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Article de méthode

Création d'abdominaux adhérences chez la souris

13.1K vues

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DOI :

10.3791/54450

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27 août 2016

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Dans cet article

Résumé

Les adhérences abdominales qui se forment après la chirurgie sont une cause majeure de douleur, d’infertilité, d’hospitalisation et de réopération pour une occlusion de l’intestin grêle. Notre procédure chirurgicale de création d’adhérences abdominales chez la souris est un outil fiable pour étudier les mécanismes sous-jacents à la formation des adhérences.

Résumé

Les adhérences abdominales consistent en un tissu fibreux qui se forme dans l’espace péritonéal en réponse à une agression inflammatoire, généralement une intervention chirurgicale ou une infection intra-abdominale. Les mécanismes précis sous-jacents à la formation de l’adhésion sont mal compris. De nombreux composés et barrières physiques ont été testés pour leur capacité à prévenir les adhérences après une intervention chirurgicale avec des niveaux de succès variables. La souris et le rat sont des modèles importants pour l’étude des adhérences abdominales. Plusieurs techniques différentes pour la création d’adhérences chez la souris et le rat existent dans la littérature. Nous décrivons ici un protocole utilisant l’abrasion du caecum avec du papier de verre et des sutures placées dans la paroi latérale abdominale droite. La souris est anesthésiée et l’abdomen est préparé. Une laparotomie médiane est créée et le caecum est identifié. Le papier de verre est utilisé pour abraser doucement la surface du cæcum. Ensuite, plusieurs sutures en forme de huit sont placées dans le péritoine de la paroi latérale abdominale droite. La cavité abdominale est irriguée, une petite quantité d’amidon est appliquée et l’incision est fermée. Nous avons constaté que cette technique produit les adhésions les plus constantes avec le taux de mortalité le plus bas.

Introduction

adhérences abdominales sont une forme de tissu cicatriciel qui se forment dans l'abdomen en réponse à l'inflammation, généralement après une intervention chirurgicale ou une infection intra-abdominale. Les adhérences sont une cause majeure de douleurs abdominales chroniques et l' infertilité, et sont la cause la plus fréquente de l' intestin grêle obstruction 1. La présence d'adhérences rend la réalisation d' une seconde opération abdominale plus difficile et augmente le risque de complications 2.

Malgré des années de recherche, les mécanismes sous-jacents de la formation d'adhérences rest....

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Protocole

Le protocole suivant a été approuvé par le Institutional soin et l'utilisation des animaux Comité Université Stanford (IACUC) et respecte toutes les directives éthiques institutionnelles relatives à l'utilisation des animaux de recherche.

1. Création d'adhérences abdominales

  1. Commencez la souris sur l'antibiotique chow régime une semaine avant la procédure.
  2. Autoclave les instruments chirurgicaux et préchauffer la solution d'irrigation saline.
  3. Anesthetize la souris en utilisant 2% d'isoflurane inhalée.
  4. En utilisant une tondeuse à cheveux suivie d'une application rapide (5 ....

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Résultats

A sept jours après la chirurgie, le caecum et éventuellement le côlon ascendant, le foie et les boucles de l'intestin grêle doit être adhérente à la paroi abdominale du côté droit. (Figure 8) de tissu excisé peut être intégré et sectionné et donnera d' excellentes lames histologiques. (Figure 11, 12)

Lorsque la procédure est exécutée correctement, 100% des souris devrait avoir de.......

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Discussion

Les étapes essentielles de cette procédure sont: abraser soigneusement le caecum sans provoquer la perforation, en plaçant des sutures dans la paroi latérale abdominale, et appliquer la bonne quantité d'amidon. Seulement appliquer du papier de verre pour le caecum, ou à une petite partie spécifique de l'intestin. Une large utilisation de papier de verre sur de grandes quantités de l'intestin grêle a tendance à provoquer un iléus significatif. Prenez soin d'abraser le caecum avec suffisamment de force que.......

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Déclarations de divulgation

Les auteurs déclarent qu'ils ont aucun intérêt financier concurrents.

Remerciements

MDP a été soutenue par l'American College of Surgeons (ACS) de bourses d'études de recherche des résidents. MSH a été soutenu par le California Institute for Regenerative Medicine (CIRM) Fellow clinique subvention de formation TG2-01159. MSH, HPL et MTL ont été pris en charge par la Société américaine des chirurgiens maxillo (ASMS) / maxillo chirurgiens Foundation (MSF) Attribution de subventions de recherche. HPL a été soutenu par le NIH subvention R01 GM087609 et un don de Ingrid Lai et Bill Shu en l'honneur d'Anthony Shu. HPL et MTL ont été pris en charge par le laboratoire Hagey for Pediatric médecine régénérative et la Fondation Oak. MTL a été so....

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Matériaux

Liste des matériaux utilisés dans cet article
NomEntrepriseNuméro de catalogueCommentaires
Sous-couches absorbantes Fisherbrand, 20 po x 24 poFisherScientific14-206-62
Champ stérile polydoublé, 18 po x 24 poJetables pour l’hôpital Busse696Découper un trou rectangulaire de la taille appropriée
Isothesia isofluraneHenry Schein  ;
Fisherbrand Tampon de gaze de coton stérile, 4 » x 4Fisher Scientific22-415-469
Pommade ophtalmique à la vaseline Puralube, tube de 1/8 ozDechra Veterinary ProductsNDC 17033-211-38
Crème dépilatoireNair Church & Dwight Co.22339-05
Buprenex buprénorphine  ; 0,3 mg/mlReckitt Benckiser Pharmaceuticals Inc.NDC 12496-0757-5
Seringue à insuline de 1 cc, 27  ; GBecton Dickinson329412
Povidone Solution de préparation à l’iodeMedlineMDS093944H
Webcol Tampons de préparation à l’alcoolCovidien6818
Ruban d’étiquetage Labarotory à usage généralVWR89097-912
Gants chirurgicaux BioGel PIMö ; lnlycke Health CareALA42675Z
Micro Pince à dentsRobozRS-5150
Ciseaux fins - tranchantsOutils de science fine14060-09
Pince dentelée droiteOutils de science fine11050-10
Tourne-aiguille Castro-ViejoOutils de science fine12565-14
Grain 100 1/4 feuille de papier de verreACE Quincaillerie1010446Couper en bandes
4-0 suture en soie, 30 », aiguille SHEthiconK831
7-0 PDS II suture monofilament résorbable, 30 », aiguille BV-1EthiconZ135Généralement livré à double bras. Coupez la suture à mi-chemin pour générer deux sutures utilisables.
Amidon de rizMP Biomedicals102955
0,9 % Chlorure de sodium IrrigationBaxterBHL2F7121Chaud à 37 ° ; C avant utilisation
Seringue de 10 mlBecton Dickinson309604
6-0 Suture tressée résorbable Vicryl, 18 », aiguille conique RB-1 EthiconJ212H
6-0 Ethilon monofilament de nylon, 18 », aiguille P-3, etc.Ethicon1698G
Tegaderm Film Transparent Dressing Frame Style, 6 cm x 7 cm3M1624WCoupé en deux dans le sens de la longueur
050033"

Références

  1. Ellis, H., et al. Adhesion-related hospital readmissions after abdominal and pelvic surgery: a retrospective cohort study. Lancet. 353 (9163), 1476-1480 (1999).
  2. Brochhausen, C., et al. Current strategies and fut....

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Réimpressions et autorisations

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