Modèle d'impact cortical contrôlé des dommages de cerveau de souris avec la transplantation thérapeutique des cellules neurales pluripotentes induites par l'homme de cellules souches

Orion Furmanski; Michael  D. Nieves; Martin L. Doughty

doi:10.3791/59561

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Article de méthode

Modèle d'impact cortical contrôlé des dommages de cerveau de souris avec la transplantation thérapeutique des cellules neurales pluripotentes induites par l'homme de cellules souches

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DOI :

10.3791/59561

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10 juillet 2019

Orion Furmanski¹^,² , Michael D. Nieves¹^,²^,³ , Martin L. Doughty¹^,²^,³

¹Center for Neuroscience and Regenerative Medicine, Uniformed Services University, ²Department of Anatomy, Physiology, and Genetics, Uniformed Services University, ³Graduate Program in Neuroscience, Uniformed Services University

Dans cet article

Résumé

Ce protocole démontre des méthodologies pour un modèle de souris des dommages traumatiques de cerveau de crâne ouvert et de la transplantation des cellules pluripotentes pluripotentes de cellules souches induites cultivées dans le site de blessure. Les essais comportementaux et histologiques des résultats de ces procédures sont également décrits en bref.

Résumé

Les lésions cérébrales traumatiques (ITC) sont l'une des principales causes de morbidité et de mortalité dans le monde. La pathologie de la maladie due à l'ITC progresse de l'insulte mécanique primaire aux processus secondaires de dommages, y compris l'apoptose et l'inflammation. La modélisation animale a été utile dans la recherche pour démêler les mécanismes de blessures et évaluer les thérapies neuroprotectrices potentielles. Ce protocole décrit le modèle d'impact cortical contrôlé (ICC) de TBI focal à tête ouverte. Plus précisément, des paramètres pour produire une blessure corticale unilatérale douce sont décrits. Les conséquences comportementales de l'ICC sont analysées à l'aide du test d'élimination du ruban adhésif de l'intégration sensorimotrice bilatérale. En ce qui concerne la thérapie expérimentale pour la pathologie de TBI, ce protocole illustre également un processus pour transplanter des cellules cultivées dans le cerveau. Les cultures de cellules neurales dérivées des cellules souches pluripotentes induites par l'homme (hiPSCs) ont été choisies pour leur potentiel pour montrer la restauration fonctionnelle supérieure dans les patients humains de TBI. La survie chronique des hiPSCs dans le tissu de cerveau de souris d'hôte est détectée utilisant un processus immunohistochemical modifié de DAB.

Introduction

Les lésions cérébrales traumatiques (ITT) sont un terme général dénonçant les lésions acquises au cerveau en raison de forces mécaniques indirectes (accélération/décélération ou contre-coup) de coups à la tête ou de dommages directs causés par des objets ou des ondes de souffle. TBI a été estimé à être la cause d'environ 9% des décès dans le monde et observé dans environ 50 millions de cas par an¹^,². Un rapport 2017 des Centers for Disease Control and Prevention a estimé qu'en 2013, il y avait un total de 2,8 millions de visites à l'hôpital et de décès dus à l'ITC aux États-Unis³. De no....