Name: Técnica de inyección subretiniana transescleral mínimamente invasiva optimizada en ratón (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-07-25T13:10:00.000+00:00
Duration: 6 min 46 s
Description: Aprende una técnica de inyección subretiniana transescleral optimizada en ratón para terapias de enfermedades retinianas hereditarias. Este método minimamente invasivo mejora la reproducibilidad y reduce el daño quirúrgico.

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<ol><li>Trapani, I., Banfi, S., Simonelli, F., Surace, E. M., Auricchio, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Gene+therapy+of+inherited+retinal+degenerations%3A+prospects+and+challenges%5BTitle%5D)+AND+%22Hum+Gene+Ther%22%5BJournal%5D)">Gene therapy of inherited retinal degenerations: prospects and challenges.</a> Hum Gene Ther. 26, 193-200 (2015).</li>
<li>Peng, Y., Tang, L., Zhou, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Subretinal+Injection%3A+A+Review+on+the+Novel+Route+of+Therapeutic+Delivery+for+Vitreoretinal+Diseases%5BTitle%5D)+AND+%22Ophthalmic+Res%22%5BJournal%5D)">Subretinal Injection: A Review on the Novel Route of Therapeutic Delivery for Vitreoretinal Diseases.</a> Ophthalmic Res. 58, 217-226 (2017).</li>
<li>Simunovic, M. P., Xue, K., Jolly, J. K., MacLaren, R. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Structural+and+Functional+Recovery+Following+Limited+Iatrogenic+Macular+Detachment+for+Retinal+Gene+Therapy%5BTitle%5D)+AND+%22JAMA+Ophthalmol%22%5BJournal%5D)">Structural and Functional Recovery Following Limited Iatrogenic Macular Detachment for Retinal Gene Therapy.</a> JAMA Ophthalmol. 135, 234-241 (2017).</li>
<li>Parikh, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+Alternative+and+Validated+Injection+Method+for+Accessing+the+Subretinal+Space+via+a+Transcleral+Posterior+Approach%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">An Alternative and Validated Injection Method for Accessing the Subretinal Space via a Transcleral Posterior Approach.</a> J Vis Exp. (118), e54808(2016).</li>
<li>Testa, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Three-year+follow-up+after+unilateral+subretinal+delivery+of+adeno-associated+virus+in+patients+with+Leber+congenital+Amaurosis+type+2%5BTitle%5D)+AND+%22Ophthalmology%22%5BJournal%5D)">Three-year follow-up after unilateral subretinal delivery of adeno-associated virus in patients with Leber congenital Amaurosis type 2.</a> Ophthalmology. 120, 1283-1291 (2013).</li>
<li>Ghazi, N. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Treatment+of+retinitis+pigmentosa+due+to+MERTK+mutations+by+ocular+subretinal+injection+of+adeno-associated+virus+gene+vector%3A+results+of+a+phase+I+trial%5BTitle%5D)+AND+%22Hum+Genet%22%5BJournal%5D)">Treatment of retinitis pigmentosa due to MERTK mutations by ocular subretinal injection of adeno-associated virus gene vector: results of a phase I trial.</a> Hum Genet. 135, 327-343 (2016).</li>
<li>Bennett, J., Anand, V., Acland, G. M., Maguire, A. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cross-species+comparison+of+in+vivo+reporter+gene+expression+after+recombinant+adeno-associated+virus-mediated+retinal+transduction%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+Enzymol%22%5BJournal%5D)">Cross-species comparison of in vivo reporter gene expression after recombinant adeno-associated virus-mediated retinal transduction.</a> Methods Enzymol. 316, 777-789 (2000).</li>
<li>Muhlfriedel, R., Michalakis, S., Garcia Garrido, M., Biel, M., Seeliger, M. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Optimized+technique+for+subretinal+injections+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+Mol+Biol%22%5BJournal%5D)">Optimized technique for subretinal injections in mice.</a> Methods Mol Biol. 935, 343-349 (2013).</li>
<li>Hejri, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+non-surgical+method+for+subretinal+delivery+by+trans-scleral+microneedle+injection%5BTitle%5D)+AND+%22Bioeng+Transl+Med%22%5BJournal%5D)">A non-surgical method for subretinal delivery by trans-scleral microneedle injection.</a> Bioeng Transl Med. 10 (3), e10755(2025).</li>
<li>Sastry, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Microscope-Integrated+OCT-Guided+Volumetric+Measurements+of+Subretinal+Blebs+Created+by+a+Suprachoroidal+Approach%5BTitle%5D)+AND+%22Transl+Vis+Sci+Technol%22%5BJournal%5D)">Microscope-Integrated OCT-Guided Volumetric Measurements of Subretinal Blebs Created by a Suprachoroidal Approach.</a> Transl Vis Sci Technol. 10, 24(2021).</li>
<li>Blanc, V. F., Jacob, J. L., Milot, J., Cyrenne, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+oculorespiratory+reflex+revisited%5BTitle%5D)+AND+%22Can+J+Anaesth%22%5BJournal%5D)">The oculorespiratory reflex revisited.</a> Can J Anaesth. 35, 468-472 (1988).</li>
<li>Dewar, K. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+oculocardiac+reflex%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+R+Soc+Med%22%5BJournal%5D)">The oculocardiac reflex.</a> Proc R Soc Med. 69, 373-374 (1976).</li>
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<li>Mai, X., Huang, S., Chen, W., Ng, T. K., Chen, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Application+of+Optical+Coherence+Tomography+to+a+Mouse+Model+of+Retinopathy%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Application of Optical Coherence Tomography to a Mouse Model of Retinopathy.</a> J Vis Exp. (179), e63421(2022).</li>
<li>L'Abbate, D., Prescott, K., Geraghty, B., Kearns, V. R., Steel, D. H. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Biomechanical+considerations+for+optimising+subretinal+injections%5BTitle%5D)+AND+%22Surv+Ophthalmol%22%5BJournal%5D)">Biomechanical considerations for optimising subretinal injections.</a> Surv Ophthalmol. 69, 722-732 (2024).</li>
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</ol>

<table><tbody><tr><td>Inyección de cloruro de sodio al 0,9%, USP</td><td>Hospira</td><td>PAA130066</td><td></td></tr><tr><td>Solución oftálmica de sulfato de atropina al 1%, USP</td><td>Akorn</td><td>NDC 17478-215-05</td><td></td></tr><tr><td>30° cuchillo de diamante</td><td>Katena</td><td>K2-6560</td><td></td></tr><tr><td>Iluminador LED de cuello de cisne dual AmScope de 6W</td><td>Alcance</td><td>LED-11CR</td><td></td></tr><tr><td>Tijeras Vannas en ángulo</td><td>Roboz</td><td>RS-5618</td><td></td></tr><tr><td>Solución de irrigación estéril BSS</td><td>Alcon</td><td>289010-0902</td><td></td></tr><tr><td>Gotas para dilatar los ojos con ciclomidril</td><td>Alcon</td><td>0065-0359-02</td><td>0,2% ciclopentolato, 1% fenilefrina</td></tr><tr><td>Puntas de pipeta epT.I.P.S. MicroloaderTM</td><td>Eppendorf</td><td>5242 956.003</td><td></td></tr><tr><td>Microinyector FemtoJet 4i</td><td>Eppendorf</td><td>E5252000021</td><td>Producto descatalogado</td></tr><tr><td>GenTeal Tears ungüento lubricante para los ojos</td><td>Alcon</td><td>16027802</td><td></td></tr><tr><td>Agujas de microinyección de vidrio</td><td>Clunbury Científico</td><td>B100-58-50</td><td>30° bisel. Diámetro: 50 &micro; m exterior, 29 &micro; m interior</td></tr><tr><td>Solución de isoflurano</td><td>Covetrus</td><td>29405</td><td></td></tr><tr><td>Microscopio de imagen de retina MICRON IV con OCT guiada por imágenes</td><td>Fénix</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>Microscopio estereoscópico SteREO Discovery.V8</td><td>Zeiss</td><td>495015-0001-000</td><td></td></tr><tr><td>Pinzas dentadas de bloqueo Stern-Castroviejo</td><td>Katena</td><td>K5-2552</td><td></td></tr><tr><td>Pinzas dentadas</td><td>Roboz</td><td>RS-5172</td><td></td></tr><tr><td>Hilos de limpieza de tungsteno para agujas de calibre 23s</td><td>Hamilton</td><td>18306</td><td></td></tr><tr><td>Ultracell PVA Lanzas Oculares</td><td>Médico de las Islas Vírgenes Británicas</td><td>40400-8</td><td></td></tr><tr><td>Jeringas de insulina Ultra-Fine2015&nbsp;</td><td>BD</td><td>328438</td><td>3/10 ml, 8 mm (5/16"), 31 G</td></tr></tbody></table>

técnica de inyección subretiniana transescleral mínimamente invasiva optimizada en ratón

Optimized Minimally Invasive Transscleral Subretinal Injection Technique in Mouse

Una inyección exitosa utilizando esta técnica transescleral genera una ampolla subretiniana observable en la OCT inmediatamente después del procedimiento de inyección (Figura 2A). Dado el desafío técnico de esta técnica, el paso de imagen es indispensable para identificar animales inyectados con éxito. Para los investigadores que planean utilizar esta técnica para experimentos de terapia génica, recomendamos realizar inyecciones de práctica con partículas de virus adenoasociados (AAV) que ll...

Técnica de inyección subretiniana transescleral mínimamente invasiva optimizada en ratón

The conventional method of material delivery to the subretinal space in the mouse involves dual perforation of the neural retina, which causes extensive ...

optimized-minimally-invasive-transscleral-subretinal-injection

Research

Investigación

JoVE Journal

Medicine

Medicina

Esta técnica quirúrgica ilustra la inyección de vectores de terapia génica y las células madre en el espacio subretiniano del ojo del ratón.

Inyección subretiniana de vectores de terapia génica y células madre en el ojo del ratón

Fuente: Park, S. W., et al. Abordaje limbal-inyección subretiniana de vectores virales para terapia génica en el epitelio pigmentario de la retina de ratones. J. Vis. Exp. (2015)El video describe el método para la inyección subretiniana de vectores virales en el epitelio pigmentario de la retina (EPR) en un modelo de ratón. Detalla el procedimiento desde la anestesia y la preparación ocular hasta la administración precisa del vector lentiviral, asegurando la integración y expresión génica en el...

Inyección subretiniana de vectores virales en el epitelio pigmentario de la retina en un modelo de ratón

Fuente: Parikh, S., et al. Un método de inyección alternativo y validado para acceder al espacio subretiniano a través de un abordaje posterior transcleral. J. Vis. Exp. (2016)Este video muestra el procedimiento para administrar un tinte fluorescente en el espacio subretiniano de un ratón. El proceso consiste en anestesiar al ratón, preparar el ojo, hacer incisiones precisas para acceder al espacio subretiniano e inyectar el tinte para crear un desprendimiento de retina controlado. Esta técnica...

Aplicación de un tinte fluorescente en el espacio subretiniano de un ratón

Aquí presentamos un protocolo aceptado por la comunidad en formato multimedia para inyectar subretinialmente un bolo de células EPR en ratas y ratones. Este enfoque se puede utilizar para determinar los potenciales de rescate, los perfiles de seguridad y las capacidades de supervivencia de las células EPR injertadas tras la implantación en modelos animales de degeneración de la retina.

Realizar Subretinal Inyecciones en roedores administrar células de la retina epitelio pigmentario en Suspensión

La inyección directa en el nervio óptico de la rata es útil para la investigación regenerativa. Demostramos una técnica mínimamente invasiva para la inyección directa en el nervio óptico de una rata que no implica abrir el cráneo. Con este método, las complicaciones quirúrgicas se minimizan y la recuperación es más rápida.

Técnica mínimamente invasiva para la inyección en nervio óptico de la rata

La inyección subretiniana es una técnica quirúrgica para la entrega efectiva de genes al epitelio pigmentario de la retina en el ojo del ratón.  Aquí describimos un método fácil y replicable para la inyección subretiniana de vectores virales al epitelio pigmentario de la retina en ratones experimentales.

Limbal Inyección-Enfoque Subretinal de vectores virales para terapia génica en ratones epitelio pigmentario de la retina

Las inyecciones subretinianas son la técnica más común para administrar grandes agentes terapéuticos, como proteínas y vectores virales, a los fotorreceptores y al epitelio pigmentario de la retina. Aquí se describe un método alternativo en ratones que se dirige con éxito al espacio subretiniano con un daño colateral mínimo y tiempos de recuperación rápidos.

Un método alternativo de inyección y validado para acceder al espacio subretiniano<i&gt; vía</i&gt; Un enfoque posterior transescleral

Inyección subretinal se ha aplicado extensamente en estudios preclínicos de terapia de reemplazo de la célula de vástago para la degeneración macular relacionada con la edad. En este artículo visualizado, describimos una técnica de inyección subretinal menos riesgoso, reproducible y exacto modificado vía trans-escleral para entregar las células en los ojos de rata.

Desarrollo de un protocolo de refinado para Trans-escleral transplante Subretinal de células epiteliales del pigmento retiniano humano a ojos de rata

Aquí nos muestran un nuevo enfoque al uso de tomografía de coherencia óptica de dominio espectral de alta resolución (HR-SD-OCT) para facilitar la presentación de los agentes de terapia génica en el espacio subretinal, evaluar su cobertura areal y caracterizan la vitalidad del fotorreceptor.

Tomografía de coherencia óptica ultraalta resolución ratón para facilitar la inyección Intraocular en investigación de retina la terapia génica

Este protocolo presenta un abordaje transescleral transpupilar guiado por visión para administrar de forma segura y precisa injertos celulares subretinianos, con una baja tasa de complicaciones quirúrgicas, en receptores de ratón con o sin degeneración retiniana.

Trasplante transescleral guiado por transpupilar de injertos subretinianos en un modelo de ratón con degeneración retiniana

Este artículo describe los métodos para la inyección subretiniana en ratas, utilizando la visualización intraoperatoria para controlar tanto el sitio de la inyección como el área de desprendimiento de retina.

Visualización intraoperatoria de la inyección subretiniana y el desprendimiento de retina en ratas

Aprende una técnica de inyección subretiniana transescleral optimizada en ratón para terapias de enfermedades retinianas hereditarias. Este método minimamente invasivo mejora la reproducibilidad y reduce el daño quirúrgico.

Técnica de inyección subretiniana transescleral mínimamente invasiva optimizada en ratón

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