Nous présentons un protocole pour l’utilisation d’un système de perfusion sanguin ex vivo normotherme pour l’administration de produits thérapeutiques à une allogreffe cardiaque entière dans un modèle de transplantation cardiaque hétérotopique porcine.
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Article de méthode
Protocole de transplantation cardiaque hétérotopique porcine pour l’administration de produits thérapeutiques à une allogreffe cardiaque
Dans cet article
Résumé
Résumé
La transplantation cardiaque est le traitement de référence pour l’insuffisance cardiaque terminale. Cependant, il reste limité par le nombre de cœurs de donneurs disponibles et les complications telles que le dysfonctionnement primaire du greffon et le rejet du greffon. L’utilisation clinique récente d’un dispositif de perfusion ex vivo dans la transplantation cardiaque introduit une occasion unique de traiter les allogreffes cardiaques avec des interventions thérapeutiques pour améliorer la fonction et éviter les réponses délétères du receveur. L’établissement d’un modèle translationnel de gros animaux pour l’administration thérapeutique à l’ensemble de l’allogreffe est essentiel pour tester de nouvelles approches thérapeutiques en transplantation cardiaque. Le modèle de transplantation cardiaque hétérotopique porcine en position intraabdominale constitue un excellent modèle pour évaluer les effets de nouvelles interventions et l’immunopathologie du rejet du greffon. Ce modèle offre en outre une survie à long terme pour le porc, étant donné que le greffon n’est pas nécessaire pour maintenir la circulation du receveur. L’objectif de ce protocole est de fournir une approche reproductible et robuste pour obtenir l’administration ex vivo d’un traitement à l’ensemble de l’allogreffe cardiaque avant la transplantation et de fournir des détails techniques pour effectuer une greffe hétérotopique de survie du cœur perfusé ex vivo .
Introduction
L’insuffisance cardiaque est une maladie qui touche environ 6 millions d’adultes aux États-Unis et devrait atteindre 8 millions d’adultes d’ici 20301. La transplantation cardiaque est le traitement de référence pour l’insuffisance cardiaque en phase terminale. Cependant, il n’est pas sans limites et complications. Il reste limité par le nombre de cœurs de donneurs disponibles, le dysfonctionnement primaire du greffon, le rejet du cœur et les effets secondaires de l’immunosuppression à long terme2. Ces limitations sont particulièrement importantes chez les jeunes receveurs qui peuvent subir un échec de l’allogreffe et néc....
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Protocole
REMARQUE: Deux porcs femelles du Yucatan sont sélectionnés, l’un étant désigné comme donneur de greffe cardiaque et l’autre comme receveur. Il est recommandé de recommander les porcs âgés de 6 à 8 mois, pesant environ 30 kg et ayant des groupes sanguins compatibles. La figure 1 présente la vue d’ensemble du protocole. Le logement et les procédures de traitement des porcs sont effectués conformément aux directives du comité de soins et d’utilisation des animaux du Duke University Medical Center.
1. Préparation du dispositif de perfusion ex vivo
- Préparez le dispositif de pe....
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Résultats
Ce groupe a survécu avec succès à 9 porcs entre 5 et 35 jours en suivant le protocole présenté ici, selon la conception de l’étude. Sur les 10 porcs qui ont subi ce protocole, seulement 1 est mort prématurément de complications chirurgicales, ce qui donne un taux de survie de 90%. La figure 2 illustre un diagramme de la configuration d’un cœur hétérotopique transplanté en position intraabdominale chez un porc. Lors de la détermination du site d’anastomose de l’allogreffe, sélectionnez un sit.......
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Discussion
L’administration de traitements pendant la perfusion ex vivo en transplantation cardiaque offre une stratégie pour modifier l’allogreffe et potentiellement améliorer les résultats de la transplantation. Le protocole présenté ici intègre le stockage de perfusion sanguin ex vivo normotherme de pointe et offre un potentiel prometteur pour tester l’administration isolée de cellules, de gènes ou d’immunothérapies à l’allogreffe 11,12,13.
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Déclarations de divulgation
Paul Lezberg est employé par TransMedics, Inc. Carmelo Milano a reçu un don financier de TransMedics, Inc. pour financer des chirurgies de transplantation cardiaque hétérotopique. Michelle Mendiola Pla est soutenue par T32HL007101. Les autres auteurs n’ont aucun conflit d’intérêts à déclarer.
Remerciements
Nous tenons à remercier Duke Large Animal Surgical Core et Duke Perfusion Services pour leur aide au cours de ces procédures. Nous tenons également à remercier Paul Lezberg et TransMedics, Inc. pour leur soutien.
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Matériaux
| Nom | Entreprise | Numéro de catalogue | Commentaires |
|---|---|---|---|
| 0 Suture maxon bouclée | Covidien | GMM-341L | Utilisé pour fermer le fascia de l’incision de laparotomie |
| 0 Attaches en soie | Medtronic, Inc | S346 | |
| 18 G Angiocath | BD | 381144 | Utilisé pour désaérer le ventricule gauche du cœur du donneur après l’implantation |
| 20 Fr LV vent | Medtronic, Inc | 12002 | |
| 2-0 Sutures en soie | Ethicon, Inc. | SA11G | |
| 2-0 Cravates en soie | Ethicon, Inc. | SA65H | |
| 2-0 Suture en vicryl | Ethicon, Inc. | J259H | |
| 24 Fr canule veineuse | Medtronic, Inc | 68124 | |
| 3-0 Sutures Prolene | Ethicon, Inc. | 8522 | |
| 4-0 Suture monocryle | Ethicon, Inc. | Y469G | |
| 4-0 Sutures Prolene | Ethicon, Inc. | 8521 | |
| Tondeuse à poils d’animaux | Wahl | 8786-452 | |
| Pince aortique | V. Mueller | CH6201 | |
| Enrouleur de l’armée de terre | V. Mueller | SU3660 | |
| ATF 40, Cell saver set jetable | Fresenius Kabi | 9108494 | Insert de dispositif d’économie de cellules |
| Balfour enrouleur V | . Mueller | SU3042 | Utilisé comme écarteur de paroi abdominale |
| Sauveur de cellules C.A.T.S | Fresenius Kabi | ES0019 | Dispositif d’économie de cellules utilisé pour laver le sang d’un donneur |
| Défibrillateur cardiaque | Zoll | M Series | Défibrillateur |
| cardiaque Porte-aiguille Castro | V. Mueller | CH8589 | |
| CG4 Cartouches iStat | Abbott | 03P85-25 | Test POC |
| Cartouches CG8 iStat | Abbott | 03P88-25 | Dépistage POC Pince |
| DeBakey | V. Mueller | CH5902 | |
| Crayon jetable électrocautérisé | Covidien | E2450H | |
| Pince Gerald | V. Mueller | NL1451 | |
| Hemotherm 400CE Refroidisseur/Chauffage à double réservoir | Cincinnati Sub-Zero | 86022 | Refroidisseur de chauffage utilisé pour réguler la température de perfusion sur la perfusion ex vivo Appareil |
| iSTAT 1 | Abbott | 04P75-03 | Appareil de test POC |
| Pince Kocher | V. Mueller | SU2790 | |
| Grand applicateur de clips | Sklar | 50-4300 | |
| Grands clips | Teleflex | 4200 | |
| Grands gages souples | Covidien | 8886867901 | |
| Applicateur de clips moyens | Sklar | 50-4335 | |
| Clips moyens | Teleflex | 2200 | |
| Ciseaux Metzenbaum | V. Mueller | CH2006-001 | |
| N° 10 Lame | de scalpel Swann-Mortan | 301 | Utilisé pour l’incision cutanée |
| N° 11 Lame de scalpel | Kiato Plus | 18111 | Utilisé pour |
| l’incision vasculaire Dispositif OCS avec base | TransMedics, Inc. | Dispositif de perfusion ex vivo | |
| OCS jetable | TransMedics, Inc. | Insert de dispositif de perfusion ex vivo avec kits de perfusion | |
| Câble de stimulation | Remington Medical | FL-601-97 | |
| Cathéter de cardioplégie pédiatrique (4Fr) | Medtronic, Inc | 10218 | Utilisé pour administrer la cardioplégie à la racine aortique donneuse |
| Cathéter de Foley pédiatrique | Teleflex | RSH170003080 | Placé préopératoire pour décompresser la vessie du receveur |
| Ciseaux de Potts | V. Mueller | CH13038 | |
| Sac de pression x2 (1 000 mL) | Novaplus | V4010H | Utilisé pour administrer la cardioplégie à une pression réglée |
| Pince Satinsky | V. Mueller | CH7305 | Pince vasculaire utilisée pour créer des anastomoses entre le cœur du donneur et les vaisseaux receveurs |
| Ciseaux | Felco | FELCO 200A-50 | Utilisé pour effectuer la sternotomie |
| Petits serments | dursCovidien | 8886867701 | |
| Écarteur sternal | V. Mueller | CH6950-007 | |
| Fils de stimulation cardiaque temporaires | Ethicon, Inc. | TPW32 | |
| Stimulateur cardiaque temporaire à double chambre | Medtronic, Inc | 5388 | Dispositif de stimulation cardiaque |
| garrot | Medtronic, Inc | 79005 | Garrots de Rummel |
| Ruban ombilical | Covidien | 8886861903 | |
| Boucles vasculaires | Covidien | 31145686 |
Références
- Virani, S. S., et al. Heart disease and stroke statistics-2021 update: A report from the American Heart Association. Circulation. 143 (8), 254(2021).
- Stehlik, J., Kobashigawa, J., Hunt, S. A., Reichenspurner, H., Kirklin, J. K.
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Réimpressions et autorisations
