PRÉPARATION D’UN VACCIN ADJUVANT À BASE DE NANOÉMULSION

Résumé

Source : Zhang, Z. et al., Évaluation de la préparation, des caractéristiques, de la toxicité et de l’efficacité du vaccin antitumoral à nanoémulsion auto-assemblé par voie nasale in vitro et in vivo.J. Vis. Exp. (2022)

Cette vidéo démontre la production de vaccins antitumoraux à base de nanoémulsion. Les dépôts de réservoirs de pétrole stables transportant des peptides synthétiques et des adjuvants sont produits par nanoémulsion à faible énergie, offrant un potentiel significatif pour l’immunothérapie tumorale.

Protocole

1. Préparation de l’I-OVA NE

1. Mélangez 1 mg de lipide monophosphoryle A (MPLA) avec 100 μL de diméthylsulfoxyde (DMSO), agitez pendant 5 min, et laissez-le reposer pendant 4 h à température ambiante (RT) pour se dissoudre complètement.
2. Ajouter quantitativement Tween 80 et IKVAV-OVA_257-264 (I-OVA) et mélanger.
   note: Le Tween 80 et l’I-OVA ont été mélangés à un rapport de masse de 25:1.
3. Ajouter le squalène dans le mélange préparé à l’étape 1.2 (7:3, Smix : squalène).
4. Ajouter 100 μL de solution de MPLA (10 mg/mL) au mélange préparé à l’étape 1.3.
5. Préparez le vaccin à nanoémulsion en utilisant des méthodes d’émulsification à faible énergie : ajoutez la solution mélangée à des gouttelettes d’eau à environ 70 % du volume total et remuez doucement pour obtenir un mélange transparent et facile à écouler.
   note: Le témoin BNE (émulsion à blanc) a été préparé par la même méthode, en remplaçant l’eau par de l’I-OVA.

Matériaux

Liste des matériaux utilisés dans cet article

Nom	Entreprise	Numéro de catalogue	Commentaires
MPLA	Invivogen Lit. Co.	TLRL-MPLA
OVA257 à 264	Botai Biotechnology Co., Ltd.	Na
Conjugaison peptidique synthétique (I-OVA) d’IKVAV-PA	Botai Biotechnology Co., Ltd.	Na