Dans la pathogénie des métastases osseuses, l'angiogenèse est un processus crucial et représente donc une cible pour l'imagerie et la thérapie. Ici, nous présentons un modèle de rat spécifique au site des métastases osseuses du cancer du sein et de décrire les stratégies à l'angiogenèse image non-invasive In vivo En utilisant l'imagerie par résonance magnétique, tomodensitométrie volumique et de l'échographie.
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Article de méthode
Multi-modale d'imagerie de l'angiogenèse dans un modèle de rat nu des métastases osseuses du cancer du sein par imagerie par résonance magnétique, la tomodensitométrie et volumétrique ultrasons
Dans cet article
Résumé
Résumé
L'angiogenèse est une caractéristique essentielle de la croissance du cancer et de la formation de métastases. Dans la métastase osseuse, les facteurs angiogéniques sont pivotement pour la prolifération de cellules tumorales dans la cavité de moelle osseuse ainsi que pour l'interaction de cellules tumorales et de l'os aboutissant à la destruction locale d'os. Notre objectif était de développer un modèle de métastases osseuses expérimental qui permet une évaluation in vivo de l'angiogenèse dans les lésions du squelette en utilisant des techniques d'imagerie non invasives.
À cette fin, nous avons injecté 10 5 MDA-MB-231 cellules humaines de cancer du sein dans l'artère superficielle épigastrique, qui empêche la croissance des métastases dans les zones du corps autres que la jambe arrière respective 1. Après 25-30 jours après l'inoculation des cellules tumorales, les métastases osseuses spécifiques au site de développer, limitée à la partie distale du fémur, du tibia péroné proximale et proximale 1. Aspects morphologiques et fonctionnelles de l'angiogenèse peuvent être étudiés longitudinalement dans les méta osseusestases utilisant imagerie par résonance magnétique (IRM), tomodensitométrie volumique (VCT) et l'échographie (US).
IRM affiche des informations morphologiques de la part des tissus mous des métastases osseuses qui est initialement confiné à la cavité de moelle osseuse et dépasse ensuite l'os cortical, tout en progressant. Utilisation de contraste dynamique de l'IRM (DCE-MRI) fonctionnels données, y compris le volume sanguin régional, de perfusion et la perméabilité des vaisseaux peuvent être obtenus et quantifiés 2-4. La destruction osseuse est capturé en haute résolution en utilisant l'imagerie morphologique CDV. En complément de l'IRM, les lésions ostéolytiques peut être situé à proximité des sites de croissance de la tumeur intramédullaire. Après l'application agent de contraste, le CDV angiographie révèle l'architecture macrovessel dans les métastases osseuses en haute résolution, et DCE-VCT permet un aperçu de la microcirculation de ces lésions 5,6. Etats-Unis est applicable pour évaluer les caractéristiques morphologiques et fonctionnelles à partir de lésions du squelette due àostéolyse locale de l'os cortical. Utilisation en mode B et Doppler, la structure et la perfusion des métastases des tissus mous peuvent être évalués, respectivement. DCE-US permet imagerie en temps réel de la vascularisation dans les métastases osseuses après l'injection de microbulles 7.
En conclusion, dans un modèle de site spécifique osseuse du cancer du sein métastases techniques d'imagerie multi-modales, y compris l'IRM, le CDV et de l'information aux États-Unis offre complémentaire sur la morphologie et les paramètres fonctionnels de l'angiogenèse dans ces lésions squelettiques.
Protocole
1. Culture cellulaire
- Culture MDA-MB-231 cellules humaines de cancer du sein (American Type Culture Collection) dans du RPMI-1640 (Invitrogen, Allemagne) supplémenté avec 10% de FCS (Sigma, Allemagne). Gardez toutes les cultures dans des conditions normales (37 ° C, une atmosphère humidifiée, 5% de CO 2) et le passage des cellules 2-3 fois par semaine pour les maintenir en croissance logarithmique. Pour le modèle animal décrit ci-dessous, il n'est pas nécessaire pour l'utilisation de l'os-spécifiques sous-lignées de cellules MDA-MB-231 cellules que le taux de participation tumeur est plus de 90% 1.
- Récolte sous-c....
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Discussion
Le procédé d'induction osseuse expérimentale métastases présenté ici en combinaison avec les techniques d'imagerie permettent d'assurer le suivi des lésions ostéolytiques chez les rats nus longitudinalement. Dans notre modèle, MDA-MB-231 cellules humaines de cancer du sein sont injectés dans la mer qui est une anastomose entre l'artère iliaque via le tronc pudendoepigastric et l'artère fémorale. Par conséquent, le flux sanguin dans la région fourni de l'articulation du genou est maintenu après la.......
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Déclarations de divulgation
Pas de conflits d'intérêt déclarés.
Remerciements
Ce travail a été soutenu par la Deutsche Forschungsgemeinschaft (SFB-TR 23 et TR-79 SFB, la tuberculose et le DK). Les auteurs tiennent à remercier Renate Bangert, Karin Leotta et Lisa Seyler pour l'assistance technique excellente.
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Matériaux
| Nom | Entreprise | Numéro de catalogue | Commentaires |
|---|---|---|---|
| Nom du réactif | Entreprise | Numéro de catalogue | |
| MDA-MB-231 cellules humaines de cancer du sein | American Type Culture Collection (ATCC) | HTB-26 | |
| RPMI-1640 | Invitrogen | 61870 | |
| FCS | Invitrogen | 10270 | |
| Trypsine-EDTA | Invitrogen | 25300 | |
| Carprofène Rimadyl | Pfizer | PZN 110208 | |
| Magnevist | Bayer-Schering | PZN 6961516 | |
| Imeron 400 MCT | Bracco | PZN 228654 | |
| SonoVue | Bracco | PZN 1567358 | |
| Papavérine | Alfa Aesar | L 04152 | |
| Isofluran | Baxter | HDG 9623 | |
| Symphonie (imagerie par résonance magnétique) | Siemens | ||
| Volume CT (tomographie volumétrique) | Siemens | ||
| Acuson Sequioa 512 (ultrasons) | Siemens-Acuson |
Références
- Bäuerle, T. Characterization of a rat model with site-specific bone metastasis induced by MDA-MB-231 breast cancer cells and its application to the effects of an antibody against bone sialoprotein. Int. J. Cancer. 115, 177-186 (2005).
- Merz, M., Komljenovic, D., Zwick, S., Semmler, W., Bäuerle, T.
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Réimpressions et autorisations
