Souris Transplantation rénale: Les modèles de rejet des allogreffes

Résumé

Ici, nous présentons un protocole pour étudier l’immunologie du rejet. Le modèle chirurgical présenté fait état d’une durée opératoire courte et d’une technique concise. Selon la combinaison de souche donneur-receveur, le rein transplanté peut développer un rejet cellulaire aigu ou des lésions chroniques de l’allogreffe, définies par une fibrose interstitielle et une atrophie tubulaire.

Résumé

Le rejet du rein transplanté chez l’homme reste une cause majeure de morbidité et de mortalité. Le modèle murin de la transplantation rénale reproduit fidèlement les processus techniques et pathologiques qui se produisent dans la transplantation rénale humaine. Bien qu’il existe des modèles murins de rejet allogénique dans des organes autres que le rein et qu’ils soient plus réalisables sur le plan technique, il existe des preuves que différents organes suscitent des modes et des dynamiques de rejet disparates, par exemple l’évolution temporelle du rejet dans l’allogreffe cardiaque et rénale diffère considérablement dans certaines combinaisons de souches. Ce modèle est un outil attrayant pour de nombreuses raisons malgré ses défis techniques. Comme les haplotypes de souches de souris consanguines sont bien caractérisés, il est possible de choisir des combinaisons de donneurs et de receveurs pour modéliser le rejet aigu de l’allogreffe par transplantation à travers les loci I et II du CMH. À l’inverse, la transplantation entre souches ayant des haplotypes similaires peut provoquer un processus chronique où le rein allogreffé développe une fibrose interstitielle et une atrophie tubulaire. Nous avons modifié la technique chirurgicale pour réduire le temps d’opération et améliorer la facilité de la chirurgie, mais une courbe d’apprentissage doit encore être surmontée afin de reproduire fidèlement le modèle. Cette étude fournira des points clés dans la procédure chirurgicale et aidera le processus d’établissement de cette technique.

Introduction

Transplantation rénale réussie pour le traitement de l'insuffisance rénale a été décrite pour la première en 1955 entre jumeaux monozygotes ^1, depuis lors, il est devenu un traitement révolutionnaire destiné aux patients en phase terminale d'insuffisance rénale à travers le monde, offrant à la fois une amélioration de la longueur et de la qualité de la vie ^2. Cependant la survie du greffon à long terme a été entravée par une multitude de processus pathologiques entraînant des dommages de l'allogreffe chronique ^3.

Rejet du rein transplanté chez l'homme reste une cause majeure de morbidité, e....

Protocole

Éthique institutionnels appropriés nationales et locales devraient être en place avant de procéder à des expérimentations animales. En particulier au Royaume-Uni, les expériences suivantes ont été réalisées dans le cadre des Animaux (Scientific Procedures) Act 1986 Lorsque deux microchirurgiens sont disponibles pour faire fonctionner simultanément le chirurgien des bailleurs de fonds doit exécuter les étapes 1.1 à 1.16 puis 3.1 à 3.5, tandis que le chirurgien bénéficiaire effectue de 2,1 à 2,8 . Pour un seul opérateur les étapes peuvent être suivies successivement.

1. donateurs Préparation

Remarque: La procédure....

Résultats

Le rejet d'allogreffe rénale peut être évaluée par une analyse histologique de coupes de tissus fixés Methacarn paraffine du rein transplanté (figure 2). Transplantation de reins isogreffe entre les résultats des souris syngéniques dans les lésions de reperfusion ischémique rénale, mais de 4 semaines, les tubules ont récupéré et sont histologiquement comparable à reins natifs. Le rejet aigu peut être modélisé par les souris C57BL / 6 dans des receveurs de transplantation rénale de souris BALB / c, penda.......

Discussion

La manière la plus bien décrites pour effectuer l'anastomose artérielle est d'utiliser l'aorte distale du donneur, à l'artère rénale dans le prolongement, d'une manière bout à l'autre de l'aorte destinataire. Nous décrivons l'utilisation d'un correctif de l'aorte, similaire à la mise en miroir 'Carrell patch' qui a effectué la transplantation de rein humain que nous croyons être plus pratique. Bien que les rapports de la littérature du donneur et du receveur opératoire tem.......

Matériaux

Liste des matériaux utilisés dans cet article

Nom	Entreprise	Numéro de catalogue	Commentaires
Instruments chirurgicaux
Ciseaux de dissection émoussés	Outils scientifiques fins	; 14072-10	Pour la coupe de la peau
Ciseaux Castoviejo incurvés	Outils de science fine	15017-10	Pour la coupe de tissus
Ciseaux à ressort &ndash ; droits	Outils de science fine	15000-08	Pour la coupe de suture
Pince dentée 1x2 dents	Outils de science fine	11021-12
2 x Pince à pointe fine (Dumont No.5)	Outils de science fine	11251-20
Pince coudée à pointe fine (Dumont n° 5/45)	Fine Science Tools	11253-25	Pour la dissection émoussée
Pince à pointe fine incurvée (Dumont n° 7)	Fine Science Tools	11273-22	Utile pour faire circuler les récipients
Crile Haemostat incurvé	Fine Science Tools	1300-04
Micro clip applicateur avec serrure	Fine Science Tools	18056-14
2 x Micro serrefines largeur de ressort 2mm, longueur de la mâchoire 4mm	Fine Science Tools	18055-04	Pinces microvasculaires
2 x Colibri 3cm écarteur de fil	Fine Science Tools	17000-03
Porte-aiguille Castroviejo avec serrure	Fine Science Tools	120660-01
Applicateur de clip de bobine	Fine Science Tools	12031-07
Clips de bobinage de 7mm	Fine Science Outils	12032-07	Retirer 7 à 10 jours après l’opération
Équipement
OPMI pico microscope	Carl Zeiss	S100
Unité de cautérisation thermique à pointe fine	Geiger	150A
Heat Tampon électronique	Cozee Cumfort	n/a
Euroklav 23-S	Melag	n/a	Autoclave
Jetable équipement
7/O Suture tressée en soie	Pearsall	30514
10/O Suture Dafilon (polyamide)	B-Braun	;
6/O Vicryl (plygalectine)	Ethicon	W9537
Aiguille à biseau régulier, 1 pouce, 21G	Bection, Dickinson and Company	305175	Pour l’anastamose urétérale
Aiguille à biseau régulier, 5/8 pouce, 25G	Bection, Dickinson and Company	305122
Aiguille à biseau régulière, 1/2 pouce, 30G	Bection, Dickinson and Company	304000
Aiguille à insuline 1ml, 29G	Bection, Dickinson and Company	324827
Aiguille à insuline 0.3ml, 30G	Bection, Dickinson and Company	324826
1 ml seringue slip tip	Bection, Dickinson and Company	300184
5 ml seringue slip	Bection, Dickinson and Company	302187
Wypall paper écouvillons	Kimberley-Clark	L40	stérilisé en autoclave
Cotons-tiges	Johnson and Johnson n	/a	stérilisé en autoclave
Champs unis	Guardian	CB03	stérilisé en autoclave
Boîte de culture cellulaire 60mm x 15mm	Corning Incorporated
Goupille de distribution	B-Braun	DP3500L / 413501	Utilisé avec NaCl 0,9 %
Réactifs et médicaments
(Lacri-Lube) Paraffine molle blanche 57,3 %, huile minérale 42,5 % et alcools de lanoline 0,2 %	Allergan Ltd	21956GB10X
(Videne) Povidone iodée 10 %	Ecolab Ltd	PL 04509/0041
(Vetalar V) Chlorhydrate de kétamine	Pfizer Animal Health	Vm 42058/4165	solution 100mg/ml (dose 200mg/kg)
(Domitor) Chlorhydrate de médétomidine  ;	Orion Pharma	VM 06043/4003	1mg/ml (dose 0,5mg/kg)
(Vetergesic) Chlorhydrate de bupernorphine  ;	Alsto Animal Health	Vm 00063/4002	0,3 mg/ml (dose 0,05 mg/kg)
(antisédan) Atipamezole hydrochoride	Orion Pharma	Vm 06043/4004	5 mg/ml (dose 2 mg/kg)
Université du Wisconsin Solution	Belzer Bridge to Life	n/a	dose environ 500 microlitres/souris
NaCl 0,9 %	Baxter	FKE1323
sulfate d’héparine	non exclusif	n/a	5000 unités/ml (dose 5 unités/souris)

G1118099 tip 430166