Nous introduisons une méthode chirurgicale pour induire expérimental d'ischémie / reperfusion (I / R) des blessures pour simuler un infarctus du myocarde (IM) dans les modèles de souris qui permet une plus grande clarté dans le positionnement de la ligature sur l'artère interventriculaire antérieure gauche (LAD) d'augmenter la reproductibilité d'expériences MI chez la souris.
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Article de méthode
Un modèle murin d'ischémie myocardique-reperfusion par ligature de l'artère interventriculaire antérieure
Dans cet article
Résumé
Résumé
Infarctus du myocarde aigu ou chronique (MI) sont des événements cardiovasculaires résultant de taux élevés de morbidité et de mortalité. Établir les mécanismes pathologiques à l'œuvre lors MI et le développement d'approches thérapeutiques efficaces exige une méthodologie reproductible pour simuler l'incidence clinique et refléter les modifications physiopathologiques associés à MI. Ici, nous décrivons un procédé chirurgical pour induire MI dans des modèles de souris qui peut être utilisée pour court terme d'ischémie-reperfusion (I / R) des blessures ainsi que la ligature permanente. L'avantage majeur de cette méthode est de faciliter la localisation de l'artère descendante antérieure gauche (LAD) pour permettre la ligation précise de cette artère pour induire une ischémie dans le ventricule gauche du cœur de souris. Le positionnement précis de la ligature sur la DAL augmente la reproductibilité de la taille de l'infarctus et produit des résultats plus fiables ainsi. Une plus grande précision dans le placement de la ligature d'améliorer les approches chirurgicales standard pour simuler MI chez la souris, tmari de réduire le nombre d'animaux de laboratoire nécessaires pour les études statistiquement pertinentes et d'améliorer notre compréhension des mécanismes produisant une dysfonction cardiaque après un infarctus. Ce modèle murin d'infarctus du myocarde est également utile pour le test préclinique de traitements ciblant la lésion myocardique après un IM.
Introduction
Des modèles animaux de l'infarctus du myocarde (MI) sont importants dans la recherche de la physiopathologie complexe de maladie cardiaque ischémique 1. Ischémie-reperfusion (I / R) des blessures est un contributeur majeur de la lésion myocardique généré pendant MI. La blessure de l'ischémie initiale produite par occlusion de la circulation coronaire peut être réduite chez les patients MI par l'utilisation de l'angioplastie pour restaurer la perfusion en temps opportun. Bien que cette intervention a considérablement réduit le nombre de décès dus aux infarctus aigu du myocarde, la restauration du flux sanguin dans les résultats de la zone is....
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Protocole
Ce protocole a été approuvé par l'animal et est en conformité avec les directives et les règlements énoncés par le soin et l'utilisation des animaux Commission institutionnelle (IACUC) à l'Ohio State University. Toutes les politiques élaborées par le IACUC locale sont en conformité avec le Guide de l'expérimentation animale développé par le Bureau de la protection des animaux de laboratoire à l'Institut National de la Santé.
1. Anesthésie et l'intubation endotrachéale
- Autoclave tous les instruments et les fournitures chirurgicales avant utilisation. Porter des gants chirurgicaux stériles, à usage unique ....
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Résultats
Après 24 heures de reperfusion, l'analyse de la taille de l'infarctus et la zone à risque (AAR), par phthalo colorant bleu et chlorure de triphényl tétrazolium (TTC), la ligature de l'artère interventriculaire antérieure peut être confirmée par l'observation de blanchiment d'distale de tissu myocardique à la suture ainsi que le dysfonctionnement de la paroi antérieure. Reperfusion peut être vérifiée par le retour de la couleur rouge pour le tissu myocardique et la démonstration d'une certaine rep.......
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Discussion
Modèles d'ischémie-reperfusion du myocarde de souris sont une méthode efficace pour la recherche cardiovasculaire de simuler une maladie cardiaque aiguë ou chronique clinique 13,14. Des efforts importants ont été utilisée pour développer et affiner les approches chirurgicales qui produisent les événements ischémiques et des lésions de reperfusion dans les coeurs de plusieurs types d'animaux différents. Bien qu'il existe des avantages particuliers à l'utilisation de différents systèmes d'an.......
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Déclarations de divulgation
Dr Noah Weisleder est un fondateur et directeur scientifique de TRIM-édecine, Inc.
Remerciements
Recherche présentée dans cette publication a été soutenue par l'Institut national de l'arthrite et de l'appareil locomoteur et de Skin Diseases, une partie des Instituts nationaux de la santé, en vertu Prix Nombre R01-AR063084. Le contenu est exclusivement la responsabilité de leurs auteurs et ne représentent pas nécessairement les vues officielles des National Institutes of Health.
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Matériaux
| Nom | Entreprise | Numéro de catalogue | Commentaires |
|---|---|---|---|
| PhysioSuite avec RightTemp Réchauffement Homéothermique | Kent Scientific Corp | PS-RT | |
| Source lumineuse | Zeiss | KL 1500 Souris LCD | |
| Heart Slicer Matrix | Zivic Miller | HSMS001-1 | |
| Micro Tray - Base, Couvercle, & Tapis (6,0 x 10 x 0,75) | Outils scientifiques fins | 6100A | |
| Chlorure de 2,3,5-triphényltétrazolium | Sigma Aldrich | T8877 | |
| Buprénorphine (Buprenex injectable) | Reckitt Benkiser Healthcare | NDC 12496-0757-1 | |
| bupivacaïne | Hospira | NDC 0409-1163-01 | |
| Isoflurane | Abbott | NDC 5260-04-05 | |
| Bétadine Soultion ; | Purdue Pharma | 25655-41-8 | |
| Troponine cardiaque de souris T(cTnT) ELISA | Kamiya Biomedical Company | KT-58997 | |
| Ciseaux fins | Outils scientifiques fins | 14040-10 | |
| Dumont #5 Forceps | Outils scientifiques fins | 11251-30 | |
| Dumont #3 Pinces | Outils scientifiques fins | 11231-30 | |
| Castroviejo Micro Porte-aiguilles | Fine Science Tools | 12060-01 | |
| Porte-aiguille allongé mince | Outils de science fine | 12005-15 | |
| Porte-aiguille à poignée ronde | Outils de science fine | 12075-12 | |
| Stéréoscope trinoculaire Omano | Microscope.com | OM99-V6 | |
| SB2 Support de perche avec bras universel | Microscope.com | V6 | |
| , 0,5 mm, 1/16 po Y | Kent Scientific Corp | RSP05T16 | |
| Systèmes d’anesthésie pour rongeurs et petits animaux | VetEquip, Inc | 901807 | |
| 4-0 suture conique en soie | Sharpoint&trade ; Produits | DC-2515N | |
| 6-0 soie cône suture | Sharpoint&trade ; Produits | DC-2150N |
Références
- Abarbanell, A. M., et al. Animal models of myocardial and vascular injury. J Surg Res. 162, 239-249 (2010).
- Gao, E., et al. A novel and efficient model of coronary artery ligation and myocardial infarction in the mouse. Circ Res. 107,....
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Réimpressions et autorisations
