L'hémorragie incontrôlée, une cause importante de mortalité chez les patients traumatisés, peut être modélisée en utilisant une lacération standard du foie dans un modèle murin. Ce modèle entraîne une perte de sang constante, une survie et permet de tester des agents hémostatiques. Cet article fournit le processus étape par étape pour effectuer ce modèle précieux.
Un abonnement JoVE est requis pour visualiser ce contenu. Connectez-vous ou commencez votre période d'essai gratuite.
Article de méthode
Choc hémorrhagique incontrôlable modélisé par la lacération du foie chez les souris avec une surveillance hémodynamique en temps réel
Dans cet article
Résumé
Résumé
L'hémorragie incontrôlée est une cause importante de décès évitables chez les patients traumatisés. Nous avons développé un modèle murin d'hémorragie incontrôlée par une lacération du foie qui entraîne une perte de sang constante, des altérations hémodynamiques et une survie.
Les souris subissent une résection standardisée du lobe central gauche du foie. Ils sont autorisés à saigner sans intervention mécanique. Les agents hémostatiques peuvent être administrés comme traitement de prétraitement ou de sauvetage en fonction de l'intérêt de l'investigateur. Pendant le temps de l'hémorragie, on effectue une surveillance hémodynamique en temps réel via une ligne artérielle fémorale gauche. Les souris sont ensuite sacrifiées, la perte de sang est quantifiée, le sang est collecté pour une analyse plus approfondie et les organes sont récoltés pour l'analyse des blessures. La conception expérimentale est décrite pour permettre le test simultané de multiples animaux.
L'hémorragie du foie comme modèle d'hémorragie incontrôlée existe iDans la littérature, principalement dans les modèles de rat et de porc. Certains de ces modèles utilisent la surveillance hémodynamique ou quantifier la perte de sang, mais ils manquent de cohérence. Le modèle actuel comprend la quantification de la perte de sang, la surveillance hémodynamique en temps réel dans un modèle murin qui offre l'avantage d'utiliser des lignes transgéniques et un mécanisme à haut débit pour enquêter davantage sur les mécanismes physiopathologiques de l'hémorragie incontrôlée.
Introduction
Le traumatisme est la principale cause de décès et d'incapacité chez les jeunes du monde entier. 1 L' hémorragie non contrôlée reste la principale cause de mortalité chez les patients traumatisés gravement blessés. 2 La prise en charge du traumatisme hémorragique est double: le contrôle des saignements chirurgicaux et la réanimation et le remplacement du sang perdu.
Les modèles animaux de choc hémorragique ont été la pierre angulaire de la recherche sur les traumatismes et peuvent être utilisés dans l'évaluation de la pathophysiologie et du traitement du choc traumatique / hémorr....
Accès restreint. Veuillez vous connecter ou commencer un essai pour afficher ce contenu.
Protocole
Les souris ont été logées conformément aux directives de soins aux animaux de l'Université de Pittsburgh (Pittsburgh, PA, États-Unis) et aux Instituts nationaux de santé (NIH, Bethesda, MD, États-Unis) dans des conditions spécifiques sans pathogène avec 12 h de cycles lumière-obscurité et accès gratuit à Alimentation standard et eau. Toutes les expériences sur les animaux ont été approuvées et menées conformément aux lignes directrices énoncées par le comité de recherche et de soins des animaux de l'Université de Pittsburgh.
1. Champ chirurgical et configuration de l'instrument
- Stérilisez tous les instrument....
Accès restreint. Veuillez vous connecter ou commencer un essai pour afficher ce contenu.
Résultats
Le modèle de laceration du foie entraîne une perte sanguine reproductible et constante chez la souris. La figure 1A démontre le poids constant du foie lacéré qui peut être obtenu avec un écart type de seulement 0,02 g. Cette consistance dans le poids du foie lacéré permet de reproduire le modèle entre les souris et dans différentes configurations expérimentales telles que différents protocoles de réanimation. De plus, le poids reproductible du foie lacéré, avec une erreu.......
Accès restreint. Veuillez vous connecter ou commencer un essai pour afficher ce contenu.
Discussion
Le modèle de laceration du foie murin décrit ici fournit un modèle fiable et cohérent d'hémorragie incontrôlée. Ce modèle est simple à réaliser, mais il y a des étapes importantes qui nécessitent une considération méticuleuse. La partie la plus techniquement difficile du modèle est la canulation des vaisseaux fémoraux pour la surveillance hémodynamique et l'administration de fluide / médicament. Des précautions doivent être prises lors de la dissection du nerf et de l'artériotomie / venotomie. Il est importa.......
Accès restreint. Veuillez vous connecter ou commencer un essai pour afficher ce contenu.
Déclarations de divulgation
Les auteurs n'ont pas d'intérêt financier à déclarer.
Remerciements
Le travail de ce manuscrit a été soutenu par le financement du Dr Neal par le programme pilote de l'Institut de médecine vasculaire en hémostase et biologie vasculaire (P3HVB) et la bourse de recherche AAST. Ce travail est soutenu par les subventions américaines des instituts nationaux de santé 1 R35 GM119526-01 et UM1HL120877-01.
....Accès restreint. Veuillez vous connecter ou commencer un essai pour afficher ce contenu.
Matériaux
| Nom | Entreprise | Numéro de catalogue | Commentaires |
|---|---|---|---|
| SS/45 dumonts | Fine Science Tools | 11203-25 | |
| ciseaux chirurgicaux | Outils de sciences fines | 14068-12 | |
| hémostatiques | Outils de sciences fines | 13009-12 | |
| Microciseaux | Outils de sciences fines | 15000-08 | |
| Pince incurvée de 0,8 mm | Outils de sciences fines | 11009-13 | |
| bobine de suture 6-0 | Fine Science Tools | 18020-60 | |
| suture 4-0 soie avec aiguille | Owens Minor | K188H | |
| gaze 4 x 4 | peut être acheté auprès de n’importe quel fournisseur | ||
| applicateur à pointe de coton | peut être acheté auprès de n’importe quel fournisseur | ||
| L’aiguille 30 G | peut être achetée auprès de n’importe quel fournisseur | ||
| Aiguille | 23 Gpeut être acheté auprès de n’importe quel fournisseur | ||
| seringue de 10 cc | peut être achetée auprès de n’importe quel fournisseur | ||
| tube conique de 50 cc | peut être acheté auprès de n’importe quel fournisseur | ||
| Seringue de 1 cc avec aiguille 25G | Fisher Scientific | 14-826-88 | |
| Polyéthylène 10 tube 100' (PE-10) | Fisher Scientific | 14-170-12P | |
| Tube en polyéthylène 50 100'(PE-50) | Fisher Scientific | 14-170-12B | |
| Robinet d’arrêt 3 voies | Fisher Scientific | NC9779127 | |
| coussin chirurgical bleu | Fisher Scientific | 50-7105 | |
| Pansements de terrain stériles | Fisher Scientific | NC9517505 | |
| rouleaux de ruban 1" | Corporate Express | MMM26001 | |
| bocaux à large ouverture VWR | 159000-058 | ||
| plateau en acier inoxydable 8 » x 11" | VWR | 62687-049 | |
| mâle-mâle leur serrure 3 voies | VWR | 20068-909 | |
| poche de stérilisation 3 » x 8 | VWR | 24008 | |
| poche de stérilisation 5 » x 10" | VWR | 24010 | |
| triangles d’absorption | Fine Science Tools | 18105-03 | |
| Applicateur de pince de plaie de 7 mm | Fisher Scientific | E0522687 | |
| 1 000 Pinces de plaie de 7 mm | Fisher Scientific | E0522687 | |
| bétadine (4 oz) | peut être acheté auprès de n’importe quel fournisseur | ||
| gants stériles | peuvent être achetés auprès de n’importe quel fournisseur | ||
| eppendorfs ; | peut être acheté auprès de n’importe quel fournisseur | ||
| Seringue d’insuline 1/2 cc Lo-Dose | Scientific | 12-826-79 | |
| petit bateau de pesée | peut être acheté auprès de n’importe quel fournisseur | ||
| Les bagues lactées | peuvent être achetées auprès de n’importe quel fournisseur | ||
| saline hépranisée (.1 & microL ; hep + 9.9 & microL ; NaCl) | peut être acheté auprès de n’importe quel fournisseur | ||
| solution saline tamponnée au phosphate | Peut être acheté auprès de n’importe quel fournisseur | ||
| Pentobarbital ; | peut être acheté auprès de n’importe quel fournisseur | ||
| Microscope Wild M650 avec support de perche | Analyseur Leica | ||
| Digi-Med BPA-400 et intégrateur de systèmes | Micro-Med | SYS-400 | |
| TXD-310 (transducteur Digi-Med) ; | Micro-Med | TXD-300 | |
| Ordinateur | Stérilisateur d’instrument de | ||
| VWR | 11156-002 | ||
| Tondeuse Oster A5 avec lame de taille 40 | VWR | 10749-020 | |
| coussin chauffant de circulation 18 x 26 | Harvard | py872-5272 | |
| Thermomètre rectal | Kent Scientific | RET-3 |
Références
- Chang, R., Cardenas, J. C., Wade, C. E., Holcomb, J. B. Advances in the understanding of trauma-induced coagulopathy. Blood. 128 (8), 1043-1049 (2016).
- Kutcher, M. E., et al. A paradigm shift in trauma resuscitation: evaluation of evolving massive transfusion practices. JAMA surgery. 148 (9), 834-840 (2013).
- Tsukamoto,....
Accès restreint. Veuillez vous connecter ou commencer un essai pour afficher ce contenu.
Réimpressions et autorisations
