Occlusion 2 Navire / Hypotension: un modèle de rat d'ischémie cérébrale globale

Résumé

Occlusion carotidienne bilatérale associée à une hypotension systémique produit ischémie globale du cerveau chez le rat, causant des dommages à l'hippocampe avec sévérité reproductible. sujets animaux sont altérées avec des modèles prévisibles de lésions cérébrales, ils récupèrent opportunément, et les taux de mortalité sont relativement faibles.

Résumé

L'arrêt cardiaque suivi d'une réanimation se traduit souvent par des dommages au cerveau dramatique causée par l'ischémie et la reperfusion subséquente du cerveau. Ischémie globale du cerveau produit des dommages à des régions spécifiques du cerveau révélés être très sensible à l'ischémie ^1. Neurones de l'hippocampe ont une plus grande sensibilité aux agressions ischémiques par rapport à d'autres populations de cellules, et en particulier, la région CA1 de l'hippocampe est particulièrement vulnérable à l'ischémie / reperfusion ^2.

La conception des interventions thérapeutiques, ou l'étude des mécanismes impliqués dans la lésion cérébrale, nécessite un modèle qui produit des dommages semblables à l'état clinique et de façon reproductible. Occlusion du vaisseau carotide bilatérale avec hypotension (2VOH) est un modèle qui produit une ischémie du cerveau antérieur réversible, imitant les événements cérébraux qui peuvent survenir lors de l'arrestation et de réanimation cardiaque. Nous décrivons un modèle modifié de Smith et al. (1984) ², En tant que premier présenté sous sa forme actuelle en ³ Sanderson et al. (2008), qui produit des blessures reproductible sélectivement les régions du cerveau vulnérables ^3-6. La fiabilité de ce modèle est dicté par un contrôle précis de la pression artérielle systémique pendant hypotension appliquée, la durée de l'ischémie, un contrôle étroit de la température, un régime d'anesthésie spécifique, et diligent soins post-opératoires. Un accident ischémique 8 minutes produit la mort cellulaire des neurones CA1 hippocampique qui progresse au cours de 6 à 24 heures de reperfusion, tandis que les régions du cerveau les moins vulnérables sont épargnés. Cette mort cellulaire progressive est facilement quantifiable après 7-14 jours de reperfusion, comme une perte presque complète des neurones CA1 est évident en ce moment.

En plus de ce modèle de lésion cérébrale, nous présentons une méthode de quantification des dommages CA1 l'aide d'un simple, mais complète, de la méthodologie. Surtout, la quantification peut être réalisée à l'aide d'un simple microscope caméra montée, unda gratuit ImageJ (NIH) plugin, éliminant ainsi la nécessité pour les logiciels stéréologie coûts prohibitifs et une scène microscopique motorisé pour l'évaluation des dommages.

Introduction

Les lésions cérébrales à la suite d'une arrestation et d'AVC cardiaque est une cause majeure de décès et d'invalidité à long terme. Alors que la réanimation cardiorespiratoire pour les victimes d'un arrêt cardiaque réussit à rétablir la circulation spontanée dans environ 70.000 patients par an aux Etats-Unis ^7,8 au moins 60% de ces patients décèdent par la suite à l'hôpital à la suite d'importants dommages au cerveau et seulement 3-10% des patients réanimés peuvent reprendre leurs anciens modes de vie ^9,10. De toute évidence, la compréhension des mécanismes qui conduisent à des lésions cérébrales suite à une ischémie glob....

Protocole

1. Préparation

Tous les expérimentations animales doivent être conformes aux directives institutionnelles et obtenir une approbation par un comité respectif de protection des animaux avant l'initiation. Toutes les procédures présentées ici ont été approuvés par la Wayne State University Institutional Animal Care et utiliser Comité et suivre les lignes directrices sur le traitement éthique des animaux mis en avant dans le Guide pour le soin et l'utilisation des animaux de laboratoire et les Principes du Gouvernement des États-Unis pour le l'utilisation et l'entretien des animaux vertébrés utilisés dans les essais, de recherch....

Résultats

Le modèle 2VOH d'ischémie / reperfusion cérébrale globale provoque la mort des neurones dans la région CA1 de l'hippocampe. Figure 2 représente la blessure produite par 8 min d'ischémie globale du cerveau, traitement 14 jours après la reperfusion. Figures 2A et 2B comparer les hippocampes d'imposture et cerveaux post-ischémiques, colorées avec du violet de crésyl. Figure 2a montre un hippocampe d'un rat opération fictive qui présente.......

Discussion

Le modèle décrit ici produit un accident ischémique dans le cerveau qui peuvent survenir à la suite de l'arrestation et de réanimation cardiaque, fournissant une blessure similaire à celle trouvée chez l'homme. Ce procédé de fabrication ischémie globale du cerveau est l'un des protocoles multiples. Nous utilisons ce protocole avant tout pour son taux relativement bas de mortalité, une récupération rapide et des résultats reproductibles. Le modèle d'arrêt / réanimation cardiaque est sans doute le modèle l.......

Matériaux

Liste des matériaux utilisés dans cet article

Nom	Entreprise	Numéro de catalogue	Commentaires
Nom du matériau
5-0 Suture VICRYL, coupe inversée	Ethicon	J391H
Scalpel, No.10	Swann-Morton	6601
Éponges de gaze	Fisher	22-362-178
18G x 1 ½ ; en aiguille	BD	305201
23G x 1 en aiguille	BD	305145
26 G x 3/8 po aiguille	BD	305110
18 G x 1 ¼ ; cathéter	EXEL	26735
1 ml seringue	BD	309659
seringue de 60 ml	BD	309653
Surgilube	Henry Schein	1152666,9
solution saline, plastique IV sac	Henry Schein	1537468
Suture 3-0 Soie	Henry Schein	1007842
Puralube Pommade Ophtalmique	Henry Schein	3390017
Bétadine	Henry Schein	6903564
Serviette Stérile	Drape Moore Medical	14170
Tube en polyéthylène, 50	Intramedic	427411
Robinet d’arrêt, 3 voies	Smiths medical	MX9311L
Nom du médicament
AERRANE (isoflurane)	Henry Schein	2091966
Mapap Liquid (Tylenol)	Major Pharmaceuticals	1556
Kedavet (kétamine)	Ketathesia Butney	NDC 50989-996-06
Butorphic (butorphanol)	Lloyd Labs	4881
Heparin	APP Pharmaceuticals	504011
Nom chimique
Paraformaldehyde prills	Elecron Microscopy Sci.	19202
2-méthylbutane	Sigma	270342
Cresyl Violet Acétate	Sigma	C5042
Sucrose	Sigma	S9378
Software
ImageJ	NIH

10 ml 309604  %