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Article de méthode

Préparation de Mica et Silicon substrats pour l'ADN Origami Analyse et Expérimentation

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DOI :

10.3791/52972

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23 juillet 2015

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1Department of Chemistry and Biochemistry, University of Notre Dame, 2Department of Chemical and Biomolecular Engineering, University of Notre Dame, 3Department of Chemistry, Physics, and Engineering Studies, Chicago State University, 4Department of Technology, Ivy Tech Community College, South Bend, Indiana

Dans cet article

Résumé

Des procédés de nettoyage reproductibles pour les substrats utilisés dans la recherche sur l’origami d’ADN sont décrits, y compris le nettoyage RCA sur paillasse et la dérivation de l’oxyde de silicium. Des protocoles pour la préparation de surface, le dépôt d’ADN en origami, les paramètres de séchage et les configurations expérimentales simples sont illustrés.

Résumé

La nature conçue et la synthèse contrôlée en un seul pot de l’origami d’ADN offrent des opportunités intéressantes dans de nombreux domaines, en particulier la nanoélectronique. Beaucoup de ces applications nécessitent une interaction et une adhésion de nanostructures d’ADN à un substrat. En raison de sa nature atomiquement plate et facile à nettoyer, le mica a été le substrat de choix pour les expériences d’origami d’ADN. Cependant, les applications pratiques du mica sont relativement limitées par rapport à celles des substrats semi-conducteurs. Pour cette raison, un processus simple, stable et reproductible pour l’adhésion de l’origami d’ADN sur de l’oxyde de silicium dérivé est présenté ici. Pour favoriser l’adhésion des nanostructures d’ADN à la surface de l’oxyde de silicium, une monocouche auto-assemblée de 3-aminopropyltriéthoxysilane (APTES) est déposée à partir d’une solution aqueuse compatible avec de nombreuses photorésines. Le substrat doit être nettoyé de tous les contaminants organiques et métalliques à l’aide des procédés de nettoyage de Radio Corporation of America (RCA) et la couche d’oxyde native doit être gravée pour assurer une surface plane et fonctionnalisable. Les salles blanches sont équipées d’installations pour le nettoyage du silicium, mais de nombreux composants des tampons et solutions d’origami d’ADN ne sont souvent pas autorisés en raison de problèmes de contamination. Ce manuscrit décrit la configuration et le protocole de nettoyage du silicium en laboratoire à petite échelle pour les chercheurs qui n’ont pas accès à une salle blanche ou qui souhaitent intégrer des processus susceptibles de provoquer la contamination d’une paillasse blanche CMOS en salle blanche. De plus, les variables de régulation de la couverture sont discutées et la façon de reconnaître et d’éviter les problèmes courants de préparation des échantillons est décrite.

Introduction

D'abord présenté en 2006, l'ADN origami utilise la nature d'auto-assemblage d'oligonucléotides d'ADN pour produire des nanostructures concevables et très ordonnées. 1 Une myriade de structures ont été signalés, allant de smiley face à verrouillée boîtes 3 ​​dimensions. 2 ADN origami peut être fonctionnalisés avec diverses biomolécules et nanostructures, donnant lieu à des applications de recherche en nanoélectronique, la médecine et l'informatique quantique. 3 Cependant, l'analyse et de nombreuses applications futures ne sont pas seulement tributaire de la conception structurelle, mais aussi sur l'adhésion des nanostructures d'ADN origami à des surfaces. Les méthodes décrites dans ce manuscrit ont trait à la préparation des échantillons d'origami d'ADN sur deux types de supports: mica et d'oxyde de silicium fonctionnalisés.

Mica est le substrat de choix pour les études de l'ADN origami parce qu'il est atomiquement plat, avec une hauteur de couche de 0,37 nm ± 0,02 nm. 4 Il est également EASily nettoyé, ce qui rend la préparation des échantillons et de la microscopie à force atomique (AFM) des études simple. Mica moscovite contient une densité élevée de potassium dans chaque plan de clivage, mais ces ions diffuse loin de la surface du mica lorsque dans l'eau. Pour la médiation de la liaison de l'ADN origami pour le substrat de mica, Mg 2+ est utilisée pour inverser la charge négative du mica et de lier électrostatique du phosphate d'ADN épine dorsale du substrat (figure 1A). 5 mélanges d'ADN recuit en présence d'un grand excès de brins de base donnent une couverture élevée et de bonnes images de mica, car l'adhérence de l'ADN origami à la surface Mg 2+ à terminaison est beaucoup plus forte que l'adhérence d'oligonucléotides simple brin (brins de base). D'autres ions chargés positivement, y compris Ni 2+ et Co 2+ peuvent être utilisés pour contrôler l'adhérence de l'ADN sur du mica. 6,7 Modification de la concentration de cations monovalents et divalents dans la solution peut servir de médiateur adhésion et de diffusion de surface taux d'ADN origami. 8 Cependant, le protocole de préparation des substrats de mica et de dépôt et rinçage de la origami est souvent pas explicitement décrits dans les manuscrits publiés. 9 Sans un protocole clair, des résultats reproductibles peuvent être difficiles à obtenir.

Mica est un isolant, de sorte qu'il ne convient pas en tant que substrat pour certaines applications en nanoélectronique. Silicon passive avec un oxyde natif mince possède des propriétés électroniques souhaitables, y compris la compatibilité avec le traitement préalable gratuit semi-conducteurs à oxyde métallique (CMOS) pour créer / structures d'entrée-sortie et les caractéristiques topographiques. Les plaquettes de silicium stockées dans l'air sont passivées avec soit un oxyde thermique d'épaisseur ou d'un film d'oxyde natif mince qui est relativement sale, avec un nombre élevé de particules. L'oxyde de silicium a une densité de charge de surface beaucoup plus faible que le mica, et la densité de charge est très dépendante de la préparation de l'oxyde et de l'histoire. À des concentrations en ions magnésium above 150 mM, de bonnes couvertures (jusqu'à 4 / um 2) de l'origami d'ADN rectangulaire peut être réalisé sur l'oxygène plasma traité substrats de silicium; Cependant, cette concentration et la couverture peuvent varier selon la taille et la conception des nanostructures utilisé. 10 Un protocole alternatif pour accorder la charge de surface est d'attacher une monocouche auto-assemblée cationique de 3-aminopropyltriéthoxysilane (APTES) (figure 1B) à l'oxyde. L'aminé primaire sur APTES peut être protoné à un pH inférieur à 9, en modifiant la charge et le caractère hydrophobe du substrat. 11 Pour une monocouche complète de APTES être déposé avec succès, le silicium doit être nettoyé de manière appropriée en utilisant Radio Corporation of America (RCA) protocoles . Ces protocoles comprennent des traitements de l'hydroxyde d'ammonium et des solutions de peroxyde d'hydrogène (RCA1) pour éliminer les résidus organiques et les contaminants particulaires. Un court gravure dans une solution aqueuse d'acide fluorhydrique enlève la couche d'oxyde natif avectous les contaminants ioniques qui adhèrent à l'oxyde. Enfin, les échantillons sont exposés à de l'acide chlorhydrique et de solution de peroxyde d'hydrogène (RCA2) pour éliminer les métaux et les contaminants ioniques et former une couche mince et uniforme d'oxyde. 12 La plupart des salles blanches ont désigné les hottes de protocoles de nettoyage CMOS, avec des règles strictes sur ce qui peut être utilisé dans ces domaines. Un problème commun est livré sous la forme d'ions tels que le sodium, qui peuvent perturber les propriétés électroniques des structures CMOS en créant des pièges midbandgap. 13 Ions couramment utilisé dans l'ADN origami préparation et de dépôt des tampons pourrait contaminer les bains CMOS et causer des problèmes pour d'autres chercheurs utilisant la chambre propre. Pour cette raison, notre groupe utilise un CMOS «sales» banc de nettoyage disposés spécifiquement pour les petits échantillons utilisés pour la recherche de l'ADN origami. Ce processus est une bonne alternative à la salle blanche traditionnelle set-up et peut convenir pour les laboratoires qui ne disposent pas de l'accès à un banc CMOS de salle blanche.

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Protocole

1. Expérience Planification et préparation Matériel

  1. Déterminer la conception, de la concentration, et la fonctionnalité de l'origami d'ADN qui sera utilisé dans les expériences. 14-16 Ici, nous utilisons un design ADN origami rectangle préparés 1x TAE / Mg 2+ solution (40 mM Tris-base 20 mM l'acide acétique, 2 mM d'EDTA et 12 mM d'acétate de magnésium, pH 8,0). 17
  2. Autoclave tous les bons plans, des tubes et des récipients pour être utilisé. Ces matériaux doivent tous être compatibles autoclave.
  3. Préparer un approvisionnement d'eau stérile pour le rinçage. Remplir un bocal stérile avec environ 500 ml de 18 MQ x cm d'eau, place sur une plaque de cuisson, faire bouillir pendant 5 min avec le bouchon, et de prendre le pot hors de la plaque chauffante et laisser refroidir avec le couvercle placé sur le conteneur, mais pas serré . Conserver au réfrigérateur et de préparer une nouvelle offre chaque mois ou lorsque nécessaire.

2. Préparation de la Mica Substrat

  1. substrats de couper à la taille appropriée (1 cm x 1 cm carrés) avec des ciseaux. Mica est mince et fragile. Alternativement, acheter mica sous forme de disque qui ne nécessite pas de coupe.
  2. Cliver le mica en utilisant du ruban adhésif double-face. Mica est composé de couches de minéraux séparés en intercalant ions, chaque couche peut être décollée quand adhéré à ruban adhésif double face. 18
    1. Placez les carrés de mica sur le ruban adhésif double face encore dans le dévidoir de ruban, en vous assurant qu'il adhère fermement à la bande. Faites glisser délicatement les pinces entre le mica et la bande, le haut-couche la plus sera supprimé et restent sur la bande. Immédiatement après l'enlèvement, la place de mica aura son côté propre vers le bas. Assurez-vous de retourner le mica plus avant de la ranger dans un conteneur.
    2. Répétez cette opération trois ou quatre fois pour assurer l'élimination complète de la couche la plus supérieure et un nettoyage adéquats.
  3. Alternativement, adhérer le mica à un conteneur ou une table-top avec un morceau de ruban adhésif double face et utiliser une deuxième pièce à scochez la case pour et de décoller la couche supérieure plus de mica. Le mica est correctement nettoyé dans les deux cas, bien que la méthode alternative et permet le dépôt d'ADN rinçage et séchage de l'échantillon difficile en raison de la deuxième adhérence sur le support.

3. Dépôt ADN Origami sur Mica

  1. Brièvement, mélangez le flacon de l'ADN origami utilisant un mélangeur vortex pour assurer une dispersion des nanostructures en solution.
  2. Pipette 4 pi de solution sur le mica, assurant que la pointe de la pipette ne touche pas le substrat. Laissez l'origami d'ADN sur le mica pour environ 10 min pour assurer une couverture adéquate. Le temps de dépôt varie en fonction de la concentration de l'ADN origami utilisé ainsi que la couverture souhaitée (figures 2 et 3).
    1. Rincer la solution ADN origami hors du substrat de mica en utilisant 100 pi d'eau stérile dessus d'un évier ou autre récipient de liquide. Ramassez le mica avec des pincettes. Pipeter l'eau sur lasubstrat, avec le flux de la chute vers la pointe de la pince à épiler. Agiter le mica avec une forte baisse de mouvement pour éliminer l'excès d'eau. Tenir la pince à épiler debout afin que l'eau coulera vers les pincettes pour éviter la contamination de l'échantillon.
  3. Sécher le substrat avec un flux régulier d'azote (N 2) pendant 1 min. Assurez-vous que toute l'eau en excès est éliminé. Répétez le rinçage avec un 100 pi supplémentaires de l'eau stérile. Sécher le substrat avec N2 pendant 3 minutes supplémentaires. Un substrat complètement sec est nécessaire pour la réussite de la microscopie à force atomique (AFM) analyse (figure 4).
  4. Analyser le substrat en utilisant l'AFM ou un magasin dans un récipient fermé.

4. CMOS / Silicon nettoyage Set-up

  1. ATTENTION: Lorsque vous utilisez les CMOS SET-UP, utiliser l'équipement de protection personnelle à tout moment. Les réactifs comprennent les acides forts, bases fortes, l'acide fluorhydrique (HF), et des agents oxydants puissants qui can réagir avec des solvants de déchets si les réactifs ne sont pas éliminés correctement. Respecter les consignes de sécurité suivantes:
    1. Maison CMOS banc dans une hotte chimique avec aucun autre processus ou set-ups.
    2. Porter des gants en nitrile, blouse de laboratoire, lunettes de sécurité, gants en nitrile grands industriels, un tablier en cas de déversement, et un écran facial en tout temps lorsque vous utilisez le banc CMOS.
    3. Utilisez bacs en plastique comme confinement secondaire lorsque les solutions sont préparées.
    4. Utilisez un fluoré gobelet gradué de polymère inerte pour la manipulation du HF concentré.
    5. Assurez-gluconate de calcium pommade disponible en premiers soins pour toute exposition de la peau.
    6. Seul le personnel correctement formé pour exécuter le processus.
    7. Toujours veiller à un autre membre du laboratoire est présent en cas d'urgence.
    8. Gardez les fiches signalétiques pour tous produits chimiques près de la hotte.
    9. Se familiariser avec l'institution de ou déversement de produits chimiques et d'exposition les politiques de l'entreprise.
      Remarque: HF imprègne facilement la peauet est un trésor de calcium, affectant les os et les nerfs préjudiciables si l'exposition se produit. L'exposition cutanée à quelques millilitres d'acide fluorhydrique concentré peut être dangereux et même mortel. Établir les précautions nécessaires pour assurer l'exposition ne se produit pas.
  2. Effectuer RCA1 et RCA2 dans un document distinct béchers de 250 ml en verre sur plaques séparées. Chaque bécher doit contenir une barre d'agitation. Surveiller la température de la solution au moyen de thermomètres serrées de sorte que la barre d'agitation ne bang dans le bulbe. Couvrir les verres en utilisant un verre de montre pour diminuer les effets de l'évaporation.
  3. RCA1 Préparation
    1. Placer 50 ml de 18 MQ x cm d'eau dans le bécher de RCA1 désigné l'aide d'un gobelet gradué.
    2. Ajouter 15 ml d'hydroxyde d'ammonium concentré (NH 4 OH) dans le bêcher. Rincer le bécher de mesure avec 25 ml d'eau et ajouter l'eau de rinçage dans le bécher de RCA1.
    3. Mettez sur le feu et agitateur sur la plaque chauffante et porter le bain de RCA1 à 70 ° C.
    4. Ajouter 15 ml de 30% de peroxyde d'hydrogène (H 2 O 2) dans le bécher de RCA1. Utiliser la solution à l'intérieur de RCA1 1 h après le H 2 O 2 a été ajouté. Le bain peut être utilisé plusieurs fois en l'espace de trois jours si 15 ml de peroxyde est ajouté au bain à chaque fois.
    5. Rincer le bécher de mesure soigneusement à l'eau et jetez le liquide de rinçage dans un flacon de récupération de RCA1 appropriée.
  4. RCA2 Préparation
    1. Ajouter 70 ml de 18 MQ x cm d'eau dans le bécher de RCA2 désigné en utilisant le gobelet gradué et rincé.
    2. Ajouter 15 ml d'acide chlorhydrique concentré (HCl). Rincer le bécher de mesure avec 20 ml d'eau et ajoutez-le dans le bécher de RCA2.
    3. Augmentez la chaleur et la vitesse de la plaque chauffante remuer jusqu'à ce que la solution atteigne 70 ° C.
    4. Ajouter 15 ml de 30% de H 2 O 2. Comme le bain de RCA1, utiliser cette solution à moins de 1 heure entre le moment où le H 2 O 2 est ajouté; en outre, le bainpeut être réutilisé plusieurs fois en l'espace de trois jours si 15 ml de H 2 O 2 est ajouté avant chaque utilisation.
  5. Préparation de la solution de HF
    1. Placer 50 ml d'eau dans un bêcher en polymère fluoré inerte.
    2. Mesure 4 ml d'acide fluorhydrique concentré (49%) dans le bécher de mesure en plastique et l'ajouter dans le bécher de polymère fluoré inerte.
    3. Rincez le bécher en plastique mesurant avec un total de 50 ml d'eau, ajouter l'eau de rinçage dans le bécher de HF. Laver le bécher de mesure soigneusement à l'eau et jetez les eaux de lavage dans un conteneur à déchets HF désigné.

5. Préparation et Nettoyage du substrat de silicium

  1. De coupe des plaquettes de silicium en puces
    1. Identifier les directions de réseau perpendiculaire et parallèle à la surface plane polie de la plaquette de silicium. Ces directions sont utilisés pour aider à faire des carrés de clivage plus facile. Les instructions suivantes concernent cleaving silicium <110> et peut ne pas convenir pour d'autres orientations cristallines.
    2. Placez la plaquette de silicium polie côté-up sur une surface molle, comme une serviette. Avec le stylet scribe diamanté, doucement nick le fond de la plaquette le long du bord plat principal. Placez un petit fil, comme un trombone, en dessous de la nick et appliquer doucement la pression sur la tranche en plaçant les doigts ou une pince à épiler de chaque côté de l'entaille et en poussant vers le bas. Ceci vous permettra de séparer la plaquette en deux moitiés le long de la ligne de réseau cristallin dans la direction de clivage naturel.
    3. Sur un autre serviette, avec un crayon et une règle, mesurer la largeur souhaitée des carrés en marquant des points à la fois sur le haut et le bas de la serviette. Reliez ces points avec des lignes droites. Cela servira de ligne directrice pour les formes, même carrés.
    4. Placez l'une des moitiés de la plaquette bord abord entre les lignes mesurées sur la serviette rincé contre la ligne et répétez l'étape 5.1.2 Le fraîchement brisée perpendiculaire pieces doivent maintenant être la largeur des places clivés. Tourner la plaquette horizontalement sur la serviette. Placez-le entre les lignes perpendiculaires et répéter le processus à l'étape 5.1.2.
    5. Stocker les puces de la plaquette fraîchement clivé dans un flacon propre rempli d'eau déminéralisée pour éviter les rayures. Les puces de silicium peuvent être stockées indéfiniment, mais doivent être nettoyés avant de commencer les expériences.
  2. CMOS nettoyage de la Silicon
    1. Lorsque la solution de RCA1 a atteint la température appropriée, submerger huit à dix 1 cm x 1 cm puces de silicium dans la solution en utilisant un panier en polymère fluoré inerte avec un "diamètre 2. Des bulles d'oxygène se forment sur les puces et les parois du bêcher. Si aucun bouillonnement se produit, le H 2 O 2 est dégradée. Laisser les puces dans la solution pendant 10 à 20 min, en agitant le panier de haut en bas toutes les quelques minutes pour garder les puces de coller ensemble.
    2. Soulevez le panier contenant les puces de silicium et bien les égoutter. Déplacez le panier plus to le bécher des déchets et rincer abondamment à 18 MQ x cm d'eau. Plongez dans le bécher de lavage et se trémousser de haut en bas pendant 20 sec. Égoutter le panier et rincer abondamment à l'eau sur le bécher de déchets. Vider le bécher de déchets dans un flacon de récupération de RCA1 désigné et remplir avec de l'eau.
    3. Après le nettoyage de RCA1 est terminée, placer le panier dans le bécher 01h50 HF pour 10 à 20 sec. Utilisez un mouvement ascendant et descendant doucement pour mélanger les puces et HF. Soulevez le seau de dunk pour permettre à la HF se vider complètement l'écart.
      Remarque: Les surfaces de puces devraient être hydrophobe; l'eau ne sera pas mouiller la puce, mais au lieu de former des gouttelettes avec des angles de contact élevées. Ceci indique que l'oxyde de silicium a été gravée et à une distance de la puce est maintenant terminé par liaisons Si-H.
    4. Placer le bécher de lavage et de rinçage bêcher dans un bac en plastique, déplacer le panier sur le bécher de rinçage et rincer à 18 MQ x cm d'eau. Immerger le panier dans le bécher de lavage et agiter pendant 20 secondes.
    5. Procéder à un second drain et Lérinscycle de e avec 18 MQ x cm d'eau. Dump de l'eau de lavage dans le bécher de rinçage et remplissez le bécher de lavage avec de l'eau. Verser tous les déchets dans un flacon de récupération de HF plastique désigné.
    6. Lorsque la solution de RCA2 a atteint la température appropriée, immerger les morceaux de silicium dans les solutions en utilisant le panier. Laisser la solution pendant 10 à 20 min. La puce sera désormais hydrophile en raison de la croissance d'une mince (1-2 nm) film d'oxyde.
    7. Enlever après la quantité appropriée de temps et suivre les mêmes procédures de rinçage que pour RCA1. Éliminer les déchets dans le conteneur à déchets RCA2 appropriée. Retirer chaque puce du panier avec des pincettes en plastique, rincer avec de l'eau, et sécher avec de l'azote.
    8. copeaux de magasin dans une boîte de plaquette en plastique ou dans un flacon de 18 MQ x cm d'eau. Le silicium restera propre lorsqu'il est stocké dans l'eau pendant environ trois jours après le nettoyage. Assurez-vous que la zone de travail est correctement nettoyé et l'extérieur des gants CMOS ont été lavés. Laissez le CMgants de OS dans le capot pour sécher.

6. Dépôt ADN Origami sur silicium APTES fonctionnalisés

  1. Auto-assemblée Formation monocouche sur silicium
    1. APTES réchauffer à température ambiante avant l'ouverture. Si la bouteille est trop froid, la condensation peut se produire, entraînant l'hydrolyse des APTES pendant le stockage. Ajouter 1980 pi de 18 MQ x cm d'eau et 20 pi de APTES à un flacon de scintillation propre et agiter pour mélanger. Utiliser immédiatement cette solution.
    2. Placez une puce de silicium nettoyé réfléchissante côté-up dans le flacon de scintillation, couronner le, et laissez reposer pendant 20 min. Retirer la puce en utilisant une pince à épiler et rincer avec 200 pi d'eau et à sec pendant 1 min avec un courant de N2.
  2. Déposer l'ADN origami sur APTES fonctionnalisés Silicon
    Remarque: Les étapes pour déposer l'ADN origami sur le silicium fonctionnalisés sont analogues à celles pour déposer sur le mica.
    1. Mélanger rapidement le flacon ADN origami et la pipette 4 pi de solutionsur le substrat de silicium. Si nécessaire, augmenter le volume de solution d'ADN origami utilisé pour couvrir la totalité du substrat en silicium fonctionnalisés est plus hydrophobe que le substrat de mica. Utilisez une lamelle de verre à appuyer sur la solution de dépôt vers le bas et éviter l'évaporation pendant de longues dépositions.
    2. Laisser reposer la solution pendant le temps nécessaire à la concentration utilisée et la couverture souhaitée (voir les figures 2 et 3 pour l'effet du temps et de la concentration sur la couverture de surface). Rincez le substrat avec 100 ul de 18 MQ x cm d'eau stérile et sec avec N2 pendant 1 min.
    3. Répéter le rinçage avec un 100 ul supplémentaires de l'eau stérile et sécher le substrat avec N2 pendant 3 min.
    4. Conserver l'échantillon dans un récipient propre jusqu'à ce que d'autres expériences ou d'imagerie peuvent être effectuées. Les échantillons commencent à montrer accumulation de particules après environ une à deux semaines de stockage en fonction de la façon dont much ils sont manipulés.

7. AFM imagerie et l'analyse d'images d'échantillons d'ADN Origami

  1. Utilisez AFM en mode Tapping dans l'air à des fins d'imagerie. Mode de taraudage assure une force minimale sera appliquée aux nanostructures fragiles, par rapport au mode de contact.
    Remarque: Les paramètres d'imagerie dépendront de l'instrument. Toutes les images présentées ont été capturées à l'aide d'un MultiMode Nanoscope IIIa.
  2. Sélectionnez sondes AFM pour sans contact / mode dans de prélèvement d'air, avec revêtement réfléchissant d'or, une fréquence de résonance (nominal) de ~ 300 kHz, force constante de 40 N / m, les pourboires rayon <10 nm.
  3. Traiter et analyser les images AFM utilisant NanoScope logiciel d'analyse. Effectuer des calculs de couverture utilisant ImageJ. 19

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Résultats

Deux variables dictent la couverture de l'ADN origami sur le substrat: concentration de la solution et de la durée d'exposition. Les caractéristiques d'adsorption de l'ADN origami sur le mica et APTES oxyde de silicium fonctionnalisés ont été précédemment rapporté. 13 La relation entre la concentration de l'ADN origami dans la solution de dépôt et les couvertures finales sur le mica sont résumées dans le tableau 1 et figure 2, montrant de plus en plus des ...

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Discussion

Il ya plusieurs étapes qui doivent être souligné pour atteindre des résultats cohérents et idéales. Pour les échantillons de mica, après un rinçage stricte et approfondie et de séchage régime, comme dans les étapes 3.3 et 3.4, fera en sorte que des images de haute qualité de personne origami d'ADN peuvent être atteints en utilisant l'AFM sans les divers problèmes décrits dans la section des résultats représentatifs. D'une importance primordiale pour des échantillons de silicium est la propreté du substrat. E...

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Déclarations de divulgation

Les auteurs n’ont rien à divulguer.

Remerciements

Les auteurs remercient le Dr Gary Bernstein pour l’utilisation de l’AFM.

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Matériaux

Liste des matériaux utilisés dans cet article
NomEntrepriseNuméro de catalogueCommentaires
Eppendorf epT.I.P.S. Recharges, capacité 2-200  ; &mu ; lVWR International, LLC2249173310 plateaux de recharge de 96
pointes Tubes de microcentrifugation, PolypropylèneVWR International, LLC87003-2900,65 ml, Natural
Research Plus Pippete - Monocanal - 20-200  ; &mu ; lA. Daigger & Société, Inc.EF8960F-3120000054 CHACUNPixel de recherche Plus à volume réglable
- Canal unique - 2-20  ; &mu ; lA. Daigger & Société, Inc.EF8960D-3120000038 CHACUNVolume réglable
Scotch 237 Ruban adhésif double face permanentOffice Depot, Inc.6027103/4 » x 300 », paquet de 2
mélangeurs vortexThermo ScientificM37610-33Q
Récipient à gaufrettes simple, 2 » (50 mm), 60 mm x 11  ; mmMicroscopie électronique Sciences64917-26 par paquet
Plaquette de 6 po, type P, < Orientation 100>, avec plat primaireNova Electronic Materials, Ltd.
Gants d’examen en nitrile non poudrésVWR International, LLC82062-428Le numéro de catalogue est pour les
sondes sans contact de haute précision de grande taille avec revêtement réfléchissant AuK-Tek Nanotechnology, Inc.HA_NC/15
Autoclave PanA. Daigger & Société, Inc.NAL692-5000 EF25341C
Gants agressifs Sol-Vex II, Taille : 9-9.5 ; 15 mil, 13 pouces - 1 dzSpectrum Chemical Mfg. Corp.106-15055Avant utilisation, rincer à l’eau et frotter ensemble jusqu’à ce qu’il n’y ait plus de bulles sur les gants.
Pince à épiler PTFE 200 mm CarréDynalon Corp.316504-0002
Feuilles de mica muscovite V-5Microscopie électronique de qualité Sciences71850-0110 par paquet
Disque de mica, 10 mmTed Pella, Inc50Les disques de mica sont en option
Scriber Diamon Pen pour verrerieVWR International, LLC52865-005
Flacons à scintillation, verre borosilicaté, avec bouchon à vis - 20 mlVWR International, LLC66022-060Caisse de 500, avec capuchon en polypropylène et doublure en feuille de pâte à papier
4 x 5 pouces dessus PC-200 Plaque chauffante, 120 V/60 HzDot Scientific, Inc.6759-200
Bocaux en verre à parois droites, ouverture largeVWR International, LLC89043-554Caisse de 254, bouchons avec doublure en pulpe/vinyle attachée
Bécher en verre de qualité standard, capacité de 250 mlVWR International, LLC173506
Béchers, PTFEVWR International, LLC89026-022À utiliser avec le
verre de montre HF de forme peu profonde, 3"VWR International, LLC66112-107Caisse de 12
conteneurs de stockage en plastiqueVWR International, LLC470195-354Pour récipient secondaire
Thermomètres à liquide dans verre à usage généralVWR International, LLC89095-564
Pince à épiler de haute précision et ultra fineMicroscopie électronique Sciences78310-0
Écran facial en polycarbonateFisher ScientificInc.18-999-4542
Tablier en néoprèneFisher Scientific, Inc.19-810-609
Gluconate de calcium, calgonateW.W Grainger, Inc.13W861Tube, 25 g
Peroxyde d’hydrogène 30 % CR ACS 500 mlFisher Scientific, Inc.H325 500
3-Aminopropyltriethoxysilaneet toxique Gelest Inc.SIA0610.0-25GMLaisser chauffer à température ambiante avant utilisation.
Hydroxyde d’ammonium, 2,5 LFisher Scientific, Inc.A669-212NOCIF ET TOXIQUE
Acide chlorhydriqueFisher Scientific, Inc.A144-212NOCIF ET TOXIQUE
Acide fluorhydriqueFisher Scientific, Inc.A147-1LB
Nanoscope multimode nocif et toxique IIIaVeeco Instruments, Inc.Tout AFM capable de fonctionner en mode taraudage convient à l’analyse
Panier de trempageFabriqué en laboratoireFabriqué en laboratoireLe panier de trempage a été fabriqué à l’aide du fond d’une bouteille en PTFE percée, d’une poignée en PTFE et de toutes les vis en PTFE.
GC49266 nocif

Références

  1. Rothemund, P. W. K. Folding DNA to create nanoscale shapes and patterns. Nature. 440, 297-302 (2006).
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