de imagen cuantitativa y estandarizada para la investigación de la superficie ocular y el cribado anti-parásito.