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Article de méthode

Test de stress cardiaque induite par la dobutamine et surveillé par cathétérisme cardiaque chez la souris

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DOI :

10.3791/50050

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10 février 2013

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Dans cet article

Résumé

Nous décrivons le protocole pour effectuer un test de stress cardiaque induite par la dobutamine et surveillés par cathétérisme cardiaque chez les souris normales. En outre, nous montrons son application à démasquer la maladie cardiaque infraclinique en haute teneur en graisses régime alimentaire induits par les souris obèses.

Résumé

La dobutamine est un agoniste β-adrénergique avec une plus grande affinité pour le récepteur exprimé dans le cœur (β 1) que pour les récepteurs exprimés dans les artères (β 2). Lorsque administré par voie systémique, il augmente la demande cardiaque. Ainsi, la dobutamine démasque rythme anormal ou zones ischémiques potentiellement le risque d'infarctus.

Surveillance de la fonction cardiaque pendant un test d'effort cardiaque peut être effectuée par l'une ou ecocardiography cathétérisme cardiaque. Cette dernière est une technique invasive mais plus précis et informatif que le premier.

Test de stress cardiaque induite par la dobutamine et surveillés par cathétérisme cardiaque réalisé comme décrit ici permet, en une seule expérience, la mesure des paramètres hémodynamiques suivants: fréquence cardiaque (FC), la pression systolique, la pression diastolique, la pression télédiastolique, maximale pression positive développement (dP / dt max) et maximale négatifs dans la presseure développement (dP / dt min), à des conditions de base et sous des doses croissantes de dobutamine.

Comme on s'y attendait, chez des souris normales, nous avons observé une dobutamine liée à la dose augmentation de la FC, dP / dt max et dP / dt min. En outre, à la plus forte dose testée (12 ng / g / min), la décompensation cardiaque de haute teneur en graisses régime alimentaire induits par les souris obèses a été démasqué.

Protocole

Protocole a été approuvé par le comité d'éthique de Facultad de Medicina Clinica Alemana Desarrollo-Universidad del.

I. Préparation de la perfusion de dobutamine

  1. Dissolvez 10 mg de dobutamine dans 20 ml d'eau distillée stérile, afin d'obtenir une solution stock de 500 pg / ml dobutamine. Aliquoter et conserver à -20 ° C. Cette solution peut être utilisée au moins pendant 3 mois.
  2. Décongeler une aliquote de la solution mère dobutamine à la température ambiante.
  3. Diluer la solution mère stérile dobutamine dans NaCl à 0,9%, afin d'obtenir la dobutamine solution de travail, dont la concentration es....

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Résultats

Le signal de pression artérielle est définie par la pression systolique et la pression diastolique. Lorsque le capteur de pression est à l'intérieur du ventricule gauche, la pression (LVP) de forme d'onde est caractérisée par une chute à zéro de la pression diastolique et l'apparition de la contraction de l'oreillette gauche, avant la contraction du ventricule (Figure 1). A l'état initial, la kétamine-xylazine anesthésiés souris normales ont HR de 280 ± 24, P max de 107 ± .......

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Discussion

Test de stress cardiaque induite par la dobutamine et surveillés par cathétérisme cardiaque est laborieuse. Néanmoins, en suivant le protocole décrit ici et avec un peu de temps de formation, il est possible d'évaluer six paramètres hémodynamiques en une seule expérience qui durent environ une heure.

Les étapes critiques du protocole présenté ici sont les canules des vaisseaux sanguins. En ce qui concerne la canulation de l'artère carotide, l'incision effectuée doit être assez pr.......

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Déclarations de divulgation

Aucun conflit d'intérêt déclaré.

Remerciements

Nous remercions le Dr. Helio Salgado, Renata Lataro et Mauro de Oliveira, Faculté de Médecine de Ribeirão Preto, Université de Sao Paulo et le Dr Ben Janssen, Cardiovascular Research Institute Maastricht, Maastricht University, pour son aide généreuse au cours du processus de configuration.

Ce travail a été soutenu par FONDECYT subvention N ° 11090114 de la DDC

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Matériaux

Liste des matériaux utilisés dans cet article
NomEntrepriseNuméro de catalogueCommentaires
Réactifs
PE-50/10 Warner Instruments 64-0752
Fil de soie 6/0 HR17 Tagum SN0713K
Xylacin 20 mg / ml Centrovet Laboratorio
Kétamine 100 mg / ml Drag Pharma
Chlorure de sodium à 0,9% Lab SA Sanderson
Chlorhydrate de dobutamine Sigma-Aldrich D0676
Seringue à insuline U-100 29G x ½ " Terumo Medical Co.
Pince à dissection Micro Style cm 11,5 7 LawtonMedizintechnik 09-0959
Graefe Forceps MCV 0,7 mm 7cm Lawton Medizintechnik 62-0263
Colliers de Dieffenbach bulldog Cl Str 38 mm Lawton Medizintechnik 60-010
Ciseaux Vannas 8 Str cm Fh Lawton Medizintechnik 63-1400
Équipement
SPR-671 cathéter Mikro-Tip pression Millar instruments 840-6719
PCU-2000 Unité de contrôle de pression Millar instruments 880-0129
PowerLab 4/30 ADInstruments Pty Ltd ML866
LabChartPro 7 ADInstruments Pty Ltd MLU260 / 7
Legato200 Pompe à perfusion KdScientific KD-KDS210P
Régulateur de température TCAT-2LV et plaque chauffante isotherme Physitemp instruments Inc
Fourniture d'oxygène médical Indura
Sonde rectale ADInstruments Pty Ltd MLT1404
Microscope trinoculaire, éclairage axial LW Scientific Z2B-TRI-ETNE, ILP-1502-LTS1, ILP-1502-DGGF

Références

  1. Hart, C. Y., Burnett, J. C., Redfield, M. M. Effects of avertin versus xylazine-ketamine anesthesia on cardiac function in normal mice. Am. J. Physiol. Heart Circ. Physiol. 281, H1938-H1945 (2001).
  2. Janssen, B. J., et al.

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Réimpressions et autorisations

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