Le intraluminale de l'artère cérébrale occlusion (MCAO) est le modèle le plus fréquemment utilisé chez les modèles expérimentaux ischémiques AVC. Ici, nous allons démontrer tout le modèle en détail avec le guide de Laser Doppler, et ses résultats représentatifs.
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Article de méthode
Intraluminale Occlusion Artère cérébrale moyenne (MCAO) Modèle pour l'AVC ischémique avec guidage laser Doppler chez la souris
* These authors contributed equally
Dans cet article
Résumé
Résumé
L'AVC est la troisième cause de décès et la première cause de handicap dans le monde, avec un coût estimé à près de 70 milliards de dollars aux États-Unis en 2009 1,2. Le intraluminale de l'artère cérébrale occlusion (MCAO) modèle a été développé par Koizumi 4 en 1986 pour simuler cette percutante pathologie humaine chez le rat. Une modification de la méthode MCAO a ensuite été présenté par Longa 3. Les deux techniques ont été largement utilisées pour identifier les mécanismes moléculaires de lésions cérébrales résultant d'un accident ischémique cérébral et modalités thérapeutiques potentielles 5. Cette méthode relativement non invasive chez le rat a été étendu pour utiliser la souris pour tirer parti des souches transgéniques et knock-out 6,7. Pour modéliser une ischémie cérébrale focale, une suture intraluminale est avancé par l'artère carotide interne pour occlure la base de la MCA. Retrait de la suture après une période de temps spécifiée imite reperfusion spontanée, mais la suture peutégalement être maintenue en permanence. Cette vidéo sera de démontrer les deux grandes approches pour effectuer la procédure intraluminale MCAO chez la souris de façon progressive, ainsi que de fournir un aperçu des inconvénients potentiels et les pièges. Le tissu cérébral ischémique seront ensuite colorées par le chlorure de 2,3,5-triphényltétrazolium (CTT) pour évaluer l'étendue de l'infarctus cérébral 8.
Protocole
Ce protocole a été approuvé par le soin des animaux et du Comité institutionnel d'utilisation (IACUC) à l'Université de Floride et est en conformité avec le «principe de protection des animaux de laboratoire" (NIH publication n ° 86-23, révisée en 1985).
1. Matériels
- Animaux: Homme souris C57BL / 6 (Harlan Laboratories, Indianapolis, IN, USA) pesant 20-26 grammes au moment de la chirurgie.
- Anesthésie:
- Appareil d'anesthésie: l'anesthésie par inhalation système VetEquip (VetEquip Inc, Pleasanton, CA, USA).
- Anesthésique par inhalation: L'isoflurane (Baxter Pharmacie, Deerfield, IL).
- ....
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Discussion
Le modèle MCAO est un modèle établi qui reproduit l'ischémie cérébrale chez les espèces murines. Ce modèle a été utilisé pour la première chez les rats et par la suite adaptée à la souris. Éviter craniectomie pour éliminer l'influence de la manipulation chirurgicale sur la perméabilité barrière hémato-encéphalique et la pression intracrânienne est un avantage de cette technique. Cependant, de nombreuses variables, comme la souche des différences liées à la taille 10, la suture pointe 11, la.......
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Déclarations de divulgation
Les auteurs déclarent n'avoir aucun conflit d'intérêts.
Matériaux
| Nom | Entreprise | Numéro de catalogue | Commentaires | |
|---|---|---|---|---|
| Nom du réactif | Type | Entreprise | Numéro de catalogue | Commentaires (optionnel) |
| Des souris mâles C57BL / 6 | Animal | Harlan Laboratories, Indianapolis, IN, USA | 20-26 grs | |
| Microscope à dissection | Microscope | Microscope stéréo Leica MZ6 | Zoom 6.3:1 | |
| Fibre optique d'éclairage | Illuminateur | Techniquip Corp, Livermore, Californie, USA | FO1-150 | |
| L'isoflurane | Anesthésie | Pharmacie Baxter, Deerfield, IL | 1001936060 | |
| SuperCut ciseaux Iris, droit | Outil chirurgical | Mondiale Precision Instruments, Inc, Sarasota, Floride, USA | 14218 | |
| Vannas micro-ciseaux, droit | Outil chirurgical | Mondiale Precision Instruments, Inc, Sarasota, Floride, USA | 14003 | |
| Dumont pointe fine pince | Outil chirurgical | Mondiale Precision Instruments, Inc, Sarasota, Floride, USA | 503290 | |
| Clip navire | Outil chirurgical | Mondiale Precision Instruments, Inc, Sarasota, Floride, USA | 14120 | |
| Dessiccateur à haute fréquence 900 | Outil chirurgical | Mondiale Precision Instruments, Inc, Sarasota, Floride, USA | 500397 | |
| 7-0 suture chirurgicale monofilament en nylon | Suturer | Ethicon, Inc, Somerville, New Jersey, USA | 1647G | Suture d'occlusion |
| 7-0 suture de soie chirurgicale | Suturer | Ethicon, Inc, Somerville, New Jersey, États-UnisA | 7733G | Pour la ligature de suture |
| Adhésif silicone RTV | Le caoutchouc de silicone | Mondiale Precision Instruments, Inc, Sarasota, Floride, USA | 1571 | |
| Vetbond | Adhésif tissulaire | 3M Company, St Paul, MN, USA | 70200746587 | |
| Pommade Vétérinaire Puralube | Pommade ophtalmique | Pharmaderm, Melville, NY, USA | ||
| La buprénorphine hydrochlorode | Analgésiques | Hospira Inc, Lake Forest, IL, USA | NDC 0409-2012-32 | |
| Unité cautérisation thermique | Mondiale Precision Instruments, Inc, Sarasota, Floride, USA | 501292 | ||
| PeriFlux System 5000 | TCD débitmétrie | Perimed, Stockholm, Suede | ||
| BAT-12 | Thermomètre rectal | Mondiale Precision Instruments, Inc, Sarasota, Floride, USA | BAT-12R | |
| T / PUMP, TP600 | Couverture thermique | Gaymar, NY, USA | ||
| 2,3,5-triphényltétrazolium | Réactif | Sigma-Aldrich, St Louis, MO, USA | T8877 | |
| Souris cerveau matrice trancheuse | Cerveau trancheuse | Zivic-Miller Lab., Inc, Allison Park, Pennsylvanie, Etats-Unis | BSMAS001-1 |
Références
- Recommendations on stroke prevention, diagnosis, and therapy. Report of the WHO Task Force on Stroke and other Cerebrovascular Disorders. Stroke; a journal of cerebral circulation. 20, 1407-1431 (1989).
- Lloyd-Jones, D.
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Réimpressions et autorisations
