Name: Linfodenectomía renal bilateral murina (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-12-30T12:45:00.000+00:00
Duration: 6 min 31 s
Description: Aprende la linfadenectomía renal bilateral en ratones para estudiar el tráfico de células inmunes y respuestas autoinmunes renales. Este protocolo quirúrgico permite la supervivencia a largo plazo y análisis de ganglios intactos.

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<ol><li>Amador-Patarroyo, M. J., Peñaranda, A. C., Bernal, M. T. Autoimmunity. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aAmador-Patarroyo%2C+MJ+%22Autoimmunity%3A+From+bench+to+bedside%22">Autoimmunity: From bench to bedside</a>. Anaya, J. -M. , El Rosario University Press. Colombia. (2013).</li>
<li>Echeverri, A. F., Tobón, G. J. Systemic autoimmune diseases. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aEcheverri%2C+AF+%22Autoimmunity%3A+From+bench+to+bedside%22">Autoimmunity: From bench to bedside</a>. Anaya, J. -M. , El Rosario University Press. Colombia. (2013).</li>
<li>García-Carrasco, M., et al. Autoimmune disorders and pathogenesis. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aGarc%C3%ADa-Carrasco%2C+M+%22Autoimmunity%3A+From+bench+to+bedside%22">Autoimmunity: From bench to bedside</a>. Anaya, J. -M. , El Rosario University Press. Colombia. (2013).</li>
<li>Sarmiento-Monroy, J. C., Mantilla, R. D., Rojas-Villarraga, A., Anaya, J. -M., et al. Lupus and immunological profiling. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aSarmiento-Monroy%2C+JC+%22Autoimmunity%3A+From+bench+to+bedside%22">Autoimmunity: From bench to bedside</a>. Anaya, J. -M. , El Rosario University Press. In: Anaya, J.-M. (2013).</li>
<li>Solari, N. F., Cherñavsky, A. C., et al. Rheumatologic autoimmune syndromes. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aSolari%2C+NF+%22Autoimmunity%3A+From+bench+to+bedside%22">Autoimmunity: From bench to bedside</a>. Anaya, J. -M. , El Rosario University Press. Colombia. (2013).</li>
<li>Kamradt, T., Mitchison, N. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tolerance+and+autoimmunity%5BTitle%5D)+AND+%22N+Engl+J+Med%22%5BJournal%5D)">Tolerance and autoimmunity.</a> N Engl J Med. 344 (9), 655-664 (2001).</li>
<li>Rouiz-Argüelles, A., et al. Hematologic autoimmune conditions. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aRouiz-Arg%C3%BCelles%2C+A+%22Autoimmunity%3A+From+bench+to+bedside%22">Autoimmunity: From bench to bedside</a>. Anaya, J. -M. , El Rosario University Press. Colombia. (2013).</li>
<li>Venanzi, E. S., Benoist, C., Mathis, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Good+riddance%3A+Thymocyte+clonal+deletion+prevents+autoimmunity%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Opin+Immunol%22%5BJournal%5D)">Good riddance: Thymocyte clonal deletion prevents autoimmunity.</a> Curr Opin Immunol. 16 (2), 197-202 (2004).</li>
<li>Meng, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Immunological+mechanisms+of+tolerance%3A+Central%2C+peripheral+and+the+role+of+T+and+B+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Asia+Pac+Allergy%22%5BJournal%5D)">Immunological mechanisms of tolerance: Central, peripheral and the role of T and B cells.</a> Asia Pac Allergy. 13 (4), 175-186 (2023).</li>
<li>Swartz, M. A., Hubbell, J. A., Reddy, S. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lymphatic+drainage+function+and+its+immunological+implications%3A+From+dendritic+cell+homing+to+vaccine+design%5BTitle%5D)+AND+%22Semin+Immunol%22%5BJournal%5D)">Lymphatic drainage function and its immunological implications: From dendritic cell homing to vaccine design.</a> Semin Immunol. 20 (2), 147-156 (2008).</li>
<li>O'Byrne, A. M., Van Baarsen, L. G. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lymph+nodes+as+gatekeepers+of+autoimmune+diseases%5BTitle%5D)+AND+%22RMD+Open%22%5BJournal%5D)">Lymph nodes as gatekeepers of autoimmune diseases.</a> RMD Open. 10 (4), e004097(2024).</li>
<li>Hampton, H. R., Chtanova, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lymphatic+migration+of+immune+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Immunol%22%5BJournal%5D)">Lymphatic migration of immune cells.</a> Front Immunol. 10, 1168(2019).</li>
<li>Fortuna, G., Brennan, M. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Systemic+lupus+erythematosus%3A+Epidemiology%2C+pathophysiology%2C+manifestations%2C+and+management%5BTitle%5D)+AND+%22Dent+Clin+North+Am%22%5BJournal%5D)">Systemic lupus erythematosus: Epidemiology, pathophysiology, manifestations, and management.</a> Dent Clin North Am. 57 (4), 631-655 (2013).</li>
<li>Hanly, J. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+frequency+and+outcome+of+lupus+nephritis%3A+Results+from+an+international+inception+cohort+study%5BTitle%5D)+AND+%22Rheumatology%22%5BJournal%5D)">The frequency and outcome of lupus nephritis: Results from an international inception cohort study.</a> Rheumatology. 55 (2), 252-262 (2016).</li>
<li>Andrews, B. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Spontaneous+murine+lupus-like+syndromes%3A+Clinical+and+immunopathological%5BTitle%5D)+AND+%22J+Exp+Med%22%5BJournal%5D)">Spontaneous murine lupus-like syndromes: Clinical and immunopathological.</a> J Exp Med. 148, 1198-1215 (1978).</li>
<li>Harrell, M. I., Iritani, B. M., Ruddell, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lymph+node+mapping+in+the+mouse%5BTitle%5D)+AND+%22J+Immunol+Methods%22%5BJournal%5D)">Lymph node mapping in the mouse.</a> J Immunol Methods. 332 (1-2), 170-174 (2008).</li>
<li>Morse, H. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Abnormalities+induced+by+the+mutant+gene%2C+lpr.+Patterns+of+disease+and+expression+of+murine+leukemia+viruses+in+SJL%2FJ+mice+homozygous+and+heterozygous+for+lpr%5BTitle%5D)+AND+%22J+Exp+Med%22%5BJournal%5D)">Abnormalities induced by the mutant gene, lpr. Patterns of disease and expression of murine leukemia viruses in SJL/J mice homozygous and heterozygous for lpr.</a> J Exp Med. 161 (3), 602-616 (1985).</li>
<li>Ayalon, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Antibody+semorinemab+reduces+tau+pathology+in+a+transgenic+mouse+model+and+engages+tau+in+patients+with+Alzheimer%27s+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Transl+Med%22%5BJournal%5D)">Antibody semorinemab reduces tau pathology in a transgenic mouse model and engages tau in patients with Alzheimer's disease.</a> Sci Transl Med. 13 (593), eabb2639(2021).</li>
<li>Dong, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Antigen+presentation+by+dendritic+cells+in+renal+lymph+nodes+is+linked+to+systemic+and+local+injury+to+the+kidney%5BTitle%5D)+AND+%22Kidney+Int%22%5BJournal%5D)">Antigen presentation by dendritic cells in renal lymph nodes is linked to systemic and local injury to the kidney.</a> Kidney Int. 68 (3), 1096-1108 (2005).</li>
<li>Lan, H. Y., Nikolic-Paterson, D. J., Atkins, R. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Trafficking+of+inflammatory+macrophages+from+the+kidney+lymph+nodes+during+experimental+glomerulonephritis%5BTitle%5D)+AND+%22Clin+Exp+Immunol%22%5BJournal%5D)">Trafficking of inflammatory macrophages from the kidney lymph nodes during experimental glomerulonephritis.</a> Clin Exp Immunol. 92, 336-341 (1993).</li>
<li>Karmali, R. J., Suami, H., Wood, C. G., Karam, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lymphatic+drainage+in+renal+cell+carcinoma%3A+Back+to+the+basics%5BTitle%5D)+AND+%22BJU+Int%22%5BJournal%5D)">Lymphatic drainage in renal cell carcinoma: Back to the basics.</a> BJU Int. 114 (6), 806-817 (2014).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>Circuito anestésico</td><td>Cualquiera</td><td></td><td>O anestésico inyectable</td></tr><tr><td>Citómetro de flujo BD LSRII (o equivalente)</td><td>BD Biociencias</td><td></td><td>Equipado con el software FACS Diva</td></tr><tr><td>Buprenorfina XR</td><td>Cualquiera</td><td></td><td>Para la analgesia</td></tr><tr><td>Medios de cultivo celular &nbsp;</td><td>Cualquiera</td><td></td><td>(para técnicas de células vivas; es decir, DMEM o RPMI)</td></tr><tr><td>DAPI</td><td>Bioleyenda</td><td>422801</td><td>Concentración de trabajo: 15 ug/mL</td></tr><tr><td>Luces LED de microscopio de cuello de oca dobles/dobles</td><td>Cualquiera</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Etanol (70% en agua)</td><td>Cualquiera</td><td></td><td>Para limpiar</td></tr><tr><td>CD45.2 (104) anti-ratón conjugado con FITC (104)</td><td>Bioleyenda</td><td>109806</td><td>Concentración de trabajo: 5 ug/mL</td></tr><tr><td>Pinzas: Pinzas de punta fina en ángulo (x2)</td><td>Roboz</td><td>RS-5058</td><td>Material: Dumoxel; Patrón #5, ángulo de 45 grados; Tamaño de punta 0,1 x 0,06mm</td></tr><tr><td>Pinzas: Pinzas de punta fina</td><td>Roboz</td><td>RS-4960</td><td>Material: Dumostar; Patrón #1; Tamaño de la punta: 0,20 x 0,12mm</td></tr><tr><td>Pinzas: Pinzas de punta fina</td><td>Roboz</td><td>RS-4966</td><td>Material: Dumostar, Punta de Biologie; Patrón #3; Tamaño de la punta: 0,08 x 0,04mm</td></tr><tr><td>Lidocaína</td><td>Cualquiera</td><td></td><td>Para la analgesia</td></tr><tr><td>Ratones</td><td>Jax</td><td></td><td>Para la cepa C57BL/6, ratones salvajes: The Jackson Laboratories #000664</td></tr><tr><td>Clavadores de aguja</td><td>Roboz</td><td>RS-6410</td><td>Portaagujas Castroviejo; Recto</td></tr><tr><td>Microscopio operador</td><td>Leica</td><td>MZ9.5</td><td>Microscopio de cabezal estéreo Leica Mz9.5</td></tr><tr><td>OPCIONAL: tinte azul Evans</td><td>Sigma</td><td>E2129-10G</td><td>Para trazar la linfática.</td></tr><tr><td>Solución salina tamponada con fosfato (PBS)</td><td>Cualquiera</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Solución de povidona/yodo</td><td>Cualquiera</td><td></td><td>Para la preparación/esterilización de la piel</td></tr><tr><td>Tijeras: tijeras de punta extra fina</td><td>Roboz</td><td>RS-5605</td><td>McPherson-Vannas; Filo de corte de 3mm; curva</td></tr><tr><td>Tijeras: Tijeras medianas</td><td>Roboz</td><td>RS-5676</td><td>Noyes; filo cortante de 13 mm; recto</td></tr><tr><td>Pegamento quirúrgico</td><td>Cualquiera</td><td></td><td>por ejemplo, adhesivo de tejido 3M Vetbond</td></tr><tr><td>Sutura: monofilamento azul 6-0 polipropileno</td><td>Cualquiera</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Fijador tisular</td><td>Cualquiera</td><td></td><td>(para histología planificada; es decir, 10% formalina neutral amortiguada o 4% paraformaldehído)</td></tr><tr><td>Almohadilla térmica de circulación de agua caliente</td><td>Cualquiera</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Ratones&nbsp;</td><td>&nbsp; Los laboratorios Jackson</td><td></td><td>Para la cepa Balb/c, ratones propensos al lupus (MRL/MpJ-Fas-lpr/J): #000485</td></tr></tbody></table>

linfodenectomía renal bilateral murina

Murine Bilateral Renal Lymphadenectomy

Linfodenectomía renal bilateral murina

Autoimmune diseases are the result of immune cells inappropriately targeting self-tissue, leading to pathology and damage to vital organs. Secondary ...

Research

Investigación

JoVE Journal

Immunology and Infection

Inmunología e Infección

Para seguir la progresión de una respuesta inmune con el tiempo dentro del mismo ratón, los ganglios linfáticos se pueden extirpar mediante cirugía secuencial. Aquí se describe cómo esta técnica se puede realizar.

Murino linfáticos superficiales Cirugía de los ganglios

Este video muestra el procedimiento de aislamiento quirúrgico del ganglio linfático de drenaje inguinal de un modelo de ratón. La incisión de la región abdominal proporciona acceso al ganglio linfático inguinal, que se extrae quirúrgicamente. El ganglio linfático inguinal translúcido recolectado se puede utilizar para estudios inmunológicos.

Recolección de un ganglio linfático drenante inguinal de un modelo murino

Este video muestra una técnica para canular el conducto linfático mesentérico en ratas. Este método permite el acceso directo a todo el volumen de componentes presentes en el líquido linfático.

Canulación del conducto linfático mesentérico en un modelo de rata para recolectar líquido linfático

Modelos de progresión de la enfermedad espontánea carcinoma metastásico de células renales (CCR) pueden ser utilizados para la evaluación de los tratamientos en un entorno clínicamente relevante. Este protocolo demuestra diferentes procedimientos para la implantación de células tumorales de riñón ortotópico, nefrectomía adecuado, y finalmente describe una guía para la necropsia de puntuación visual y bioluminiscente de carga metastásica y la localización.

Modelado espontánea metastásico Carcinoma de células renales (CCR metastásico) en ratones después de la nefrectomía

Aquí describimos una técnica para canular el conducto linfático mesentérico en ratas que permite cuantificar el transporte de lípidos y fármacos a través del sistema linfático después de la administración intestinal. La técnica se puede adaptar para evaluar las concentraciones de linfa mesentérica y/o el transporte de líquidos, células inmunitarias, péptidos, proteínas y moléculas lipofílicas.

La linfa mesentérica Conducto canulado Rata Modelo: Aplicación de la Evaluación de Intestinal Linfático Transporte de Drogas

El objetivo de este manuscrito es describir los pasos necesarios para realizar un trasplante de riñón en un ratón, prestando especial atención a los detalles de la anastomosis arterial.

Riñón murino Trasplante Técnica

Ingeniería de tejido renales construcciones proporcionan una solución para la escasez de órganos y los efectos deletéreos de la diálisis. Aquí, describimos un protocolo micro disecar riñones murinos para el aislamiento de segmentos córtico-medular. Estos segmentos están implantados en construcciones celulares libre de andamio, formando organoides renal.

Microdisección de segmentos de tejido Renal primaria y la incorporación con la tecnología de construcción de andamio-libre nuevo

Este manuscrito presenta un protocolo estandarizado para una nefrectomía 5/6 por bipolectomía aguda mediante laparotomía de línea media en un modelo de rata, con el objetivo de inducir un estado de insuficiencia renal mediante la reducción del parénquima renal con un alto grado de precisión metódica y bajo riesgo de error técnico.

5/6 Nefrectomía con bipolectomía aguda mediante laparotomía de línea media en ratas

Este protocolo describe un método para inducir la obstrucción ureteral unilateral (UUO) en ratones para estudiar la progresión de la fibrosis tisular en la nefropatía obstructiva. Incluye procedimientos quirúrgicos, cuidados postoperatorios y métodos para la evaluación de la fibrosis.

Modelo de obstrucción ureteral unilateral para la investigación de la fibrosis intersticial renal

Este artículo proporciona instrucciones detalladas para permitir a los investigadores realizar la obstrucción ureteral unilateral reversible en ratones utilizando un modelo estandarizado que permite el análisis de los resultados estructurales y funcionales a largo plazo después de la reversión de la obstrucción ureteral prolongada.

Un modelo de ratón para evaluar los resultados estructurales y funcionales a largo plazo después de la reversión de la obstrucción ureteral unilateral prolongada

Este protocolo describe un procedimiento de supervivencia para una linfadenectomía mesentérica murina segura y bien tolerada en cada una de las cuatro estaciones a lo largo de la cadena de ganglios linfáticos mesentéricos. Este procedimiento es adaptable para permitir la interrupción selectiva de la comunicación linfática con el colon distal, el colon proximal y/o el intestino delgado.

Linfodenectomía mesentérica murina por alteración selectiva de la comunicación linfática con el intestino específico de la región

Aprende la linfadenectomía renal bilateral en ratones para estudiar el tráfico de células inmunes y respuestas autoinmunes renales. Este protocolo quirúrgico permite la supervivencia a largo plazo y análisis de ganglios intactos.

Linfodenectomía renal bilateral murina

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