Ce manuscrit décrit la nouvelle configuration et consignes d’utilisation de la microscopie photoacoustique et système de double-modalité tomographie par cohérence optique pour l’imagerie non invasive et sans étiquette Chorio-rétinienne de grands animaux, tels que les lapins.
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Article de méthode
Roman la microscopie photoacoustique et tomographie par cohérence optique Dual-modalité Chorio-rétinienne imagerie dans les yeux de lapin vivant
Dans cet article
Résumé
Résumé
Photoacoustique imagerie oculaire est une émergence ophtalmique technologie qui peut visualiser une façon non envahissante de tissus oculaires en convertissant l’énergie lumineuse en ondes sonores et est actuellement à l’étude intensive de l’image. Cependant, les plus signalés à ce jour se concentre sur l’imagerie du segment postérieur des yeux des petits animaux, comme les rats et les souris, qui pose des défis pour la traduction humaine clinique en raison des tailles petit globe oculaire. Ce manuscrit décrit une microscopie photoacoustique roman (PAM) et le système de double-modalité de tomographie par cohérence optique pour l’imagerie du segment postérieur des yeux des grands animaux, tels que des lapins. La configuration du système, alignement du système, préparation animaux et dual-modalité protocoles expérimentaux pour in vivo, non invasive et sans étiquette Chorio-rétinienne d’imagerie chez les lapins sont détaillées. L’efficacité de la méthode est démontrée par les résultats expérimentaux représentatifs, dont la vascularisation rétinienne et choroïdienne obtenue par le PAM et les PTOM. Ce manuscrit fournit un guide pratique pour reproduire les résultats de l’imagerie chez le lapin et l’avancement photoacoustique imagerie oculaire chez les animaux plus gros.
Introduction
Ces dernières décennies ont vu le développement explosif du champ de photoacoustique biomedical imagerie1,2,3,4,5,6,7 ,,8. Basé sur la conversion de l’énergie de la lumière en son, l’imagerie photoacoustique émergents peuvent visualiser des échantillons biologiques à échelles des organelles, cellules, tissus, organes de petits animaux tout le corps et peut révéler sa anatomiques, fonctionnelles, moléculaires, génétiques, et information métabolique1,2,9,10,11,12. L’imagerie photoacoustique a trouvé des applications dans une gamme de domaines biomédicaux, comme cell biology13,14, biologie vasculaire15,16, neurologie17,18 , oncologie19,20,21,22,23de la dermatologie, pharmacologie24et hématologie25,26. Son application en ophtalmologie, c'est-à-dire photoacoustique oculaire imaging, a attiré des intérêts substantiels à la fois scientifiques et cliniciens et est actuellement à l’étude active.
Contrairement aux couramment utilisé oculaire d’imagerie technologies27, tels que l’angiographie à la fluorescéine (FA) et angiographie de vert d’indocyanine (ICGA) (basé sur le contraste de fluorescence), tomographie à cohérence optique (OCT) (basé sur le contraste de la dispersion des optiques) et ses dérivé angiographie OCT (basé sur le contraste de la motion des globules rouges), photoacoustique oculaire d’imagerie d’absorption optique utilise le mécanisme de contraste. Cela diffère des technologies d’imagerie oculaires classiques et offre un outil unique pour l’étude des propriétés d’absorption optique de le œil, qui sont généralement associées à l’État physiopathologique des tissus oculaires28. À ce jour, significative, excellent travail a été fait dans photoacoustique oculaire d’imagerie29,30,31,32,33,34,35, 36,37, mais ces études se concentrent sur le segment postérieur des yeux des petits animaux, comme les rats et les souris. Le pionnier dans l’étude bien démontre la faisabilité de l’imagerie photoacoustique en ophtalmologie, mais il y a encore un long chemin à parcourir vers la traduction clinique de la technologie depuis tailles de globe oculaire des rats et des souris sont beaucoup plus petits (moins d’un tiers) à celle de l’homme. En raison de la propagation des ondes ultrasoniques sur une beaucoup plus longues distances, signal intensité et qualité d’image peut grandement souffrir lorsque la technique est utilisée pour l’imagerie du segment postérieur de plus grands yeux.
Pour atteindre cet objectif, nous avons récemment rapporté les non invasive, imagerie exempte d’étiquette Chorio-rétinienne chez les lapins vivants à l’aide intégrée microscopie photoacoustique (PAM) et le domaine spectral OCT (SD-OCT)38. Le système a d’excellentes performances et peut visualiser la rétine et la choroïde des yeux des animaux plus gros absorption endogène et contrastes de diffusion des tissus oculaires. Chez les lapins, les résultats préliminaires montrent que la PAM pourrait distinguer non invasive de vaisseaux sanguins rétiniens et choroïdienne individuels à l’aide d’une dose d’exposition laser (80 ~ nJ) significativement inférieures à la limite de sécurité American National Standards Institute (ANSI) (160 nJ) à 570 nm39; et l’outil OPO pourrait résoudre clairement la sclérotique, la choroïde et différentes couches rétiniennes. C’est la toute première démonstration de l’imagerie du segment postérieur de plus grands animaux à l’aide du PAM et pourrait être une étape importante vers la traduction clinique de cette technologie étant donné que la taille du globe oculaire de lapins (18,1 mm)40 est près de 80 % de la longueur axiale de humains (23,9 mm).
Dans ce travail, nous fournir une description détaillée du système dual-modalité d’imagerie et des protocoles expérimentaux utilisés pour l’imagerie non invasive et sans étiquette Chorio-rétinienne chez les lapins vivants et démontrer les performances du système par le biais de rétine représentatif et résultats de l’imagerie choroïdienne.
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Protocole
Les lapins sont qu'un United States Department of Agriculture (USDA) a couvert les espèces. Son utilisation dans la recherche biomédicale doit suivre des règles strictes. Toutes les expériences de lapin ont été effectuées conformément à la déclaration de l’ARVO (The Association for Research in Vision and Ophthalmology) pour l’utilisation des animaux en ophtalmique et Vision Research, après l’approbation du protocole animal de laboratoire de l’Université Comité sur l’utilisation et aux soins des animaux (UCUCA) de l’Université du Michigan (protocole PRO00006486, Yannis Paulus PI).
1. configuration du système
- Microscopie photoacoustique (PAM)
- Utilisation d’un oscillateur paramétrique optique (OPO) laser pompé par un laser solide pompé par diode comme source lumineuse des spécifications techniques appropriées PAM. Select, tels que taux de répétition d’impulsion 1kHz, pouls Durée 3-6 ns et longueurs d’onde accordable 405-2600 nm.
- Réflexion du faisceau émane du laser à 570 nm par deux miroirs (M1 et M2), puis faire passer à travers un atténuateur de demi-onde plaque monté sur un filtre motorisé de platine de rotation et enfin mise au point et il collimater par un collimateur de faisceau (Figure 1). Optimiser la conception du collimateur de faisceau. Un exemple de configuration le collimateur faisceau comprend une lentille de focalisation L1 (longueur focale 250 mm), un trou d’épingle (diamètre 50 µm) et un collimateur L2 (longueur focale 30 mm).
- Diviser le faisceau collimaté par un séparateur de faisceau (BS1) avec un coefficient de fractionnement de 90/10 (réflexion/transmission). Enregistrer la partie transmise par une photodiode pour la surveillance de l’énergie pulse-pulse laser. Successivement dévier la partie réfléchie par un miroir (M3) et d’un miroir dichroïque (DM) et raster-scan à l’aide d’un galvanomètre à deux dimensions. Le galvanomètre est un composant partagé avec le domaine spectral (SD)-système d’OCT (décrit ci-dessous).
- Remettre le faisceau numérisé à travers un télescope composé d’une lentille de scan (longueur focale 36 mm) et une lentille ophtalmique (OL, focale 10 mm) et enfin le focus sur le fond de l’oeil par l’optique oeil de lapin.
- Sélectionnez un transducteur ultrasonore en forme d’aiguille avec spécifications techniques appropriées, par exemple, la fréquence centrale 27 MHz, bidirectionnel −6 dB bande passante 60 %. Placez-le au contact de la conjonctive hors l’axe visuel central pour capter le signal photoacoustique excité.
- Amplifier le signal à l’aide d’un amplificateur à ultrasons (par exemple, 57 dB de gain), il filtre par un filtre passe bas (par exemple, la fréquence de coupure 32 MHz) et il numériser par un numériseur haute vitesse à une fréquence d’échantillonnage de 200 MÉCH. / s.
- Place un wattmètre qui précède le lapin des yeux et mesure l’énergie d’impulsion laser sur la cornée de lapin pour le garder sous la sécurité ANSI limiter 160 nJ à 570 nm38. Bloquer le faisceau pour éviter une surexposition de laser à l’aide d’un obturateur de laser contrôlé à partir de Matlab par une électronique de synchronisation.
- Synchroniser le laser, le galvanomètre et le numériseur à travers une carte d’acquisition (DAQ) de données. Programmer le logiciel pour système contrôle et acquisition de données dans Matlab.
- Tomographie en cohérence optique spectral-domaine (SD-OCT)
- Adapter le système SD-OCT basé sur un système disponible dans le commerce en ajoutant une lentille ophtalmique (OL) après la lentille de scan (SL) et un morceau de verre de compensation de dispersion (DCG) dans le bras de référence (Figure 1). La modification permet que le système de l’OCT peut l’image du segment postérieur de l’oeil du lapin.
- Utiliser un tube de logement zoom pour ajuster la longueur du bras de référence afin d’assurer son match avec la longueur du trajet optique du bras de l’échantillon. Un iris permet de contrôler l’intensité de la lumière rétro-réfléchi de référence afin d’assurer son match avec intensité lumineuse éparpillés à l’arrière de le œil du lapin pour atteindre le contraste de l’image maximale.
- Utiliser une caméra de dispositif à couplage de charge (CCD) encapsulée dans la tête de balayage pour la visualisation en temps réel du fundus de lapin avec un éclairage diode électroluminescente (del comme source d’éclairage externe).
2. alignement du système
- Initialiser la position du galvanomètre et aligner le système OCT en ajustant les vis de la monture de collimateur de fibre et le cube de diviseur de faisceau.
Remarque : Les procédures détaillées sont disponibles dans le manuel du système OCT commercialement acquis et ne seront pas couverts ici. Cette étape est principalement d’assurer l’alignement correct du collimateur de la fibre, le bras de référence et l’objectif de balayage pour maximiser le rendement du système OCT. - Ajustez la position x, yet z de la sténopé autour de l’objet de la lentille de focalisation à filtrer dans l’espace le faisceau laser et transmettre au maximum l’énergie laser. Vérifiez la hauteur du faisceau laser avant et après le trou d’épingle à l’aide d’un outil de mesure de hauteur pour s’assurer qu’elles sont les mêmes.
- Ajuster les tilt, décentrer et la position z du collimateur L2 à collimater le faisceau filtré. Faire en sorte que le faisceau a environ de même taille et la hauteur observée dans le champ proche et le champ lointain.
- Coaxialement combiner le faisceau laser de PAM et le faisceau lumineux de l’OCT en syntonisant les inclinaisons du miroir et le SM. Après cette étape, PAM laser et lumière OCT devraient être entièrement coïncidentes et balayage des régions sur le œil du lapin sont les mêmes.
- Réglage de l’inclinaison et décentrer de la lentille de l’OL pour l’aligner correctement dans le chemin optique. Une fois cela fait, le système de double-modalité est prêt pour l’imagerie.
Remarque : Une pouvez utiliser la méthode auto-collimation pour y parvenir, c'est-à-dire vérifiant la lumière arrière-réfléchie par la surface des lentilles OL pour s’assurer qu’elle remonte le long de la même manière que la lumière incidente.
3. préparation lapin
- Prendre un lapin blanc de Nouvelle-Zélande de l’animalerie et enregistrer les informations individuelles, telles que numéro de l’organisme animal et de poids.
- Monter des plates-formes de lapin, y compris le soutien de l’organe et le support de tête sur la table optique sous le système d’imagerie. Mettre une couverture de chauffage à circulation d’eau sur le soutien de l’organe et régler la température de l’eau en circulation à 38 ° C, pour aider à maintenir la température du corps du lapin chaud pendant la durée de l’expérience et la récupération.
- Enregistrer les données vitales de procédure préalable, y compris l’État dans l’ensemble animal, couleur de la muqueuse, fréquence cardiaque, fréquence respiratoire et la température corporelle rectale. Anesthésier le lapin avec un mélange de kétamine (40 mg/kg) et de xylazine (5 mg/kg) par injection intramusculaire (IM) et enregistrer l’utilisation de la kétamine (substance réglementée de l’annexe III). Confirmer le niveau de l’anesthésie en vérifiant sa fréquence cardiaque, fréquence respiratoire et état général.
- Dilater les pupilles de lapin à l’aide d’une goutte de Tropicamide 1 ophtalmique et phényléphrine chlorhydrate 2,5 % ophtalmiques.
- Utiliser un spéculum pour tenir les paupières de la route et appliquez une goutte de lubrifiant oculaire afin d’humidifier la cornée. Instiller une goutte de tétracaïne topique 0,5 % dans le œil avant la procédure d’imagerie.
Remarque : Pour les plus longs des procédures ou avec un inconfort possible à l’animal, donner le lapin une injection sous-cutanée de meloxicam avant l’expérience pour assurer le confort animal.
4. l’imagerie SD-OCT
- Transférer le lapin à la plate-forme d’imagerie d’une caméra de fond de œil clinique et prendre 50 degrés des images du fond de œil, rouge gratuit et autofluorescence avant l’OPO session d’imagerie. Cela permet de vérifier la transparence optique de le œil et reconnaître la morphologie de navire du fundus et monuments, comme le nerf optique et le système vasculaire rétinien de rayons médullaires.
- Transférer le lapin dans la plate-forme du système OCT et ajuster sa posture pour positionner à peu près un des yeux sous le permis d’exploitation. Illuminer le œil à l’aide de la lumière LED.
Remarque : Pour faciliter la traduction clinique de la technique, aux yeux de lapin ne sont pas stabilisés à l’aide d’autres méthodes, et la tête de lapin est vient de mettre sur le support de tête sans aucune fixation. - Ouvrez le logiciel OCT et vérifiez d’abord l’image de la caméra CCD du fond de le œil. Finement, ajuster la hauteur et l’angle de l’appui tête si nécessaire pour assurer la région d’intérêt (ROIs), tels que choroïdienne navires et vaisseaux rétiniens, sont dans le champ de vision (FOV) de la caméra.
Remarque : Si le lapin est sous un niveau de bonne anesthésie, une séance d’imagerie séquentielle peut durer aussi longtemps que 10 min sans la nécessité d’un réajustement de la tête de lapin. - Dessiner une ligne droite pour représenter le OCT B-scan d’intérêt et lancer le balayage. Ajuster la longueur de bras de référence pour visualiser l’image de l’OCT et optimiser le facteur de compensation de dispersion dans le logiciel OCT pour obtenir les images les plus nettes.
Remarque : Lorsque vous ajustez la longueur de bras de référence, deux images OCT miroirs apparaîtra l’un après l’autre. La bonne image se distinguaient basée sur une connaissance préalable de l’anatomie de le œil. - Définir les paramètres d’acquisition de données, tels que le nombre de pixels et moyennes et enregistrer des images.
- Observer la fréquence respiratoire et la fréquence cardiaque du lapin pour estimer le niveau de l’anesthésie et l’animal confort. Pour les sessions plus longues, une dose d’un tiers de kétamine supplémentaire ou inhalation isoflurane sont envisageables avec l’intubation endotrachéale, un V-gel ou un masque facial pour maintenir le plan de l’anesthésie si nécessaire.
- Rincer la cornée de lapin avec douche oculaire toutes les 2 min pendant l’expérience pour prévenir la déshydratation de surface cornéenne et cornéen superficiel kératopathie épithéliale ponctuée. Vitals animaux surveiller et enregistrer toutes les 15 min.
5. PAM imagerie
- Porter des lunettes de protection laser approprié et allumer l’appareil de l’OPO.
- Lancez le logiciel de contrôle de PAM, régler la longueur d’onde du laser à l’un des pics d’absorption des chromophores ciblés (p. ex., 570 nm pour l’hémoglobine), initialiser la position du galvanomètre et énergie laser moniteur avant de la cornée de lapin afin d’assurer qu’elle est inférieure à la limite de sécurité ANSI.
- Monter le capteur ultrasonique sur une scène en trois dimensions (3D) traduction et positionner la pointe de la sonde au contact de la conjonctive de lapin pointant vers le fond de l’oeil. Utiliser une goutte de lubrifiant oculaire au meilleur couple de la conjonctive de pointe et le lapin du transducteur.
- Allumez l’éclairage LED et de visualiser le fundus lapin via le logiciel Matlab.
- Jeu le ROI balayage (vaisseaux rétiniens ou navires choroïdienne), y compris le centre et la taille physique. Ouvrir l’obturateur de laser et commencez à B-scan de la poutre. Par à peu près aligner le transducteur, on devrait pouvoir voir détection photoacoustique signal sur l’oscilloscope. Si ce n’est pas le cas, ajustez légèrement la position de le œil pour numériser une région différente de la cornée ou de passer à l’autre oeil et de répéter le processus ci-dessus.
- Observer la détection photoacoustique de signaux sur l’oscilloscope et de régler finement la position de la sonde afin de maximiser l’intensité du signal le long de l’ensemble B-scan.
Remarque : En raison de la largeur du faisceau limité, transducteur ultrasonique a généralement une petite FOV41. Cette étape détermine la modulation de l’arrière-plan des images finales de PAM. Désalignement conduira à des images de PAM avec arrière-plan hétérogène et dégrader la qualité d’image considérablement. - Définissez les paramètres d’acquisition de données. Cela inclut le nombre de pixels (e.g., 256 × 256 pixels), fréquence d’échantillonnage (e.g., 200 MÉCH. / s) et la durée du retard. Démarrer l’acquisition de données. Le logiciel Matlab ouvre automatiquement l’obturateur pour passer le faisceau laser, une fois lancée, fermer l’obturateur pour bloquer la poutre lorsque vous avez terminé pour éviter une surexposition de laser.
Remarque : Limité par le taux de répétition des impulsions (1 kHz) du laser, il faut environ 1 min pour terminer l’acquisition des données d’une image avec 256 × 256 pixels. - Traiter les données brutes et de visualiser l’image de PAM en deux dimensions (2D) grâce à l’intensité maximale de projection (MIP)13 ou en 3D par le biais de rendu volumique38.
- Démonter le capteur ultrasonique, rincer l’embout à l’aide de l’eau désionisée et remettre à l’étui de rangement.
- Transférer le lapin à la caméra du fundus et réexaminer le fond de l’oeil. Cette étape permet de vérifier s’il y a des changements morphologiques de le œil après la séance d’imagerie.
- Rincer la cornée de lapin avec douche oculaire toutes les deux minutes pendant l’expérience pour prévenir la kératopathie et déshydratation de surface cornéenne. Vitals animaux surveiller et enregistrer toutes les 15 min.
Remarque : Le PAM, OCT et le fond d’imagerie séances prennent environ 1 h.
6. imagerie post
- Après réexamen du fond de œil à l’aide de la caméra de fond d’oeil, déconnecter le V-gel si connecté. Bien rincer l’oeil à l’aide de douche oculaire, appliquer flurbiprofen ophtalmique et néomycine et polymyxine B sulfate pommade ophtalmique de dexaméthasone et fermer le œil.
- Transférer le lapin avec la couverture de circulation d’eau dans une chambre de récupération. Protéger la zone de la lumière et attendez que le lapin se réveille naturellement. Durant cette période, surveiller les signes vitaux animal toutes les 15 min et conserver l’enregistrement et retourner un exemplaire à l’animalerie pour la tenue des dossiers.
- Une fois que le lapin se réveille et est actif, alerte et marche normalement, le transporter à l’animalerie. Si une expérience aiguë est prévue, euthanasier l’animal à l’aide de la solution de l’euthanasie (par exemple., Beuthanasia, 0,22 mL/kg, une injection intraveineuse dans la veine marginale oreille) et de disposer de la carcasse.
- Désactiver le logiciel et le laser. Nettoyer le banc optique.
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Résultats
Le système dual-modalité d’imagerie et le protocole expérimental ont été testés avec succès en laboratoire des auteurs à l’aide de quatre lapins néo-zélandais blancs. Ce qui suit présente quelques résultats représentatifs.
La figure 1 illustre le schéma du système d’imagerie double-modalité de PAM et SD-OCT. Il est composé des modules suivants : photoacoustique light source, atténuateur variable las...
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Discussion
Un film de larme intact et régulier est essentiel pour des images de haute qualité du fond de œil. Un cinéma de déchirure irrégulière et détériorés peut dégrader significativement image qualité42. Pour préserver l’intégrité du film lacrymal et empêcher la cornée kératopathie ponctuée superficielle, il est essentiel pour lubrifier la cornée à l’aide de douche oculaire très fréquemment, environ toutes les deux minutes. S’il n’y a aucune préoccupation au sujet de l’opacité de le œil, utiliser une lam...
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Déclarations de divulgation
Les auteurs n’ont rien à divulguer.
Remerciements
Ce travail a été soutenu par le généreux soutien de la 4K12EY022299 de l’Institut National d’oeil (PMJ), lutte pour Sight-International rétinienne Research Foundation FFS GIA16002 (PMJ), sans restriction soutien du ministère de la recherche pour prévenir la cécité et les Département d’ophtalmologie de l’Université du Michigan et Sciences de la vision. Ce travail a utilisé le Centre Core for Vision Research financé par P30 EY007003 du National Eye Institute.
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Matériaux
| Nom | Entreprise | Numéro de catalogue | Commentaires |
|---|---|---|---|
| Système d’imagerie à double modalité | |||
| OPO laser | Ekspla (Vilnius, Lituanie) | NT-242 | |
| Atténuateur de faisceau | Thorlabs, Inc. (Newton, NJ, USA) | AHWP10M-600 | |
| Platine de rotation motorisée | Thorlabs, Inc. (Newton, NJ, USA) | PRM1/MZ8 | |
| Contrôleur | de platine de rotation motoriséThorlabs, Inc. (Newton, NJ, États-Unis) | TDC001 | |
| Lentille de mise au point | Thorlabs, Inc. (Newton, NJ, États-Unis) | AC254-250-B | |
| Sténopé | Thorlabs, Inc. (Newton, NJ, États-Unis) | P50S | |
| Lentille collimative | Thorlabs, Inc. (Newton, NJ, États-Unis) | AC127-030-B | |
| Photodiode | Thorlabs, Inc. (Newton, NJ, États-Unis) | PDA36A ; | |
| Obturateur laser | Vincent Associates Inc. (Toronto, Canada) | LS6S2T0 | |
| Pilote d’obturateur laser | Vincent Associates Inc. (Toronto, Canada) | VCM-D1 | |
| Miroir dichroïque | Semrock, Inc. (Rochester, NY, États-Unis) | Di03-R785-t3-25× ; 36 | |
| Lentille de balayage | Thorlabs, Inc. (Newton, NJ, États-Unis) | OCT-LK3-BB | |
| Lentille ophtalmique | Thorlabs, Inc. (Newton, NJ, États-Unis) | AC080-010-B-ML | |
| Transducteur à ultrasons | Optosonic Inc. (Arcadia, CA, États-Unis) | personnalisé | |
| L3 Narda-MITEQ (Hauppauge, NY, États-Unis) | AU-1647 | ||
| filtre passe-bande | (Brooklyn, NY, États-Unis) | BLP-30+ | |
| Numériseur | DynamicSignals LLC (Lockport, IL, USA) | PX1500-4 ; | |
| Électronique de synchronisation | National Instruments Corporation (Austin, TX, États-Unis) | Module OCT USB-6353 | |
| Thorlabs, Inc. (Newton, NJ, États-Unis) | Ganymede-II-HR | ||
| Verre de compensation de dispersion | Thorlabs, Inc. (Newton, NJ, États-Unis) | LSM03DC | |
| Éclairage LED | Thorlabs, Inc. (Newton, NJ, États-Unis) | MCWHF2 ; | |
| Capteur de puissance | Thorlabs, Inc. (Newton, NJ, États-Unis) | S121C ; | |
| Interface de capteur de puissance | Thorlabs, Inc. (Newton, NJ, États-Unis) | PM100USB ; | |
| Outil de mesure de la hauteur ; | Thorlabs, Inc. (Newton, NJ, États-Unis) | Caméra de | |
| Topcon Corporation (Tokyo, Japon) ; | TRC 50EX | ||
| Matlab | MathWorks (Natick, MA, États-Unis) | Oscilloscope 2017a | |
| Teledyne LeCroy (Chestnut Ridge, NY, États-Unis) | WaveJet 354T | ||
| Expérimentation animale | |||
| Couverture de circulation d’eau | Stryker Corporation (Kalamazoo, MI, États-Unis) | TP-700 | |
| Chlorhydrate de kétamine injection | Par pharmaceutical, Inc. (Woodcliff Lake, NJ, USA) | Code NDC 42023-115-10 | |
| Chlorhydrate de xylazine | VetOne (Boise, ID, USA) | Code NDC 13985-704-10 | |
| Tropicamide ophtalmique | Akorn Pharmaceuticals Inc. (Lake Forest, IL, USA) | Code NDC 17478-102-12 | |
| Chlorhydrate de phényléphrine ophtalmique | Paragon BioTeck, Inc. (Portland, OR, USA) | Code NDC 42702-102-15 | |
| Lubrifiant pour les yeux | Hub Pharmaceuticals LLC (Rancho Cucamonga, CA, États-Unis) | Code NDC 17238-610-15 | |
| Douche oculaire | Altaire Pharmaceuticals, Inc. (Aquebogue, NY, USA) | Code NDC 59390-175-18 | |
| Solution ophtalmique de chlorhydrate de tétracaïne | Bausch & Lomb, Inc. (Rochester, NY, États-Unis) | Code NDC 24208-920-64 | |
| Flurbiprofène sodium solution ophtalmique | Bausch & Lomb, Inc. (Rochester, NY, États-Unis) | Code NDC 24208-314-25 | |
| Sulfates de néomycine et de polymyxine B et onguent ophtalmique à la dexaméthasone | Bausch & Lomb, Inc. (Rochester, NY, États-Unis) | Code NDC 24208-795-35 | |
| Injection de méloxicam | Henry Schein Inc. (Queens, NY, États-Unis) | Code NDC 11695-6925-1 |
Références
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