Une méthode simple d'intubation poumon de souris

Summary

Le présent document décrit une méthode striaghforward et efficace de l'intubation des souris pour les mesures de la fonction pulmonaire ou l'instillation pulmonaire, qui permet aux souris de récupérer et être étudié à temps postérieurs. La procédure implique une source de lumière à fibre optique peu coûteux qui éclaire directement la trachée.

Abstract

Une procédure simple pour intuber souris pour les mesures de la fonction pulmonaire aurait plusieurs avantages dans les études longitudinales avec un nombre limité d'animaux ou coûteux. Une des raisons pour lesquelles cela n'est pas fait de façon plus routinière, c'est qu'il est relativement difficile, malgré l'existence de plusieurs études publiées qui décrivent les moyens pour y parvenir. Dans cet article, nous démontrons une procédure qui élimine l'un des obstacles majeurs associés à ce intubation, qui permet de visualiser la trachée pendant toute la durée de l'intubation. La méthode utilise une source de lumière à fibre optique 0,5 mm qui sert d'introduction pour diriger la canule d'intubation dans la trachée de souris. Nous montrons qu'il est possible d'utiliser cette procédure pour mesurer la mécanique du poumon chez les souris individuelles sur un parcours de temps d'au moins plusieurs semaines. La technique peut être mis en place avec relativement peu de frais et d'expertise, et il peut être systématiquement réalisé avec relativement peu de formation. Cela devrait make il possible pour tout laboratoire réalise ce intubation, ce qui permet des études longitudinales chez des souris individuelles, ce qui réduit le nombre de souris nécessaires et en augmentant la puissance statistique en utilisant chaque souris comme son propre témoin.

Introduction

En 1999, Brown et al. Publié un article décrivant une méthode pour l'intubation du poumon ¹ souris. Une telle technique a une utilité considérable en faisant fonction de répétition ou lavage broncho-alvéolaire pulmonaire chez la souris individuelles dans les études longitudinales ^2. Depuis que le papier d'origine, il ya eu plusieurs autres documents qui ont décrit les différentes approches à ^3-9 intubation souris. Bien que toutes ces méthodes peuvent être utilisées avec succès, ils exigent habituellement une formation considérable ou de coût. Un des principaux problèmes avec intubation par exemple, c'est que l'....

Protocol

1. Préparation de la procédure

Il faut d'abord obtenir et préparer les éléments suivants:

1. La canule. Pour l'intubation des souris g 20-35, nous utilisons un pouce 1 ou 1,5 de long, calibre 20 IV cathéter (BD Insylte, Sparks, MD ou Jelco Optiva, Carlsbad, CA). Un nouveau cathéter stérile peut être utilisé pour chaque souris, mais cathéters peut également être réutilisé après stérilisation par immersion dans de l'éthanol 70% pendant une nuit. Bien que ni le pharynx, ni trachée de la souris est stériles procédures propreté appropriées, y compris l'utilisation de gants stériles et des instruments, d....

Results

Comme une évaluation de la méthode, nous avons utilisé quatre mâles âgés de 20 semaines BALB / c avec un poids moyen (± ET) de 27,7 ± 0,40 g. Ils ont été étudiés sur cinq semaines consécutives, où la résistance pulmonaire a été mesurée en utilisant un système tel que décrit précédemment ^11. Chaque souris a été anesthésiée avec de la kétamine (100 mg / g de poids) et de xylazine (15 mg / g de poids) dans une solution saline par injection IP. Ils ont ensuite été intubé comme décrit ci-dessus. S'il n'y a aucun d.......

Discussion

La procédure décrite ici présente plusieurs avantages. D'abord l'appareil est simple et relativement peu coûteux .. La fabrication de l'appareil ne nécessite pas d'outils spéciaux ou de l'équipement coûteux. L'utilisation d'un cathéter introduit qui est également la source de lumière signifie que l'on ne perd jamais de vue l'ouverture de la trachée comme l'introducteur s'approche de l'ouverture trachéale. L'utilisation d'un dispositif d'introduction 0,5 mm perm.......

Materials

List of materials used in this article

Name	Company	Catalog Number	Comments
Matériel	Entreprise	Catalogue	Commenter
Canule d'intubation	BD Insylte, Sparks, MD ou Jelco Optiva, Carlsbad, CA		1-po de longueur, de calibre 20 par voie intraveineuse (IV) du cathéter
Câble à fibres optiques	Edmund Optics, Barrington, NJ	# NT02-542	Environ 2 pi longueur de 0,5 mm de fibre optique (fibre plastique communication grade). Le bord de l'extrémité de la fibre qui est inséré dans la trachée doit être légèrement arrondi en maintenant la fibre ≈ 2 cm de l'extrémité, puis faisant de petits cercles tout en faisant glisser la pointe pendant quelques secondes sur 1000 emory papier abrasif.
Source de lumière	Volpi	NCL-150	Bien que nous utilisions une source de 150 W lampe halogène, une source de lumière équivalente, même avec une puissance beaucoup plus faiblepeuvent être utilisées.
Bouchon en caoutchouc de silicone			Un bouchon de caoutchouc de silicone n ° 1 correspond à la source de lumière utilisée dans cette démonstration. Différentes sources de lumière peuvent exiger une taille différente.
Petit tube en caoutchouc silicone	Cole-Palmer	EW-96410-13	Un morceau ≈ 1,5 cm de tube en caoutchouc de silicone (0,8 diamètre intérieur de 4 mm de diamètre extérieur)
Montant de support incliné			La nôtre est constucted en plexiglas, mais toute matière à laquelle un fil ou câble peut être fixé à tenir la souris à un angle presque vertical peut être utilisé.