Mesures de sécurité et procédures d'exploitation dans un (A) de laboratoire BSL-4: 2. Pratiques générales

Résumé

La réalisation de tests viraux dans un laboratoire BSL-4 est plus complexe que le travail dans un laboratoire BSL-2 en raison des précautions de sécurité supplémentaires requises. Nous présentons ici un aperçu des pratiques et des procédures utilisées dans un laboratoire BSL-4 illustrant l’utilisation appropriée des enceintes de biosécurité de classe II, la gestion et l’élimination des déchets et le prélèvement d’échantillons.

Résumé

Travailler dans un niveau de biosécurité 4 (BSL-4) laboratoire de confinement exige du temps et une grande attention aux détails. Le même travail qui est fait dans un laboratoire BSL-2 avec des agents pathogènes non-haute conséquence prendra beaucoup plus de temps dans un cadre BSL-4. Cette exigence de temps accrue est due à une multitude de facteurs qui visent à protéger le chercheur d'infections acquises au laboratoire, l'environnement de travail de la contamination potentielle et la communauté locale du possible la libération d'agents pathogènes à haut conséquence. A l'intérieur du laboratoire, le mouvement est restreint en raison de tuyaux d'air attachés aux combinaisons obligatoires de sécurité pour le corps. En outre, la désinfection de chaque élément qui est retiré des armoires de classe II de biosécurité (de GCS) est nécessaire. spécialistes de laboratoire doivent être formés dans les pratiques du laboratoire BSL-4 et doivent montrer haute compétence dans les compétences qu'ils exécutent. L'objectif de cet article est de décrire les procédures et les techniques pour assurer laboratoire b appropriéesiosafety et une précision expérimentale en utilisant un dosage de plaque virale classique comme un exemple de procédure. En particulier, les techniques appropriées pour travailler en toute sécurité dans un environnement BSL-4 lors de l'exécution d'une expérience sera soulignée visuellement. Ces techniques comprennent: la mise en place d'un BSC Classe II pour des expériences, nettoyage propre de la BSC Classe II lorsque vous avez terminé de travail, gestion des déchets et d'élimination sûre des déchets générée à l'intérieur d'un laboratoire de BSL-4, et le prélèvement d'échantillons inactivés à l'intérieur d'un BSL- 4 laboratoire au laboratoire BSL-2.

Introduction

Comme la sécurité du personnel de laboratoire manipulant des agents pathogènes à haut risque (existe pas prophylaxies d'infection, ni les options de traitement) est primordiale, le US Department of Health and Human Services a mis en place des lignes directrices pour la construction des installations et des meilleures pratiques pour la conduite en toute sécurité de travail avec les agents pathogènes dans biomédicale et les laboratoires cliniques d'une biosécurité perspective ^1. Grâce à la législation et la réglementation, la plupart des pratiques et procédures sont devenues des exigences obligatoires qui doivent être suivies pour le travail avec ces....

Protocole

1. Laboratoire d'entrée

1. Rassemblez toutes les fournitures provenant d' un laboratoire BSL-2 pour l'expérience (par exemple, les cellules, les médias, et consommables) avant d'entrer dans le laboratoire BSL-4.
2. Terminez la procédure d'entrée BSL-4 (décrite en détail dans la référence ^7).

2. Préparation d'un cabinet de biosécurité de classe II dans le laboratoire BSL-4

1. Une fois à l' intérieur du laboratoire BSL-4, assurer la liste de contrôle interne quotidienne (Figure 1) a été achevée. Remplissez la liste de contrôle si la liste de contrô....

Résultats

Après les procédures appropriées au sein du laboratoire BSL-4 sont essentiels pour assurer la réalisation sûre et efficace des tests. En se référant à la liste de contrôle interne quotidien rempli (figure 1), le personnel de laboratoire veiller à ce que l' équipement est pleinement opérationnel. Positionnement du corps dans le centre du BSC assure que l'expérience est réalisée dans des conditions d'écoulement d'air optimales (figure 2). L.......

Discussion

Travailler dans un laboratoire BSL-4 nécessite beaucoup de temps et une plus grande attention aux détails. Tout type de travail dans cet environnement nécessite bien formé, approfondie, et les personnes de conscience. Le dosage de plaque virale standard fournit un modèle précis d'une procédure commune pour travailler avec des agents pathogènes à haut conséquence dans le laboratoire BSL-4, que le test implique plusieurs concepts majeurs dans lesquels les travailleurs de laboratoire doivent être formés.

Matériaux

Liste des matériaux utilisés dans cet article

Nom	Entreprise	Numéro de catalogue	Commentaires
Micro-Chem Plus	National Chemical Laboratories	255
Ethanol	Fisher	BP2818500
2 ml Plaques à 96 puits	Fisher	278743
10 ml Pipette sérologique	Fisher	13-678-11E
25 ml Pipette sérologique	Fisher	13-678-11
Plaques à 6 puits	Fisher
Crystal Violet	Sigma	HT90132-1L
10 % Neutral Buffered Formalin	Fisher	22-050-105
Tragacanth	Fisher	50-702-2000  ;
20 &mu ; l Pointes de pipette	Fisher	21-402-550
200 &mu ; l Pointes de pipette	Fisher	21-402-561
1 000 &mu ; l Pointes de pipette	Fisher	21-402-581
DMEM	Lonza	12-604Q
FBS	Sigma	F2442-500mL
Pénicilline/Streptomycine	Lonza	17-602E
2x	EMEM Qualité Biologique	115-073-101
Pipette	Drummond	4-000-101
1 000 &mu ; l Pipette  ;	Pluie&	nbsp ; L-1000XLS+
200 &mu ; l Pipette  ;	Pluie&	nbsp ; L-200XLS+
12 puits, multicanal 200 &mu ; l Pipette	Rainin	L12-200XLS+
8 puits, multicanal 1 000 &mu ; l Pipette	Rainin	LA8-1200XLS
Attest	Express Medical Supplies  ;
Autoclave	Getinge	GEB 2404 AMB-2
Sac autoclave	Fisher	01-828E
2 000 ml Bécher	Fisher	02-591-10H
Plateau autoclave	Fisher	13-359-20B
Plateau pipette	Fisher	13-361-5
37 ° ; C Incubateur	Fisher	WU-39321-00
Biohazard Can	Rubbermaid Commercial	FG614500 RED
Autoclave Tape	Fisher	15-903
Tige d’autoclave	fabriquée par l’installation IRF	N/A
Light Box	Fisher	S11552
Thermoscelleuse	Fisher	NC9793612  ;
Sachets thermosoudés	Fisher	01-812-25H
Sac à risque biologique	Fisher	01-828E

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