Name: Modelo de Ratón de Embolia Microvascular para Microscopía de Dos Fotones In Vivo usando Microsferas de Poliestireno Fluorescente (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-11-21T12:40:00.000+00:00
Duration: 8 min 29 s
Description: Aprende a crear un modelo de embolia microvascular en ratones usando microesferas fluorescentes para microscopía de dos fotones in vivo. Este método permite estudiar los efectos de la obstrucción capilar en tiempo real.

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<table><tbody><tr><td>Aguja calibre 27 (0,1x16 mm)</td><td>Terumo</td><td>-</td><td>Aguja calibre 27 (Paso 2.1.2.)</td></tr><tr><td>Software Articulus</td><td>-</td><td>-</td><td>Software de análisis 3D (Pasos 4.2.2 y 4.3.3)</td></tr><tr><td>Betadine 30 ml (100 mg/ml)</td><td>Mylan</td><td>8712207037612</td><td>Betadina/yodo (Paso 1.1.8. & 2.2.10.)</td></tr><tr><td>C& Monómero B</td><td>Sun Medical</td><td>7111</td><td>Componente del superpegamento (Paso 1.3.1.)</td></tr><tr><td>Cuchillas quirúrgicas de acero al carbono (n.15)</td><td>Swann-Morton</td><td>205</td><td>Hoja para arañar el cráneo (Paso 1.2.4.)</td></tr><tr><td>Carprofeno (50 mg/ml)</td><td>Zoetis</td><td>-</td><td>Medicación para el dolor (pasos 1.1, 1.6, 2.2 y 2.8)</td></tr><tr><td>Catalizador</td><td>Sun Medical</td><td>7110</td><td>Componente del superpegamento (Paso 1.3.1.)</td></tr><tr><td>Catéter (DI 0,31 DO 0,64 mm)</td><td>Freudenberg</td><td>228-0661</td><td>Catéter transparente (Paso 2.1.1.)</td></tr><tr><td>Gancho de papel de seda fabricado por Costom</td><td>-</td><td>-</td><td>Gancho de tejido (Paso 2.3.4.)</td></tr><tr><td>Puntas de algodón</td><td>-</td><td>-</td><td>Punta de algodón (Paso 1.1.8, 1.2.4 y 1.5.1.)</td></tr><tr><td>Vidrio de cubierta</td><td>Instrumentos Warner</td><td>64-0724</td><td>Cristal de la cubierta craneal de la ventana (Paso 1.4.2.)</td></tr><tr><td>Barra de cabeza de ratón hecha a medida</td><td>-</td><td>-</td><td>Barra de cabeza para soporte de imagen (Paso 1.3.2.)&nbsp;</td></tr><tr><td>Soporte de imagen para ratones personalizado y nbsp;</td><td>-</td><td>-</td><td>Imagen del soporte de ratón (Paso 1.4.1. & 3.1.1.)</td></tr><tr><td>Marco estereotáctico personalizado</td><td>-</td><td>-</td><td>Marco estereotáctico (Paso 1.1.7.)</td></tr><tr><td>Fluido para cimientos dentales</td><td>Kulzer</td><td>64707937</td><td>Componente del cemento dental (Paso 1.3.3.)</td></tr><tr><td>Polvo de cemento dental</td><td>Kulzer</td><td>64707945</td><td>Componente del cemento dental (Paso 1.3.3.)</td></tr><tr><td>Broca dental y nbsp;</td><td>Saeshin</td><td>&nbsp; L-206</td><td>Ejercicio (Paso 1.4.3.)</td></tr><tr><td>Dexametasona (4 mg/ml)</td><td>Centrafarm</td><td>-</td><td>Medicación preoperatoria (Paso 1.1.4)</td></tr><tr><td>Pinzas de disección</td><td>Braun-Aesculap</td><td>BD023R</td><td>Pinzas (Paso 1.2.2. & 2.3.2.)</td></tr><tr><td>Broca de muelas PK/100,5 (0,5mm)</td><td>Bellas Ciencias</td><td>19007-05</td><td>Broca (Paso 1.4.3.)</td></tr><tr><td>Duratears (3,5 g)</td><td>Alcon</td><td>-</td><td>Pomada para los ojos (Paso 1.1.8. & 2.2.7.)</td></tr><tr><td>Pegamento epoxi (1g)</td><td>Pattex</td><td>9H PSMG3X</td><td>Pegamento epoxi (Paso 1.5.2. & 2.1.1.)</td></tr><tr><td>Pinzas micro finas rectas</td><td>Herramientas científicas finas</td><td>Dumont #5</td><td>Pinzas micro finas (Paso 2.6.6.)</td></tr><tr><td>FITC-Dextran (70 KDa)</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>FD70S</td><td>Solución FITC-Dextran (Paso 2.5.2.)</td></tr><tr><td>Isoflurano (1000 mg/g)</td><td>Laboratorios Karizoo S.A.</td><td>118938</td><td>Anestesia (Paso 1.1.6. & 2.2.5.)</td></tr><tr><td>gran criomicrotomo de imagen fluorescente 3D &nbsp;</td><td>Hechos a medida</td><td>-</td><td>FICS grandes-3D (Paso 4.3.3)</td></tr><tr><td>Lidocaína (100 mg/ml)</td><td>Aspen</td><td>-</td><td>Anestesia local (Paso 1.2.3. y 2.2.10)</td></tr><tr><td>Microtijeras Vannas 3-3/8 de pulgada</td><td>Braun-Aesculap</td><td>OC498R</td><td>Microtijeras (Paso 2.6.2)</td></tr><tr><td>Pinzas de microsutura con mango redondo</td><td>Braun-Aesculap</td><td>FD280R</td><td>Microforeceptores (Paso 2.3.3.)</td></tr><tr><td>Pinzas para atar microsuturas con mango redondo doblado</td><td>Braun-Aesculap</td><td>FD281R</td><td>Microforeceptores doblados (Paso 1.5.1. & 2.3.3.)</td></tr><tr><td>Micro clip vascular</td><td>Braun-Aesculap</td><td>FD562R</td><td>Clip de recipiente (Paso 2.6.1.)</td></tr><tr><td>Microcatéter (ID: 0,23114 mm DI, 0,27432 mm)</td><td>Microlumen</td><td></td><td>Micro-catéter (Paso 2.1.1.)</td></tr><tr><td>Almohadilla térmica para ratón y sonda rectal</td><td>Stoelting</td><td>53800R</td><td>Almohadilla térmica (Paso 1.1.2. & 2.2.2.)</td></tr><tr><td>NG2-DsRed ratones</td><td>Jackson Laboratory, Bar Harbor, EE. UU., Nº de Stock 008241</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Monolaroto de sorbitano de polietileno glicol</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>9005-64-5</td><td>Tween20 (Paso 2.5.2.)</td></tr><tr><td>FluorEsferas de poliestireno azul (365/415)</td><td>Invitrogen</td><td>F8829</td><td>Microsferas azules (Paso 2.5.1.)</td></tr><tr><td>FluorEsferas de poliestireno rojo (580/605)</td><td>Invitrogen</td><td>F8834</td><td>Microesfera roja (Paso 2.5.1.)</td></tr><tr><td>Jaula de recuperación</td><td>-</td><td>-</td><td>Jaula de recuperación (Pasos 1.6.2. y 2.8.2.)</td></tr><tr><td>Corte inverso de aguja curva de 3/8 (12 mm) con sutura</td><td>Bbraun</td><td>0762067</td><td>Sutura (Paso 2.7.5)</td></tr><tr><td>Ropivaca y el diyo; Ne (2 mg/ml)</td><td>-</td><td>-</td><td>Medicación y nbsp; (Paso 1.1.5.)</td></tr><tr><td>pequeño criomicrotomo de imagen fluorescente 3D y nbsp; &nbsp;</td><td>Hechos a medida</td><td></td><td>Pequeños-3D-FICS (Paso 4.2.2)</td></tr><tr><td>Spongostan</td><td>Ethicon</td><td>MS0005</td><td>Spongostan (Paso 1.4.6.)</td></tr><tr><td>Microscopio quirúrgico</td><td>Euromex Microscopen B.V.</td><td>NZ.1903-B</td><td>Microscopio para cirugía (Paso 1.2. 2.1.1.)</td></tr><tr><td>Tijeras quirúrgicas</td><td>Braun-Aesculap</td><td>BC303R</td><td>Tijeras quirúrgicas (Paso 1.2.2. & 2.3.2.)</td></tr><tr><td>Bomba de jeringuilla (para jeringuillas de 1 ml)</td><td>Aparato Havard</td><td>70-2208</td><td>1 ml de bomba de jeringuilla (Paso 2.5.6.)</td></tr><tr><td>Hilo, 100 m y nbsp; 4/0 1,5&nbsp; &nbsp;</td><td>Bbraun</td><td>F1134035</td><td>Hilos 4/0.15 (Paso 2.4.3.)</td></tr><tr><td>Ratones TIE2-GFP</td><td>Laboratorio Jackson, Bar Harbor, EE. UU., Stock No. 003658</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Plumero ultra puro</td><td>Thorlabs</td><td>CA6-EU</td><td>Aire comprimido (Paso 1.2.5.)</td></tr><tr><td>Transparente universal de polímero</td><td>Sun Medical</td><td>T058E</td><td>Componente del superpegamento (Paso 1.3.1.)</td></tr></tbody></table>

modelo de ratón de embolia microvascular para microscopía de dos fotones in vivo usando microsferas de poliestireno fluorescente

Microvascular Embolism Mouse Model for In Vivo Two-photon Microscopy Using Fluorescent Polystyrene Microspheres

Modelo de Ratón de Embolia Microvascular para Microscopía de Dos Fotones In Vivo usando Microsferas de Poliestireno Fluorescente

Microvascular occlusions in the brain are relatively common but remain largely understudied. The event rate, long-term consequences, and potential ...

microvascular-embolism-mouse-model-for-vivo-two-photon-microscopy

Research

Investigación

JoVE Journal

Neuroscience

Neurociencia

En este artículo se describe una secuencia optimizada de eventos para obtener imágenes multimodal de los injertos celulares en el cerebro de los roedores por medio de: (i) en la bioluminiscencia in vivo y la resonancia magnética, y (ii) el análisis post mortem histológico. La combinación de estas modalidades de imágenes en un solo animal permite la evaluación del injerto celular con alta resolución, sensibilidad y especificidad.

Imagen multimodal de implante de células madre en el sistema nervioso central de ratones

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Modelado de accidente cerebrovascular fototrombótico en modelo de ratón: una técnica de iluminación láser a través del cráneo de ratón después de la administración de un tinte fotosensible para inducir fototrombosis

Este video demuestra la técnica de microscopía de fluorescencia intravital para estudiar la formación de trombos en un modelo de ratón. Al ratón se le inyecta un polisacárido marcado con fluoróforos para controlar la circulación sanguínea. Al iluminarse con una luz de alta intensidad, la inducción fototóxica de una lesión en la microvasculatura del oído conduce a la formación de un trombo, que se confirma mediante la visualización de la obstrucción en el flujo sanguíneo.

Microscopía de fluorescencia intravital para estudiar la formación de trombos microvasculares

Fuente: Jongbloets, B. C., et al. Visualización de la actividad de la proteína quinasa A en ratones que se comportan con cabeza fija utilizando microscopía de imágenes de por vida de fluorescencia de dos fotones in vivo. J. Vis. Exp. (2019) Este video demuestra un procedimiento de microscopía de imágenes de fluorescencia de dos fotones para visualizar la actividad de la proteína quinasa A en ratones que se comportan con la cabeza fija durante la locomoción forzada.

Visualización de la actividad de la proteína quinasa A en un ratón mediante microscopía de imágenes de fluorescencia de dos fotones 

Source: Nishimura, C.  y cols. Cuantificación de la arquitectura vascular cerebral mediante microscopía de dos fotones en un modelo de ratón de neuroinflamación inducida por el VIH. J. Vis. Exp. (2016). Este video demuestra la visualización in vivo de los capilares corticales en el cerebro del ratón utilizando microscopía de dos fotones. Describe los pasos para inyectar un tinte fluorescente en un ratón anestesiado con una ventana cortical de cráneo delgado, preparando la configuración para la...

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Fuente: Kim, D., et. al. Combinación de imágenes fluorescentes de infrarrojo cercano y tomografía microcomputarizada para la visualización directa de tromboembolios cerebrales. J. Vis. Exp. (2016)Este video demuestra la visualización de trombos cerebrales en ratones utilizando imágenes de microtomografía computarizada (micro-CT). A un modelo de ratón con trombo cerebral se le inyectan nanopartículas de oro dirigidas a la fibrina que actúan como agente de contraste. El ratón se coloca en la cama...

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El endotelio glicocalix / endotelial capa superficial está muy bien estudiada mediante microscopía intravital. Microscopía intravital es técnicamente difícil en un órgano en movimiento, como el pulmón. Se demuestra cómo simultánea campo claro y microscopía de fluorescencia se puede usar para estimar el espesor de capa de la superficie endotelial en un libremente...

Medición in vivo de la capa de ratón pulmonar superficie endotelial

Este protocolo describe la aplicación de la tomografía combinado fluorescente en el infrarrojo cercano (NIRF) de formación de imágenes y micro-computarizada (microCT) para la visualización de tromboembolia cerebral. Esta técnica permite la cuantificación de la carga de trombo y la evolución. La técnica de imagen NIRF imagina y marcado con fluorescencia de trombos en el cerebro escindido, mientras que la técnica microCT visualiza trombo dentro de animales vivos utilizando nanopartículas de oro-.

Imagen Fluorescente combinado del infrarrojo cercano y la tomografía computarizada-Micro para visualizar de manera directa tromboembolia cerebral

La imagen in vivo es una herramienta poderosa para el estudio de la biología en la salud y la enfermedad. Este protocolo describe imágenes transpupilares de la retina del ratón con un microscopio estándar de dos fotones. También demuestra diferentes métodos de imagen in vivo para etiquetar fluorescentemente múltiples cohortes celulares de la retina.

Imágenes transpupilares de dos fotones in vivo de la retina del ratón

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Microscopía electrónica y de luz correlativa de inclusión posterior a Epon

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Modelo de inyección mínimamente invasiva de cisterna magna para estudios de metástasis leptomeníngeas en ratones

Aprende a crear un modelo de embolia microvascular en ratones usando microesferas fluorescentes para microscopía de dos fotones in vivo. Este método permite estudiar los efectos de la obstrucción capilar en tiempo real.

Modelo de Ratón de Embolia Microvascular para Microscopía de Dos Fotones In Vivo usando Microsferas de Poliestireno Fluorescente (Video) | JoVE Journal

Modelo de Ratón de Embolia Microvascular para Microscopía de Dos Fotones In Vivo usando Microsferas de Poliestireno Fluorescente

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