Un Test objectif et reproductible d’apprentissage olfactif et de la Discrimination chez les souris

Summary

Ici, nous formons la souris sur une tâche d’apprentissage associatif pour tester la discrimination à l’odeur. Ce protocole permet également d’études sur l’apprentissage induit par des changements structurels dans le cerveau.

Abstract

Olfaction est la modalité sensorielle prédominante chez la souris et l’influence de nombreux comportements importants, y compris la recherche de nourriture, détection de prédateurs, l’accouplement et parentalité. Important, les souris peuvent être formés à associer les nouvelles odeurs des réponses comportementales spécifiques pour donner un aperçu de la fonction de circuit olfactif. Ce protocole décrit en détail la procédure pour les souris de la formation sur une tâche d’apprentissage opérante Go/non-Go. Dans cette approche, les souris sont formés sur des centaines d’essais automatisés par jour pendant 2 à 4 semaines et peuvent ensuite être testés sur les nouveaux Go/non-Go odeur paires pour évaluer la discrimination olfactive, ou être utilisé pour les études sur la façon dont apprentissage odeur modifie la structure ou la fonction de l’olfactif circuit. En outre, le bulbe olfactif de la souris (OB) comporte l’intégration en cours des neurones adultes. Fait intéressant, apprentissage olfactif augmente la survie et des connexions synaptiques de ces neurones adultes. Par conséquent, ce protocole est cumulable avec d’autres techniques biochimiques, électrophysiologiques et d’imagerie, d’étudier les facteurs d’apprentissage et de l’activité dépendante qui médient la survie neuronale et la plasticité.

Introduction

La souris OB, où les informations d’odeur entre tout d’abord dans le système nerveux central (CNS), fournit un excellent modèle pour étudier les changements structurels dépendant de l’expérience. Circuity OB intègre continuellement neurones adulte d’une manière dépendante de l’activité. Précurseurs de l’adulte-né neurone divisent hors de progéniteurs qui bordent la zone sous-ventriculaire adjacente à la ventricules latéraux¹. Lors de la migration dans l’OB, ces précurseurs neurones survivent, différencient et intègrent en tant que cellules étoilées inhibitrices ou subissent l’apoptosis². Sélection pour le sort de la cell....

Protocol

Toutes les souris ont été utilisés en vertu d’un protocole approuvé par le Comité de l’emploi et de Baylor College of Medicine Institutional Animal Care conformément aux normes de NIH. Souris utilisées dans le présent protocole ont été toutes les souris adultes (> 6 semaines d’âge) sur C57BL6/j de fond et inclus des souris mâles et femelles. Après les tâches de formation/mise en scène, souris sont retournés à leur cage maison.

1. construction et règles générales d’utilisation opérant apprentissage Box (Figure 1B, C)

1. Assembler une chambre de souris avec le plancher de la chambre. Garder la zone de form....

Results

Une fois que les souris ont appris la tâche d’apprentissage olfactif, ils peuvent maintenant associer paires de nouvelles odeurs avec la récompense et la punition. Ces souris entraînées normalement commencent avec environ 50 % exactitude sur la tâche de Go/non-Go. Le pourcentage exact peut être tracé en bloc du procès comme une courbe d’apprentissage pour les paires de nouvelles odeurs (Figure 3A). Au sein de 10 essais de bloc, qui prennent l.......

Discussion

Le système olfactif rongeur fournit un modèle unique pour étudier la plasticité charge sensorielle. Nous présentons ici un paradigme d’apprentissage olfactif pour former des souris pour associer des paires odorant avec une récompense ou une punition. Grâce à cette tâche d’apprentissage, modifications du circuit en aval peuvent être étudiées dans des expériences subséquentes (électrophysiologie, in vivo l’imagerie neuronale, etc.). Une fois terminé, souris vont apprendre à effectuer une tâche indicé simp.......

Materials

List of materials used in this article

Name	Company	Catalog Number	Comments
Flacon en verre	Qorpak	GLC-01016
Tube en silicone	Thermo Scientific	86000030
18 aiguilles de calibre	1 BD	305196
1-Butanol	Sigma Aldrich	437603
Propionic Acid	Sigma Aldrich	402907
Chambre de souris	Med Associates	ENV-307W
Sol de la chambre	Med Associates	ENV-307W-GFW
Port d’eau	Med Associates	ENV-313W	Besoin de deux
stimulus d’odeur	Med Associates	ENV-275	Contient 2 vannes pour bloquer l’évacuation des odeurs  ;
Odor Port	Med Associates	ENV-375W-NPP
Interface USB	Med Associates	DIG-703A-USB
Ordinateur de bureau avec Windows 2000, XP, Vista ou 7
Débitmètre	VWR	97004-952
Logiciel comportemental	Med Associates	SOF-735	Ce logiciel, qui exécute chaque étape de la formation, a maintenant été remplacé par Med-PC V
Logiciel de transfert de données	Med Associates	SOF-731	Ce logiciel formate les données en Excel
Logiciel de formation	Med Associates	DIG-703A-USB	Ce logiciel est utilisé pour programmer chaque étape de formation
Vanne d’eau	Neptune Research	225P012-11	Cette vanne est utilisée pour contrôler la distribution d’eau. Besoin de deux
soupapes anti-odeurs	Neptune Research	360P012-42	Cette soupape est utilisée pour contrôler la livraison des odeurs. Besoin de deux