Un abonnement JoVE est requis pour visualiser ce contenu. Connectez-vous ou commencez votre période d'essai gratuite.

Article de méthode

Whole Vitré Dissection d'analyse Vitreodynamic

11.6K vues

⸱

DOI :

10.3791/52759

⸱

24 mai 2015

 ,  , 

Dans cet article

Résumé

L’objectif de ce protocole est de mettre en évidence une technique efficace pour isoler le noyau et le cortex vitréens entiers et intacts des yeux porcins énucléés post-mortem.

Résumé

Les auteurs proposent une technique efficace pour isoler le noyau et le cortex vitréens entiers et intacts des yeux porcins énucléés post-mortem. Bien que des études antérieures aient montré les résultats de telles dissections, les étapes détaillées n’ont pas été décrites, ce qui empêche les chercheurs extérieurs au domaine de reproduire leurs méthodes. D’autres études prélèvent le vitré soit par aspiration, qui ne maintient pas l’anatomie de la structure vitrée, soit par dissection partielle, qui isole uniquement le noyau vitréen. La méthode proposée isole l’ensemble du corps vitré, avec le noyau et le cortex vitréens intacts, tout en maintenant l’anatomie et l’intégrité structurelle du vitré. Dans cette méthode, un lambeau scléral de pleine épaisseur dans un œil porcin énucléé est d’abord créé et grâce à cela, le tissu choroïde peut être séparé de la sclérotique. Le lambeau scléral est ensuite élargi et la choroïde est complètement séparée de la sclère. Enfin, le tissu choroïde-rétin est décollé du vitré pour laisser un corps vitré intact isolé. La technique de dissection vitrée proposée peut être utilisée pour étudier les propriétés physiques de l’humeur vitrée. En particulier, cette méthode a une importance pour les études expérimentales impliquant l’administration de médicaments, le transport vitréo-rétinien de l’oxygène et la convection intraoculaire.

Introduction

Le but de cette méthode est de définir une technique pour isoler un ensemble de corps vitré, intact, avec le noyau et le cortex intact vitreux, à partir d'un œil de cadavre, aux fins de l'analyse vitreodynamic. Comme le domaine de la physiologie vitreux a augmenté, de chercheurs multidisciplinaires, telles que la mécanique des fluides chercheurs, enquêtent sur ​​les propriétés physiques et biomécaniques du corps vitré 1. À cette fin, il est essentiel de détail une technique pour isoler l'ensemble, corps vitré intacte pour aider les chercheurs multidisciplinaires.

Sebag et al. 2 et 3 au....

Accès restreint. Veuillez vous connecter ou commencer un essai pour afficher ce contenu.

Protocole

Tous les yeux énucléés ont été obtenus à partir d'un abattoir et toutes les expériences ont été réalisées en conformité avec les lois institutionnelles en matière de biosécurité.

  1. Fixez œil énucléé sur une surface. Pour ce faire, en plaçant les repères de tissus à travers le tissu en excès autour de l'œil et la sécurisation vers le bas dans un conseil de styromousse.
  2. Disséquer et détachez la conjonctive de l'œil périlimbique.
    1. Utilisez une pince fine (0,3 forceps) et microciseaux (ciseaux Westcott) à inciser la conjonctive au limbe et carrément disséquer au large de la sclérotique. Couper la conjonctive long du limbe que la d....

Accès restreint. Veuillez vous connecter ou commencer un essai pour afficher ce contenu.

Résultats

En suivant le protocole conduira à une dissection vitreux réussie avec le noyau et le cortex (Figure 3) intact. Ceci est évident à partir des morceaux résiduels de rétine adhéré au cortex vitréen. Vitré toute Intact peut être utilisé de plusieurs façons pour les expériences vitreodynamic spécifiques. Dans notre cas, le taux de diffusion de l'oxygène dans le corps vitré intacte et il est la constante de temps correspondant a été étudiée (Figure 2). Vitreux qui a été disséqué (noyau e.......

Accès restreint. Veuillez vous connecter ou commencer un essai pour afficher ce contenu.

Discussion

Il ya deux étapes essentielles qui doivent être soigneusement exécutées lors de la dissection vitreux. Étape 3, la création d'un volet scléral pleine épaisseur, est cruciale pour l'ensemble de la dissection. Il faut prendre soin de ne pas couper dans la choroïde lors de la création de la pleine épaisseur volet scléral. L'autre étape essentielle est loin disséquait la sclérotique de la choroïde. Cette étape doit être effectuée avec soin pour éviter de créer de multiples trous dans la choroïde à partir de laqu.......

Accès restreint. Veuillez vous connecter ou commencer un essai pour afficher ce contenu.

Déclarations de divulgation

Les auteurs n’ont rien à divulguer.

Remerciements

Les auteurs remercient les sources de financement suivantes, Whittier Foundation, Harrington Foundation, National Institutes of Health et Research to Prevent Blindness.

....

Accès restreint. Veuillez vous connecter ou commencer un essai pour afficher ce contenu.

Matériaux

Liste des matériaux utilisés dans cet article
NomEntrepriseNuméro de catalogueCommentaires
0,3 pinceStorz OpthalmicsE1793
Westcott Ciseaux de ténotomie courbés droiteStorz OpthalmicsE3320 R
Manche de scalpel n° 3VWR25607-947
Lame de scalpel, #11, pour poignée #3VWR470174-844

Références

  1. Siggers, J. H., Ethier, C. R. Fluid Mechanics of the Eye. Annual Review of Fluid Mechanics. 44 (1), 347-372 (2012).
  2. Sebag, J. Age-related changes in human vitreous structure. Graefes Arch Clin Exp Ophthalmol. 225 (2), 89-93 (1987).
  3. Grignolo, A.

Accès restreint. Veuillez vous connecter ou commencer un essai pour afficher ce contenu.

Réimpressions et autorisations

Explorer plus d’articles

Isolement du corps vitré completcréation d'un lambeau scléralséparation choroïdo-rétiniennedissection de l'œil porcinnoyau et cortex vitréenspréservation de l'anatomie du vitrétechnique d'analyse vitréodynamiquecorps vitré intactpropriétés de l'humeur vitrée