Evaluación de la fragilidad en un modelo de ratón envejecido

El envejecimiento implica una pérdida progresiva de las funciones normales y varía entre individuos. La fragilidad refleja la incapacidad para mantener la función con los factores estresantes. Estudiar la fragilidad puede mejorar la comprensión de la variabilidad y progresión del envejecimiento.

A pesar del uso frecuente de evaluaciones clínicas de fragilidad, muchos proyectos preclínicos de envejecimiento no incluyen la fragilidad como variable de interés, posiblemente debido a obstáculos para implementar una herramienta de evaluación de fragilidad. Este índice de fragilidad no requiere equipos especializados ni pruebas estresantes para ratones. Es personalizable, permitiendo a los investigadores adaptar las evaluaciones a dimensiones específicas de fragilidad relevantes para su enfoque de investigación.

Esperamos que presentar la viabilidad de simplificar e implementar un índice de fragilidad anime a otros a utilizar la fragilidad como variable de interés, dando lugar a proyectos más relevantes clínicamente. Para empezar, divide la evaluación en examen en campo abierto, examen manual y pesaje. Para el examen en campo abierto, traslada el ratón de interés a un entorno abierto.

Examina características físicas como alopecia, pérdida del color del pelaje, dermatitis, mal estado del pelaje, cifosis, rigidez de la cola, trastornos de la marcha, temblor y respiración anormal. Para el examen manual, acaricia suavemente el ratón. Examina alopecia, pérdida del color del pelo, dermatitis, tumores, abdomen distendido, cataratas, secreción ocular, prolapso rectal, prolapso vaginal o peneano y baja puntuación de condición corporal.

Evalúa el peso tras exámenes en campo abierto y manuales a una hora constante del día, entre dos y cuatro horas desde el inicio del periodo inactivo. Durante el examen en campo abierto, evalúa si hay trastornos de la marcha. Arrastrar extremidades, girar en círculos, tambalearse o mantener una postura amplia son signos de trastornos de la marcha.

Para evaluar más a fondo los trastornos de la marcha, coloque al ratón sobre una tapa de jaula grande e inclínala. Rocía suavemente la parte trasera del ratón para animar a subir. A continuación, permite que el ratón se aclimate y observa al ratón en reposo para detectar cambios en la frecuencia y profundidad de la respiración.

Acaricia suavemente la cola con un dedo para evaluar la rigidez de la cola. Durante el examen en campo abierto, evalúa criterios tegumentarios que incluyen alopecia, pérdida de color del pelaje, dermatitis y mal estado del pelaje. La alopecia es común en la parte posterior del cuello y será visible a medida que el ratón se mueva libremente.

La cifosis se evalúa mejor observando la curvatura espinal del ratón durante el examen en campo abierto, tanto en reposo como en movimiento. La cifosis se puntua en función del grado de curvatura anormal de la columna visible durante el movimiento y la postura encorvada en reposo. Examina manualmente con el ratón con el cuello del cuello.

Utiliza los dedos para evaluar la extensión de la pérdida de grasa y músculo alrededor del hueso púbico y la parte inferior de la columna, que se utilizan para evaluar la puntuación de condición corporal. Mientras sostienes el ratón, examina los ojos en busca de signos de secreción, costra o decoloración, y cataratas. Observa las zonas torácica y abdominal para detectar signos adicionales de alopecia, que suelen aparecer en las articulaciones, cambios en el pelaje, color y dermatitis.

Frota suavemente con un dedo el abdomen para comprobar la presencia de tumores o abdomen distendido. Inclina cuidadosamente la cabeza del ratón hacia abajo para evaluar la presencia de prolapso rectal y vaginal o peneano. Si se sospecha un prolapso, baja suavemente el ratón hacia el área de campo abierto.

Una vez que haya vuelto a descansar, levanta suavemente la cola para confirmar el prolapso en ausencia de cualquier esfuerzo causado por el manipulación. Tras los exámenes en campo abierto y manuales, pesa el ratón. Pone la báscula en cero entre cada animal y registra el peso en el peso más cercano de 0,1 gramos.

Durante la evaluación de cada ratón, asigna una puntuación de 0, 0,5 o 1,0 a cada medida de fragilidad. Anota el peso y calcula la media de las 16 medidas para generar una puntuación final de fragilidad. Toma notas de cualquier cambio de salud o comportamiento que requiera seguimiento, así como de cualquier comportamiento anormal tras el manipulo.

Los valores del índice de fragilidad aumentaron progresivamente con la edad en todos los grupos medidos a los 12, 18, 24 y 30 meses. A los 18 meses, la alopecia, la cifosis y la pérdida del color del pelaje fueron los déficits más frecuentes observados, especialmente en ratones machos. A los 24 meses, la puntuación de condición corporal y los déficits en el mal estado del pelaje se hicieron comunes.

Los datos longitudinales mostraron que la fragilidad aumentaba con la edad en ambos sexos, con ratones machos con valores de fragilidad más altos a edades similares. Se observaron muy pocos machos más allá de las 120 semanas de edad, lo que indica una supervivencia reducida en machos. Los ratones que experimentaron una pérdida de peso corporal superior al 10% eran de edad avanzada y tenían valores de índice de fragilidad superiores a 0,15.

La mayoría de los ratones presentaron cambios mínimos en el índice de fragilidad inferiores a 0,05 en intervalos de dos semanas. Los aumentos mayores de fragilidad fueron más frecuentes en edades avanzadas y acompañados de una pérdida de peso notable. Se observaron cuatro fenotipos de cambio de peso en la fragilidad, siendo el más común el aumento de fragilidad sin cambio de peso, presente en el 46% de los animales rastreados.

El 30% no mostró cambios ni en fragilidad ni en peso. El 12% de los ratones mostró un aumento de fragilidad con el aumento de peso o un aumento de fragilidad con la pérdida de peso.