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<ol><li>Knudsen, L., Ochs, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+micromechanics+of+lung+alveoli%3A+structure+and+function+of+surfactant+and+tissue+components%5BTitle%5D)+AND+%22Histochem+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">The micromechanics of lung alveoli: structure and function of surfactant and tissue components.</a> Histochem Cell Biol. 150 (6), 661-676 (2018).</li>
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<li>Kılıç, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mechanical+forces+induce+an+asthma+gene+signature+in+healthy+airway+epithelial+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Rep%22%5BJournal%5D)">Mechanical forces induce an asthma gene signature in healthy airway epithelial cells.</a> Sci Rep. 10 (1), 966(2020).</li>
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<li>Georas, S. N., Rezaee, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Epithelial+barrier+function%3A+at+the+front+line+of+asthma+immunology+and+allergic+airway+inflammation%5BTitle%5D)+AND+%22J+Allergy+Clin+Immunol%22%5BJournal%5D)">Epithelial barrier function: at the front line of asthma immunology and allergic airway inflammation.</a> J Allergy Clin Immunol. 134 (3), 509-520 (2014).</li>
<li>Ivanov, A. I., Parkos, C. A., Nusrat, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cytoskeletal+regulation+of+epithelial+barrier+function+during+inflammation%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Pathol%22%5BJournal%5D)">Cytoskeletal regulation of epithelial barrier function during inflammation.</a> Am J Pathol. 177 (2), 512-524 (2010).</li>
<li>Barnett, K. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+epithelial-immune+circuit+amplifies+inflammasome+and+IL-6+responses+to+SARS-CoV-2%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Host+Microbe%22%5BJournal%5D)">An epithelial-immune circuit amplifies inflammasome and IL-6 responses to SARS-CoV-2.</a> Cell Host Microbe. 31 (2), 243-259.e6 (2023).</li>
<li>Li, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((HB-EGF-induced+IL-8+secretion+from+airway+epithelium+leads+to+lung+fibroblast+proliferation+and+migration%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Pulm+Med%22%5BJournal%5D)">HB-EGF-induced IL-8 secretion from airway epithelium leads to lung fibroblast proliferation and migration.</a> BMC Pulm Med. 21 (1), 347(2021).</li>
<li>Guo, T. J. F., Singhera, G. K., Leung, J. M., Dorscheid, D. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Airway+epithelial-derived+immune+mediators+in+COVID-19%5BTitle%5D)+AND+%22Viruses%22%5BJournal%5D)">Airway epithelial-derived immune mediators in COVID-19.</a> Viruses. 15 (8), 1655(2023).</li>
<li>Thomas, D., Choi, S., Alamana, C., Parker, K. K., Wu, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cellular+and+engineered+organoids+for+cardiovascular+models%5BTitle%5D)+AND+%22Circ+Res%22%5BJournal%5D)">Cellular and engineered organoids for cardiovascular models.</a> Circ Res. 130 (12), 1780-1802 (2022).</li>
<li>Li, K., He, Y., Jin, X., Jin, K., Qian, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Reproducible+extracellular+matrices+for+tumor+organoid+culture%3A+challenges+and+opportunities%5BTitle%5D)+AND+%22J+Transl+Med%22%5BJournal%5D)">Reproducible extracellular matrices for tumor organoid culture: challenges and opportunities.</a> J Transl Med. 23 (1), 497(2025).</li>
<li>Vande Geest, J. P., Di Martino, E. S., Vorp, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+analysis+of+the+complete+strain+field+within+Flexercell+membranes%5BTitle%5D)+AND+%22J+Biomech%22%5BJournal%5D)">An analysis of the complete strain field within Flexercell membranes.</a> J Biomech. 37 (12), 1923-1928 (2004).</li>
<li>Mondoñedo, J. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+high-throughput+system+for+cyclic+stretching+of+precision-cut+lung+slices+during+acute+cigarette+smoke+extract+exposure%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Physiol%22%5BJournal%5D)">A high-throughput system for cyclic stretching of precision-cut lung slices during acute cigarette smoke extract exposure.</a> Front Physiol. 11, 566(2020).</li>
</ol>

<a href="https://app.jove.com/t/6700">This corrects</a> the article <a href="https://dx.doi.org/10.3791/69447">10.3791/69447</a>

An erratum was issued for:&#160;<a href="https://www.jove.com/t/69447">Generation of 3D Collagen-Embedded A549/MRC-5 Alveolar Organoids using a Mechanical Cell-Stretching Bioreactor</a>.&#160;

Erratum: Generation of 3D Collagen-Embedded A549/MRC-5 Alveolar Organoids using a Mechanical Cell-Stretching Bioreactor

<table><tbody><tr><td>Tubo microcentrífuga de 1,5 mL</td><td>Eppendorf</td><td>0030 125.215</td><td></td></tr><tr><td>Tubo cónico de 15 mL</td><td>Fisher Scientific</td><td>14-959-53A</td><td></td></tr><tr><td>16% de paraformaldehído</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>28908</td><td></td></tr><tr><td>2-mercaptoetanol</td><td>Millipore Sigma</td><td>M3148</td><td></td></tr><tr><td>Tubo cónico de 50 mL</td><td>Fisher Scientific</td><td>14-432-22</td><td></td></tr><tr><td>Placa circular de espuma Tissue Train de 6 pozos (membrana flexible)</td><td>Flexcell International</td><td>TTCF-5001</td><td></td></tr><tr><td>Celdas A549</td><td>Colección de Cultura de Tipo Americano (ATCC)</td><td>CCL-171</td><td></td></tr><tr><td>Compresor de aire</td><td>Herramientas Aerodinámicas de California</td><td>10020DSPCAD</td><td></td></tr><tr><td>Albúmina sérica bovina</td><td>Millipore Sigma</td><td>A9418</td><td></td></tr><tr><td>Buffer RLT</td><td>Qiagen</td><td>79216</td><td></td></tr><tr><td>Incubadora CO2</td><td>PHCBI</td><td>MCO-170AICUVL-PA</td><td></td></tr><tr><td>Solución de extracción de organoides Cultrex</td><td>Bio-Techne</td><td>3700-100-01</td><td></td></tr><tr><td>Kit de ensayo de citotoxicidad CyQUANT LDH</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>C20300</td><td></td></tr><tr><td>DAPI (4&prime;,6-diamidino-2-fenilindol)</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>D1306</td><td></td></tr><tr><td>Dimetilsulfóxido</td><td>Sigma Aldrich</td><td>D2650-100ML</td><td></td></tr><tr><td>Dulbecco' s modificado Eagle' s medium (DMEM)</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>11965092</td><td></td></tr><tr><td>Microscopio EVOS XL Core</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>AMEX1200</td><td></td></tr><tr><td>Suero fetal bovino (FBS)</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>A5209501</td><td></td></tr><tr><td>Software de análisis de imágenes en Fiyi</td><td>Institutos Nacionales de Salud</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Sistema de tensión y tejido Flexcell FX-6000 (incluye controlador de tensión Flexlink FX-6000, depósito de presión, placa base, ventana de acrílico, estaciones de carga cilíndricas de 25 mm de diámetro, sifón de agua, software FlexSoft FX-6000 V1.0 y varios tubos)</td><td>Flexcell International</td><td>FX6000T</td><td></td></tr><tr><td>Interleucina-6 Duoset Humano ELISA</td><td>Bio-Techne</td><td>DY206</td><td></td></tr><tr><td>Interleucina-8 Duoset Humano ELISA</td><td>Bio-Techne</td><td>DY208</td><td></td></tr><tr><td>Microscopio confocal Leica DMi8</td><td>Leica Microsystems</td><td>11889122</td><td></td></tr><tr><td>Matriz de membrana basal Matrigel</td><td>Corning</td><td>356237</td><td></td></tr><tr><td>Células MRC-5</td><td>ATCC</td><td>CCL-185</td><td></td></tr><tr><td>Parafilm</td><td>Millipore Sigma</td><td>P7793</td><td></td></tr><tr><td>Penicilina/estreptomicina (Pen/PTREP)</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>15140122</td><td></td></tr><tr><td>Sondas de marcaje de faloidinas, Alexa Fluor 488</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>A12379</td><td></td></tr><tr><td>Solución salina tamponada con fosfato (PBS)</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>14190-144</td><td></td></tr><tr><td>Colágeno de cola de rata I</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>C3867</td><td></td></tr><tr><td>Proteína recombinante de lactato humano deshidrogenasa (activa)</td><td>Abcam</td><td>Ab93699</td><td></td></tr><tr><td>Búfer de lisis RIPA</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>89901</td><td></td></tr><tr><td>Tubos microfugados sin RNasa</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>AM12400</td><td></td></tr><tr><td>Matraz de cultivo T75 cm2</td><td>Greiner</td><td>658175</td><td></td></tr><tr><td>Triton X-100</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>X100-5ML</td><td></td></tr><tr><td>Anticuerpo monoclonal ZO-1 (ZO1-1A12), Alexa Fluor 594</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>339194</td><td></td></tr></tbody></table>

generación de organoides alveolares a549/mrc-5 embebidos en colágeno 3d utilizando un biorreactor mecánico de estiramiento celular

Generation of 3D Collagen-Embedded A549/MRC-5 Alveolar Organoids using a Mechanical Cell-Stretching Bioreactor

Generación de organoides alveolares A549/MRC-5 embebidos en colágeno 3D utilizando un biorreactor mecánico de estiramiento celular

Although breathing dynamics and mechanical strain play critical roles in alveolar biology, their contributions to the pathogenesis of respiratory diseases ...

generation-3d-collagen-embedded-a549mrc-5-alveolar-organoids-using

Research

Investigación

JoVE Journal

Bioengineering

Bioingeniería

Se describe un método para la preparación de una matriz de tres dimensiones que consiste en colágeno tipo I y fibroblastos primarios humanos. Este gel organotípicos sirve como un sustrato útil para evaluar la migración de células invasivas debido a que imita las características básicas del estroma y se presta a muchas formas de microscopía.

El colágeno organotípicos I del ensayo: Una plataforma maleable para evaluar el comportamiento celular en un contexto de 3 dimensiones

Se desarrolló un novedoso protocolo de imagen utilizando un actuador mecánico accionado por motor personalizado para permitir la medición de las respuestas en tiempo real a la tensión mecánica en células vivas. Relevante para la mecanobiología, el sistema puede aplicar deformaciones de hasta el 20% al tiempo que permite obtener imágenes casi en tiempo real con microscopía confocal o de fuerza atómica.

Imágenes de células vivas durante el estiramiento mecánico

En este trabajo, presentamos una técnica para la fabricación rápida de tejidos vasculares vivos mediante el cultivo directo de colágeno, células musculares lisas y células endoteliales. Además, se describe un nuevo protocolo para la caracterización mecánica de tejidos vasculares artificiales.

Ingeniería 3D Cellularized colágeno Geles para Vascular Regeneración Tisular

El artículo describe la diferenciación dirigida paso a paso de células madre pluripotentes inducidas a organoides pulmonares enteros tridimensionales que contienen células pulmonares epiteliales proximales y distales junto con mesénquima.

Generación de organoides pulmonares enteros en 3D a partir de células madre pluripotentes inducidas para modelar la biología y la enfermedad del desarrollo pulmonar

Este protocolo presenta un método para el cultivo y crecimiento 3D de células similares a ameloblastos en microgravedad para mantener su forma alargada y polarizada, así como la expresión de proteínas específicas del esmalte. También se describen las condiciones de cultivo para el cultivo de construcciones de ingeniería periodontal y órganos pulmonares en microgravedad.

Propagación de células y órganos dentales y respiratorios en microgravedad

El protocolo describe un biorreactor habilitado para imágenes que permite la eliminación selectiva del epitelio endógeno de la tráquea de la rata y la distribución homogénea de las células exógenas en la superficie de la luz, seguido de un cultivo in vitro a largo plazo de la construcción célula-tejido.

Biorreactor guiado por imágenes para generar tejido biodiseñado de las vías respiratorias

El protocolo presenta un método para derivar organoides pulmonares humanos a partir de tejidos pulmonares primarios, expandir los organoides pulmonares e inducir la diferenciación proximal para generar organoides de las vías respiratorias 3D y 2D que fenopicon fielmente el epitelio de las vías respiratorias humanas.

Establecimiento de organoides pulmonares humanos y diferenciación proximal para generar organoides maduros de las vías respiratorias

El presente protocolo describe las capacidades y las modalidades esenciales de cultivo del Open-Top Organ-Chip para el establecimiento exitoso y la maduración de cultivos de órgano en chip de espesor completo de tejidos primarios (piel, alvéolo, vías respiratorias e intestino), brindando la oportunidad de investigar diferentes aspectos funcionales de la interfaz epitelial/mesenquimal y nicho vascular humana in vitro.

Reconstitución de la citoarquitectura y la función de los tejidos epiteliales humanos en un chip de órgano abierto

Aquí, demostramos un modelo de organoide de tres pasos (expansión bidimensional [2D], estimulación 2D, maduración tridimensional [3D]) que ofrece una herramienta prometedora para la investigación fundamental de tendones y un posible método sin andamios para la ingeniería de tejidos tendinosos.

Demostración de cultivo de láminas celulares autoensambladas y generación manual de un organoide similar a un tendón/ligamento en 3D mediante el uso de fibroblastos dérmicos humanos

Este estudio presenta una metodología rentable y eficiente para generar estructuras celulares en 3D utilizando un sistema basado en sellos para crear micropocillos en moldes de agarosa. El sistema promueve la formación de esferoides/organoides uniformes, mejorando así las interacciones celulares. Este enfoque reduce la variabilidad experimental y apoya las aplicaciones en pruebas de fármacos e ingeniería de tejidos.

Generación de esferoides/organoides tridimensionales a partir de cultivos celulares bidimensionales utilizando un novedoso dispositivo de estampado

Este protocolo describe un método definido basado en hidrogel para generar organoides mamarios humanos que recapitulan características clave de la morfogénesis mamaria en un sistema de cultivo tridimensional controlado.

Un método definido basado en hidrogel para generar organoides mamarios humanos tridimensionales que recapitulan la morfogénesis mamaria

University of British Columbia - Okanagan.  Este protocolo describe la generación de organoides a partir de células epiteliales alveolares A549 y fibroblastos pulmonares MRC-5 sobre un andamiaje de hidrogel de matriz extracelular, seguida de la inserción en geles de colágeno 3D y la exposición a la tensión mecánica mediante un biorreactor de estiramiento celular para investigar la mecanobiología alveolar.

Generación de organoides alveolares A549/MRC-5 embebidos en colágeno 3D utilizando un biorreactor mecánico de estiramiento celular

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