Name: Investigación del microambiente ovárico: métodos para aislamiento, cultivo 2D y cultivo organoide de células somáticas ováricas de ratón (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2026-07-03T13:45:00.000+00:00
Duration: 9 min 4 s
Description: Aprenda a aislar y cultivar organoides somáticos ováricos sin andamio de ratón. Este modelo preserva la diversidad celular y la organización tisular nativa para estudiar la fisiología y patología ovárica.

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<ol><li>Thomas, F. H., Vanderhyden, B. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Oocyte-granulosa+cell+interactions+during+mouse+follicular+development%3A+regulation+of+kit+ligand+expression+and+its+role+in+oocyte+growth%5BTitle%5D)+AND+%22Reprod+Biol+Endocrinol%22%5BJournal%5D)">Oocyte-granulosa cell interactions during mouse follicular development: regulation of kit ligand expression and its role in oocyte growth.</a> Reprod Biol Endocrinol. 4 (1), 19(2006).</li>
<li>Robker, R. L., Hennebold, J. D., Russell, D. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Coordination+of+ovulation+and+oocyte+maturation%3A+a+good+egg+at+the+right+time%5BTitle%5D)+AND+%22Endocrinology%22%5BJournal%5D)">Coordination of ovulation and oocyte maturation: a good egg at the right time.</a> Endocrinology. 159 (9), 3209-3218 (2018).</li>
<li>Casey, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sex+hormones+and+health%5BTitle%5D)+AND+%22Nurs+N+Z%22%5BJournal%5D)">Sex hormones and health.</a> Nurs N Z. 23 (1), 24-28 (2017).</li>
<li>Kinnear, H. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+ovarian+stroma+as+a+new+frontier%5BTitle%5D)+AND+%22Reproduction%22%5BJournal%5D)">The ovarian stroma as a new frontier.</a> Reproduction. 160 (3), R25-R39 (2020).</li>
<li>Simon, L. E., Kumar, T. R., Duncan, F. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vitro+ovarian+follicle+growth%3A+a+comprehensive+analysis+of+key+protocol+variables%5BTitle%5D)+AND+%22Biol+Reprod%22%5BJournal%5D)">In vitro ovarian follicle growth: a comprehensive analysis of key protocol variables.</a> Biol Reprod. 103 (3), 455-470 (2020).</li>
<li>Spector, I., Derech-Haim, S., Boustanai, I., Safrai, M., Meirow, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Anti-M%C3%BCllerian+hormone+signaling+in+the+ovary+involves+stromal+fibroblasts%3A+a+study+in+humans+and+mice+provides+novel+insights+into+the+role+of+ovarian+stroma%5BTitle%5D)+AND+%22Hum+Reprod%22%5BJournal%5D)">Anti-Müllerian hormone signaling in the ovary involves stromal fibroblasts: a study in humans and mice provides novel insights into the role of ovarian stroma.</a> Hum Reprod. 39 (11), 2551-2564 (2024).</li>
<li>Kedem, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Activated+ovarian+endothelial+cells+promote+early+follicular+development+and+survival%5BTitle%5D)+AND+%22J+Ovarian+Res%22%5BJournal%5D)">Activated ovarian endothelial cells promote early follicular development and survival.</a> J Ovarian Res. 10 (1), 64(2017).</li>
<li>Converse, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Multinucleated+giant+cells+are+hallmarks+of+ovarian+aging+with+unique+immune+and+degradation-associated+molecular+signatures%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+Biol%22%5BJournal%5D)">Multinucleated giant cells are hallmarks of ovarian aging with unique immune and degradation-associated molecular signatures.</a> PLoS Biol. 23 (6), e3003204(2025).</li>
<li>Bafor, E. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Isolation+of+single+cells+from+individual+mouse+ovaries+for+flow+cytometry+and+functional+analysis%5BTitle%5D)+AND+%22STAR+Protoc%22%5BJournal%5D)">Isolation of single cells from individual mouse ovaries for flow cytometry and functional analysis.</a> STAR Protoc. 4 (4), 102710(2023).</li>
<li>Shepherd, T. G., Thériault, B. L., Campbell, E. J., Nachtigal, M. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Primary+culture+of+ovarian+surface+epithelial+cells+and+ascites-derived+ovarian+cancer+cells+from+patients%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Protoc%22%5BJournal%5D)">Primary culture of ovarian surface epithelial cells and ascites-derived ovarian cancer cells from patients.</a> Nat Protoc. 1 (6), 2643-2649 (2006).</li>
<li>Beschta, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+rapid+and+robust+method+for+the+cryopreservation+of+human+granulosa+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Histochem+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">A rapid and robust method for the cryopreservation of human granulosa cells.</a> Histochem Cell Biol. 156 (5), 509-517 (2021).</li>
<li>Tingen, C. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+macrophage+and+theca+cell-enriched+stromal+cell+population+influences+growth+and+survival+of+immature+murine+follicles+in+vitro%5BTitle%5D)+AND+%22Reproduction%22%5BJournal%5D)">A macrophage and theca cell-enriched stromal cell population influences growth and survival of immature murine follicles in vitro.</a> Reproduction. 141 (6), 809-820 (2011).</li>
<li>O'Mara, A. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chronic+mirabegron+treatment+increases+human+brown+fat%2C+HDL+cholesterol%2C+and+insulin+sensitivity%5BTitle%5D)+AND+%22J+Clin+Invest%22%5BJournal%5D)">Chronic mirabegron treatment increases human brown fat, HDL cholesterol, and insulin sensitivity.</a> J Clin Invest. 130 (5), 2209-2219 (2020).</li>
<li>Zink, N., Stock, A. -K., Vahid, A., Beste, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((On+the+neurophysiological+mechanisms+underlying+the+adaptability+to+varying+cognitive+control+demands%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Hum+Neurosci%22%5BJournal%5D)">On the neurophysiological mechanisms underlying the adaptability to varying cognitive control demands.</a> Front Hum Neurosci. 12, 411(2018).</li>
<li>Zhao, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Organoids%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Methods+Primers%22%5BJournal%5D)">Organoids.</a> Nat Rev Methods Primers. 2 (1), 94(2022).</li>
<li>Yang, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Organoids%3A+the+current+status+and+biomedical+applications%5BTitle%5D)+AND+%22MedComm%22%5BJournal%5D)">Organoids: the current status and biomedical applications.</a> MedComm. 4 (3), e274(2023).</li>
<li>Alzamil, L., Nikolakopoulou, K., Turco, M. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Organoid+systems+to+study+the+human+female+reproductive+tract+and+pregnancy%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Death+Differ%22%5BJournal%5D)">Organoid systems to study the human female reproductive tract and pregnancy.</a> Cell Death Differ. 28 (1), 35-51 (2021).</li>
<li>Pierson Smela, M. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Directed+differentiation+of+human+iPSCs+to+functional+ovarian+granulosa-like+cells+via+transcription+factor+overexpression%5BTitle%5D)+AND+%22eLife%22%5BJournal%5D)">Directed differentiation of human iPSCs to functional ovarian granulosa-like cells via transcription factor overexpression.</a> eLife. 12, e83291(2023).</li>
<li>Dipali, S. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Self-organizing+ovarian+somatic+organoids+preserve+cellular+heterogeneity+and+reveal+cellular+contributions+to+ovarian+aging%5BTitle%5D)+AND+%22Aging+Cell%22%5BJournal%5D)">Self-organizing ovarian somatic organoids preserve cellular heterogeneity and reveal cellular contributions to ovarian aging.</a> Aging Cell. 25 (1), e70333(2026).</li>
<li>Di Nisio, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Silk-ovarioids%3A+establishment+and+characterization+of+a+human+ovarian+primary+cell+3D-model+system%5BTitle%5D)+AND+%22Hum+Reprod+Open%22%5BJournal%5D)">Silk-ovarioids: establishment and characterization of a human ovarian primary cell 3D-model system.</a> Hum Reprod Open. 2025 (3), hoaf042(2025).</li>
<li>Nikanfar, S., Leonel, E. C. R., Damdimopoulou, P., Flaws, J. A., Amorim, C. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+phthalate+exposure+on+human+ovarian+extracellular+matrix+composition%3A+insights+from+a+3D+spheroid+model%5BTitle%5D)+AND+%22Environ+Res%22%5BJournal%5D)">Effects of phthalate exposure on human ovarian extracellular matrix composition: insights from a 3D spheroid model.</a> Environ Res. 279, 121797(2025).</li>
<li>Briley, S. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Reproductive+age-associated+fibrosis+in+the+stroma+of+the+mammalian+ovary%5BTitle%5D)+AND+%22Reproduction%22%5BJournal%5D)">Reproductive age-associated fibrosis in the stroma of the mammalian ovary.</a> Reproduction. 152 (3), 245-260 (2016).</li>
<li>Converse, A., Zaniker, E. J., Amargant, F., Duncan, F. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Recapitulating+folliculogenesis+and+oogenesis+outside+the+body%3A+encapsulated+in+vitro+follicle+growth%5BTitle%5D)+AND+%22Biol+Reprod%22%5BJournal%5D)">Recapitulating folliculogenesis and oogenesis outside the body: encapsulated in vitro follicle growth.</a> Biol Reprod. 108 (1), 5-22 (2023).</li>
<li>Dean, M., Jin, V., Russo, A., Lantvit, D. D., Burdette, J. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Exposure+of+the+extracellular+matrix+and+colonization+of+the+ovary+in+metastasis+of+fallopian-tube-derived+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22Carcinogenesis%22%5BJournal%5D)">Exposure of the extracellular matrix and colonization of the ovary in metastasis of fallopian-tube-derived cancer.</a> Carcinogenesis. 40 (1), 41-51 (2019).</li>
<li>Charalambous, C., Webster, A., Schuh, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Aneuploidy+in+mammalian+oocytes+and+the+impact+of+maternal+ageing%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Mol+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">Aneuploidy in mammalian oocytes and the impact of maternal ageing.</a> Nat Rev Mol Cell Biol. 24 (1), 27-44 (2023).</li>
<li>Rowley, J. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Low+molecular+weight+hyaluronan+induces+an+inflammatory+response+in+ovarian+stromal+cells+and+impairs+gamete+development+in+vitro%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Mol+Sci%22%5BJournal%5D)">Low molecular weight hyaluronan induces an inflammatory response in ovarian stromal cells and impairs gamete development in vitro.</a> Int J Mol Sci. 21 (3), 1036(2020).</li>
<li>Amargant, F., Vieira, C., Pritchard, M. T., Duncan, F. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Systemic+low-dose+anti-fibrotic+treatment+attenuates+ovarian+aging+in+the+mouse%5BTitle%5D)+AND+%22Geroscience%22%5BJournal%5D)">Systemic low-dose anti-fibrotic treatment attenuates ovarian aging in the mouse.</a> Geroscience. 47 (3), 3475-3495 (2024).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>0.2 &mu;m, Polyethersulfone syringe filter</td><td>Corning</td><td>431229</td><td></td></tr><tr><td>1.5 mL microcentrifuge tubes</td><td>MIDSCI</td><td>PR-MCT15</td><td></td></tr><tr><td>100 mL glass beaker</td><td>Fisherbrand</td><td>FB100100</td><td></td></tr><tr><td>100 mm Petri dishes</td><td>Corning</td><td>351029</td><td></td></tr><tr><td>15 mL conical tubes</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>339651&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>24-well plates (TC-treated)</td><td>Corning</td><td>353047</td><td></td></tr><tr><td>28-gauge insulin needles</td><td>Exel International</td><td>26027</td><td></td></tr><tr><td>35 mm Petri dishes</td><td>Corning</td><td>351008</td><td></td></tr><tr><td>3&beta;-HSD antibody</td><td>Cosmo Bio</td><td>K0607</td><td>1:1000</td></tr><tr><td>4% Paraformaldehyde</td><td>Electron Microscopy Sciences</td><td>1574100</td><td></td></tr><tr><td>40 &micro;m cell strainer</td><td>Corning</td><td>431750</td><td></td></tr><tr><td>45 mm watch glass</td><td>Electron Microscopy Sciences</td><td>7054345</td><td></td></tr><tr><td>50 mL concial tubes</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>339652&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>60 mL sterile syringe</td><td>Air-Tite</td><td>ML60</td><td></td></tr><tr><td>60 mm TC-treated plates</td><td>Corning</td><td>353037</td><td></td></tr><tr><td>6-well plates (TC-treated)</td><td>Corning</td><td>353046</td><td></td></tr><tr><td>Agarose</td><td>Hoefer</td><td>GR140-500</td><td>Gel strength >1200 g/cm2; Gel Temperature 36 &deg;C</td></tr><tr><td>Autoclave sterilization pouch</td><td>Fisherbrand</td><td>01-812-55</td><td></td></tr><tr><td>Biotinylated Goat Anti-Mouse IgG</td><td>Vector Laboratories</td><td>BA-9200-1.5</td><td>1:200</td></tr><tr><td>Biotinylated Goat Anti-Rabbit IgG</td><td>Vector Laboratories</td><td>PK-6101</td><td>1:200</td></tr><tr><td>Biotinylated Goat Anti-Rat IgG</td><td>Vector Laboratories</td><td>BA-9400-1.5</td><td>1:100</td></tr><tr><td>Bluing reagent</td><td>Fisherbrand</td><td>23-245681</td><td></td></tr><tr><td>Centrifuge with swing bucket rotor for 50 mL conical tubes</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>Sorvall X1R Pro-MD</td><td></td></tr><tr><td>Class II biosafety cabinet</td><td>The Baker Company</td><td>SG403A</td><td></td></tr><tr><td>Cleaved Caspase-3 (CC3) antibody</td><td>Cell Signaling Technology</td><td>9579T</td><td>1:250</td></tr><tr><td>CO2 incubator</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>Heracell VIOS 160i CO2 Incubator</td><td></td></tr><tr><td>Collagenase, Type IV, powder</td><td>Gibco, Fisher Scientific</td><td>17-104-019</td><td></td></tr><tr><td>C-Series Mouse Cytokine Antibody Array 3 Kit</td><td>RayBiotech</td><td>AAM-CYT-3-8</td><td></td></tr><tr><td>Cytoseal XYL</td><td>Epredia</td><td>83124</td><td></td></tr><tr><td>Deoxyribonuclease I from bovine pancreas</td><td>Millipore Sigma</td><td>DN25-100MG</td><td>Dnase I</td></tr><tr><td>Dissecting microscissors</td><td>World Precision Instruments</td><td>WPI-14003</td><td></td></tr><tr><td>Dissecting scissors</td><td>World Precision Instruments</td><td>WPI-15922</td><td></td></tr><tr><td>Dissection microscope</td><td>Leica</td><td>MZ9.5, S9 series</td><td></td></tr><tr><td>DPBS, no calcium, no magnesium</td><td>Gibco, Fisher Scientific</td><td>14-190-250</td><td>pH 7.0&ndash;7.3</td></tr><tr><td>Eosin</td><td>Fisherbrand</td><td>23-314631</td><td></td></tr><tr><td>F4/80 antibody</td><td>Bio-Rad</td><td>MCA497G</td><td>1:50</td></tr><tr><td>Fetal Bovine Serum, certified, heat inactivated, United States</td><td>Gibco, ThermoFisher Scientific</td><td>10082147</td><td></td></tr><tr><td>Fine-tipped dissecting forceps</td><td>World Precision Instruments</td><td>WPI-14098</td><td></td></tr><tr><td>FOXL2 antibody</td><td>Abcam</td><td>ab246511</td><td>1:200</td></tr><tr><td>Graefe Forceps</td><td>Fine Science Tools</td><td>1105010</td><td></td></tr><tr><td>Hematoxylin</td><td>EK Industries</td><td>EKI 47971GL</td><td></td></tr><tr><td>Hemocytometer</td><td>MedOne</td><td>DHCN015</td><td></td></tr><tr><td>Imaging System</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>EVOS FL Auto</td><td></td></tr><tr><td>IntestiCult Organoid Growth Medium (Mouse)</td><td>STEMCELL Technologies</td><td>06005</td><td>Basal medium, Supplements 1 and 2</td></tr><tr><td>Laminar flow hood</td><td>IVFtech</td><td>IVFtech sterile workstation</td><td></td></tr><tr><td>Leibovitz's L-15 Medium</td><td>Gibco, Fisher Scientific</td><td>11415114</td><td></td></tr><tr><td>Microscope slides</td><td>Mercedes Scientific</td><td>MER 7255/90/WH/CC</td><td></td></tr><tr><td>MicroTissues 3D Petri Dish micro-mold spheroids</td><td>Millipore Sigma</td><td>Z764043-6EA</td><td>Silicone casts for agarose micromolds</td></tr><tr><td>Modified Davidson's Fixative</td><td>Electron Microscopy Sciences</td><td>6413350</td><td></td></tr><tr><td>OVCAR8-RFP cells</td><td></td><td></td><td>Gift from Joanna Burdette PhD, University of Illinois Chicago</td></tr><tr><td>Penicillin-Streptomycin</td><td>Millipore Sigma</td><td>P4333-100ML</td><td></td></tr><tr><td>Picrosirius Red staining solution</td><td>StatLab</td><td>STPSRPT</td><td></td></tr><tr><td>RPMI 1640 Medium (ATCC modification)</td><td>Gibco, Fisher Scientific</td><td>A1049101</td><td></td></tr><tr><td>Tabletop centrifuge</td><td>Eppendorf</td><td>Centrifuge 5430 R&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>Trypan blue</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>T10282</td><td></td></tr><tr><td>Trypsin-EDTA (0.05%), phenol red</td><td>Gibco, ThermoFisher Scientific</td><td>25300054</td><td></td></tr><tr><td>Vimentin antibody</td><td>Cell Signaling Technology</td><td>5741S</td><td>1:100</td></tr><tr><td>&alpha;MEM, GlutaMAX Supplement, no nucleosides</td><td>Gibco, Fisher Scientific</td><td>32561102</td><td></td></tr></tbody></table>

investigación del microambiente ovárico: métodos para aislamiento, cultivo 2d y cultivo organoide de células somáticas ováricas de ratón

Probing the Ovarian Microenvironment: Methods for Isolation, 2D Culture, and Organoid Culture of Mouse Ovarian Somatic Cells

Investigación del microambiente ovárico: métodos para aislamiento, cultivo 2D y cultivo organoide de células somáticas ováricas de ratón

The ovary consists of heterogeneous populations of somatic cells, both within the follicle and the surrounding stroma, which are critical to support ...

probing-ovarian-microenvironment-methods-for-isolation-2d-culture

Research

Investigación

JoVE Journal

Developmental Biology

Biología del Desarrollo

Cultivo de células normales en sus tres dimensiones contexto representa un método alternativo para estudiar los primeros eventos necesarios para la transformación celular y tumorigénesis. Este método se utiliza para producir los ovarios normales y las células del oviducto para estudiar los eventos tempranos en la formación de cáncer de ovario.

Los hidrogeles de alginato para la cultura del órgano en tres dimensiones de los ovarios y oviductos

Este video describe el protocolo para crear un modelo experimental murino para estudiar el desarrollo tumoral y la metástasis peritoneal. Este modelo de cáncer de ovario se genera mediante la inoculación ortotópica de células epiteliales de cáncer de ovario humano en los ovarios de una ratón.

Inoculación ortotópica de células de cáncer de ovario en ovarios murinos: un procedimiento para establecer un modelo de ratón de cáncer de ovario para estudiar la diseminación peritoneal de las células

Este protocolo describe el cultivo primario / co-cultivo de tejido ovárico ratón, utilizando los ovarios de ratones recién nacidos y los folículos ováricos individuales de ratones prepúberes. Las técnicas de cultivo de apoyar el desarrollo de una manera altamente fisiológica, lo que permite la investigación del efecto de los agentes extrínsecos en el ovario, y de las interacciones entre los folículos ováricos.

Cultura y Co-cultura de ratón ovarios y los folículos ováricos

Aquí, presentamos un protocolo para construir un modelo tridimensional in vitro del revestimiento de la cavidad peritoneal, compuesto por células mesoteliales humanas primarias y fibroblastos estratificados con matriz extracelular, como herramienta para investigar la adhesión, invasión y proliferación de las células de cáncer de ovario.

Modelado de los primeros pasos de cáncer de ovario Difusión en una cultura organotípicos del Peritoneal Cavity Humano

Aquí, presentamos un protocolo para cuantificar los folículos en los ovarios cultivados de ratones jóvenes sin seccionamiento serial. Con inmunofluorescencia de todo órgano y tejido claro, seccionar físico se sustituye por seccionamiento óptico. Este método de preparación de la muestra y visualización mantiene la integridad de órganos y facilita la cuantificación automática de células específicas.

Todo Monte inmunofluorescencia y cuantificación del folículo de los ovarios de ratón cultivadas

Cultivos de tejido ováricos se puede utilizar como modelos de la atresia de desarrollo, la ovulación y el folículo folículo e indicar mecanismos reguladores de procesos dinámicos de ovarianos.

Cultivo de tejido ovárico para visualizar fenómenos en ovario de ratón

Este protocolo ofrece un marco sistemático para el establecimiento de organoides de cáncer de ovario de diferentes estadios de la enfermedad y aborda los desafíos de la variabilidad específica del paciente para aumentar el rendimiento y permitir una expansión robusta a largo plazo para aplicaciones posteriores. Incluye pasos detallados para el procesamiento de tejidos, la siembra, el ajuste de los requisitos de medios y la tinción de inmunofluorescencia.

Estrategia para el biobanco de organoides de cáncer de ovario: abordaje de la heterogeneidad entre pacientes en los subtipos histológicos y los estadios de la enfermedad

Este protocolo describe el establecimiento de organoides tisulares tridimensionales (3D) a partir de células primarias del epitelio de superficie ovárica humana (hOSE). El protocolo incluye el aislamiento de hOSE a partir de ovarios recién recolectados, la expansión celular de la hOSE, los procedimientos de criopreservación-descongelación y la derivación de organoides. Se incluyen la inmunofluorescencia, el análisis cuantitativo y la demostración de su utilidad como plataforma de cribado.

Organoides del epitelio de la superficie del ovario humano como plataforma para estudiar la regeneración de tejidos

Este protocolo detalla el desarrollo de modelos de ratón de carcinoma de ovario seroso de alto grado (HGSOC) in vitro e in vivo. A partir de la derivación de organoides de trompas de Falopio murinos, su modificación genética para recapitular la genética HGSOC humana y su introducción en la bolsa ovárica de ratones singénicos para el desarrollo in vivo de tumores.

Desarrollo de líneas de organoides derivados de ratones a partir de células epiteliales de trompas de Falopio para el modelado de carcinoma de ovario seroso de alto grado

Describimos métodos para cultivar folículos ováricos en un novedoso molde de agarosa sin andamios que complementan la gametogénesis in vitro .

Producción y uso de moldes de agarosa personalizables para cultivo de folículos ováricos de ratón sin andamios

Aprenda a aislar y cultivar organoides somáticos ováricos sin andamio de ratón. Este modelo preserva la diversidad celular y la organización tisular nativa para estudiar la fisiología y patología ovárica.

Investigación del microambiente ovárico: métodos para aislamiento, cultivo 2D y cultivo organoide de células somáticas ováricas de ratón (Video) | JoVE Journal

Investigación del microambiente ovárico: métodos para aislamiento, cultivo 2D y cultivo organoide de células somáticas ováricas de ratón

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