L'utilisation de la chromatographie en phase gazeuse pour l'analyse compositionnelle modifications des acides gras dans les tissus de foie de rat pendant la grossesse

Résumé

Grossesse conduit à d'importants changements à la composition en acides gras des tissus maternels. profils lipidiques peuvent être obtenus par chromatographie en phase gazeuse pour permettre l'identification et la quantification des acides gras dans les classes de lipides individuels entre les rats nourris avec des régimes différents de graisse haute et basse pendant la grossesse.

Résumé

chromatographie en phase gazeuse (GC) est une méthode très sensible utilisée pour identifier et quantifier la teneur en acides gras des lipides des tissus, de cellules et de plasma / sérum, donnant des résultats avec une grande précision et une reproductibilité élevée. Dans les études métaboliques et nutrition GC permet l'évaluation des changements dans les concentrations d'acides gras suivants interventions ou lors des changements de l'état physiologique comme la grossesse. Extraction en phase solide (SPE) à l'aide aminopropyliques cartouches de silice permet la séparation des principales classes de lipides, y compris les triglycérides, différents phospholipides et esters de cholestérol (CE). GC combinés avec SPE a été utilisé pour analyser les variations de la composition en acides gras de la fraction CE dans le foie des rats gravides vierges et qui avaient été nourris avec des régimes différents de haute et basse en matières grasses. Il ya des effets d'interaction alimentation / grossesse importantes sur la teneur en acides gras oméga-3 et oméga-6 gras de foie CE, indiquant que les femmes enceintes ont une réponse différente à manipula alimentaireion de s'observe chez les femelles vierges.

Introduction

chromatographie en phase gazeuse (GC) est une technique bien établie utilisée pour identifier et quantifier l'incorporation des acides gras dans les piscines de lipides et les membranes cellulaires ^1,2 dans des conditions de supplémentation ou physiologiques tels que l'obésité (et maladies apparentées telles que le diabète) ou la grossesse ^{3 - 5.} Il est également adapté pour analyser les types et les quantités de matières grasses dans les aliments. Ceci est utile lors de la caractérisation des régimes expérimentaux, ainsi que veiller à ce que l'industrie alimentaire conforme à la réglementation. Par exemple, GC peut être utilisée pou....

Protocole

Une. Procédures animales

1. Tous les travaux des animaux doit être effectué en conformité avec les bureaux à domicile des animaux (Scientific Procedures) Act (1986).
2. Compagnon de rats Wistar âgés de 10 semaines par reproduction monogame, et confirmer la grossesse par l'apparition d'un bouchon vaginal. Enregistrer ce que le jour 1 de la gestation, et commencer régime expérimental. Pour les femelles vierges, accueillir chaque rat individuel, et commencer régime expérimental.
3. Après avoir nourri les régimes expérimentaux pendant 20 jours euthanasier les rats par asphyxie au _CO2, suivie par dislocation cervicale.
4. Ut....

Résultats

Le succès de ce procédé dépend de la suite du protocole de précision et de nettoyage utilisant des solvants et des réactifs de façon à réduire le «bruit» et la contamination qui peut apparaître sur un chromatogramme. Les échantillons contaminés sont plus difficiles à analyser, ce qui réduit la précision de l'aire sous la courbe de calculs. Si le protocole est suivi avec succès un chromatogramme avec des pics symétriques, claires et bien définies, avec un bruit de fond minimal doit être obtenue, comme illustré sur

Discussion

Chromatographie en phase gazeuse est une technique exacte à utiliser pour l'analyse d'acide gras, et sa reproductibilité élevée juge cette technique convient pour les analyses cliniques. Colonnes de CPG appropriées doivent être utilisées pour permettre l'identification d'acides gras d'intérêt, avec des colonnes disponibles présentant des variations de la polarité de la phase stationnaire, la longueur de la colonne et le diamètre intérieur. L'utilisation d'une colonne capillaire en silice fond.......

Matériaux

Liste des matériaux utilisés dans cet article

Nom	Entreprise	Numéro de catalogue	Commentaires
Méthanol	Fisher Scientific	M/4056/17	Fumées 'ATTENTION' - Chlorforme de qualité HPLC
	Fisher Scientific	C/4966/17Fumées	'ATTENTION' - Grade HPLC BHT
	Sigma- Aldrich	W218405'ATTENTION' Fumées de poussière - Anhydre
NaCl	Sigma- Aldrich	S9888	Hexane anhydre
	Fisher Scientific	H/0406/17	Fumées -
Acide acétique glacial	Sigma- Aldrich	695084'ATTENTION	' Brûlures - 99,85 %
Acide sulfurique	Sigma- Aldrich	339741'ATTENTION	' Brûlures - 99.999 %Carbonate de
potassium	Sigma- Aldrich	209619	99 % ACS Bicarbonate
potassium	Sigma- Aldrich	237205	99,7 % ACS
Acétate d’éthyle	Fisher Scientific	10204340	Fumées - 99+ % GLC Spécifié
Toluène	Fisher Scientific	T/2300/15	' Fumées
Éther diéthylique	Sigma- Aldrich	309966'ATTENTION	' Fumées Bouteille d’azote
(sans oxygène)	BOC	44-w	'ATTENTION' Gaz comprimé - risque d’explosion
Cartouches SPE de silice aminopropylique	Agilent	12102014	Cartouche - Masse de billes 100 mg
Gel de silice Cartouches SPE	Agilent	14102010	Cartouche - Masse de billes 100 mg
Saisies moléculaires	Sigma- Aldrich	334324	Pellets, AW-300, 1,6 mm
Pipettes Pasteur en verre	Fisher Scientific	FB50251

' ' de qualité HPLC de de qualité réasgente '