Des modèles de souris expérimentales de l'asthme allergique offrent de nouvelles possibilités pour l'étude de la pathogenèse des maladies et le développement de nouvelles thérapies. Ces modèles sont bien adaptés à des facteurs de mesure relatives à la réponse immunitaire allergique, inflammation des voies respiratoires, et de la physiopathologie pulmonaire.
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Article de méthode
Modèle murin de l'asthme induit par les allergènes
Dans cet article
Résumé
Résumé
L'asthme est une cause majeure de morbidité et de mortalité, affectant quelque 300 millions de personnes à travers le monde. 1 Plus de 8% de la population américaine souffre d'asthme, de la prévalence croissante. 2 Comme avec d'autres maladies, les modèles animaux de la maladie allergique des voies respiratoires facilitent grandement compréhension de la pathophysiologie sous-jacente, aider à identifier des cibles thérapeutiques potentielles, et de permettre des essais précliniques de possibles nouvelles thérapies. Modèles de la maladie allergique des voies respiratoires ont été développés dans plusieurs espèces animales, mais les modèles murins sont particulièrement attractive en raison du faible coût, disponibilité, et bien caractérisés système immunitaire de ces animaux. 3 Disponibilité d'une variété de souches transgéniques augmente encore l'attrait de ces modèles. 4 Ici, nous décrivons deux modèles murins de la maladie allergique des voies respiratoires, à la fois l'ovalbumine employant comme antigène. Après une sensibilisation initiale par injection intrapéritonéale, un modèle LivrERS le défi de l'antigène par nébulisation, l'autre par la livraison intra-trachéale. Ces deux modèles offrent des avantages complémentaires, les uns avec les imitant les principales caractéristiques de l'asthme humain. 5
Les principales caractéristiques de l'asthme aigu comprennent une réponse exagérée des voies aériennes à des stimuli tels que la méthacholine (hyperréactivité bronchique; AHR) et inflammation des voies respiratoires éosinophiles riches. Ce sont également des effets importants de provocation allergénique dans nos modèles murins, 5,6 et nous décrire les techniques permettant de mesurer les et donc d'évaluer les effets de la manipulation expérimentale. Plus précisément, nous décrivons les deux 8 invasives 7 et non-invasif des techniques de mesure de l'hyperréactivité bronchique ainsi que des méthodes pour évaluer l'infiltration de cellules inflammatoires dans les voies respiratoires et du poumon. Cellules inflammatoires des voies aériennes sont recueillies par lavage broncho-alvéolaire du poumon tandis que l'histopathologie est utilisée pour évaluer les marqueurs de l'inflammation dans l'organe. Cestechniques fournissent des outils puissants pour étudier l'asthme d'une façon qui ne serait pas possible chez les humains.
Protocole
La sensibilisation aux allergènes et I. Défi (voir Figure 1)
A. Pour Défi intratrachéale
- Pour la sensibilisation initiale, injecter mâle ou femelle C57BL / 6 ou BALB / c (6-8 semaines) par voie intrapéritonéale au jour 0 et à nouveau au jour 7 avec 20 pg d'ovalbumine (OVA; Sigma-Aldrich, St. Louis, MO) émulsionné dans 0,2 ml de phosphate stérile (PBS) contenant 2 mg d'hydroxyde d'aluminium (Sigma-Aldrich) ou avec 2 mg d'hydroxyde d'aluminium dans 0,2 ml de PBS stérile comme témoin.
- Défi avec un antigène, le cas échéant (par exemple, aux jours 14, 16, 18 et 20). Procédure de récusation....
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Discussion
Les modèles animaux de la maladie allergique des voies respiratoires fournissent des outils importants pour les études pertinentes à l'asthme clinique. Un certain nombre de modèles différents, qui emploient diverses espèces et les antigènes, ont été développés. La souris, une espèce de laboratoire attrayants et fréquemment utilisée, offre également un certain nombre d'avantages pour les modèles de la maladie allergique des voies respiratoires. 9,10 Bien que ces modèles ne reproduisent pas l'asthme.......
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Déclarations de divulgation
Des expériences sur des animaux ont été effectuées en conformité avec les directives et les règlements énoncés par le Comité Atlanta VAMC IACUC sous protocole # V010-10.
Remerciements
Ce travail a été soutenu par des subventions du NIH HL093196 (RCR) et de la recherche Atlanta et de l'éducation de la Fondation (AREF).
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Matériaux
| Nom | Entreprise | Numéro de catalogue | Commentaires |
|---|---|---|---|
| Nom du produit | Entreprise | Numéro de catalogue | Commentaires |
| Ovalbumin | Sigma-Aldrich St. Louis, MO | A5503 | |
| L'hydroxyde d'aluminium | Sigma-Aldrich | 239186 | |
| Acétyl-β-méthylcholine chlorure de | Sigma-Aldrich | A2251 | |
| Sel de sodium pentobarbital | Sigma-Aldrich | P3761 | |
| Pléthysmographie corps entier (WBP) système de | Buxco recherche sur les systèmes Wilmington, NC | http://www.buxco.com | |
| FlexiVent | SCIREQ, Inc Montréal, Canada | http://www.scireq.com | |
| Microscope optique | Leica Microsystems, Inc Buffalo Grove, IL | ||
| Cytospin 4 | Thermo Scientific Asheville, Caroline du Nord | ||
| Diff-Quick tache | Siemens Newark, DE | B4132-1A | |
| Pipette à répétition | Tridak Torrington, CT | STP4001-0025 |
Références
- Braman, S. S. The global burden of asthma. Chest. 130, 4S-12S (2006).
- Akinbami, L. J., Mooman, J. E., Liu, X. Asthma Prevalence, Health Care Use, and Mortality: 2005-2009. National Health Statistics Reports. 32, National Center for Health Statistics. Hyattsville, MD. 2005-2009 (2011).
- Bates, J. H., Rincon, M., Irvin, C. G.
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Réimpressions et autorisations
