Méthode d’élevage à la main pour les ouistitis en bas âge

Résumé

Nous décrivons ici une méthode d’élevage à la main pour élever des bébés ouistitis dans un incubateur animal. Cette méthode augmente considérablement le taux de survie des bébés ouistitis, ce qui permet d’étudier le développement des bébés ouistitis ayant des antécédents génétiques similaires élevés dans différents environnements postnataux.

Résumé

Le ouistiti commun (Callithrix jacchus) est un petit singe du Nouveau Monde très social avec des taux de reproduction élevés, qui s’est avéré être un modèle de primate non humain convaincant pour la recherche biomédicale et neuroscientifique. Certaines femelles donnent naissance à des triplés ; Cependant, les parents ne peuvent pas tous les élever. Pour sauver ces nourrissons, nous avons mis au point une méthode d’élevage à la main pour élever les ouistitis nouveau-nés. Dans ce protocole, nous décrivons la formule de l’aliment, le moment de l’alimentation, la configuration de la température et de l’humidité, ainsi que l’adaptation des nourrissons élevés à la main à l’environnement de la colonie. Cette méthode d’élevage à la main augmente considérablement le taux de survie des bébés ouistitis (sans élevage à la main : 45 % ; avec élevage à la main : 86 %) et offre la possibilité d’étudier le développement des bébés ouistitis ayant des antécédents génétiques similaires élevés dans différents environnements postnatals. Comme la méthode est pratique et facile à utiliser, nous prévoyons qu’elle pourrait également être appliquée à d’autres laboratoires travaillant avec des ouistitis communs.

Introduction

Le ouistiti commun (Callithrix jacchus) est un petit singe arboricole du Nouveau Monde originaire d’Amérique du Sud et d’Amérique centrale. L’utilisation des ouistitis dans la recherche biomédicale a connu une croissance rapide au cours des dernières décennies en raison de plusieurs avantages clés des ouistitis par rapport aux autres primates non humains (PSN), notamment leur taille corporelle plus petite, leur manipulation et leur reproduction plus faciles en captivité, leur temps de gestation plus court, leur maturation sexuelle plus précoce et leur réduction des risques zoonotiques 1,2,3,4,5,6 . Le ouistiti commun a une structure cérébrale et une fonction cérébrale similaires à celles des humains et affiche un riche répertoire de vocalisations et un comportement hautement social avec des émotions riches. Il s’agit d’un modèle de PSN convaincant pour différents types d’études en neurosciences, telles que les études sur le traitement sensoriel 7,8,9,10,11,12,13,14, la communication vocale 15,16,17,18,19^, les modèles de lésions de la moelle épinière ²⁰,^21,22,23, la maladie de Parkinson 24,25,26,27,28 et les maladies liées à l’âge ²⁹. Comparé à d’autres PSN, le ouistiti commun a un taux de reproduction relativement élevé, ce qui est potentiellement utile pour la modification transgénique^30,31,32. Ce primate est également largement utilisé en pharmacologie, en angiographie et dans les études sur les agents pathogènes et le système immunitaire 33,34,35,36,37,38,39. Cependant, l’offre de ouistitis reste très limitée, notamment en Chine, et ne peut répondre aux besoins croissants de la recherche scientifique.

Dans les colonies de ouistitis, les animaux adultes sont nourris une ou deux fois par jour, et quelques institutions modifient le régime alimentaire des ouistitis juvéniles⁴⁰. Généralement, les ouistitis en bas âge s’agrippent fermement au corps du père ou des frères et sœurs aînés pour les soins quotidiens et sont remis à la mère plusieurs fois par jour pour le lait. Certaines femelles ouistitis donnent naissance à des triplés, et dans ce cas, un ou deux nourrissons ne peuvent pas survivre en raison d’un manque de lait ; De plus, certains parents ne s’occupent pas de leurs nourrissons parce qu’ils manquent d’expérience en soins infirmiers ou pour d’autres raisons inconnues. C’est une grosse perte pour de nombreux laboratoires. Quelques études ont rapporté des méthodes de gestion de la nutrition des ouistitis adultes en captivité 40,41,42 utilisant des aliments et des formules avec différentes compositions de macronutriments, de vitamines et de minéraux, ainsi que différents protocoles d’alimentation pour l’enrichissement (purée, gélifiée, purifiée ou en conserve)^2,41. Une étude antérieure a fait état d’une méthode d’élevage collaboratif pour les triplés de ouistitis⁴³, dans laquelle les soignants prennent un bébé par jour, le nourrissent à la main tout au long de la journée et l’échangent contre un autre des triplés le lendemain. Bien que cette méthode permette aux nourrissons d’avoir des soins parentaux, elle nécessite un soignant expérimenté pour saisir le nourrisson du corps des parents tous les jours et demande beaucoup de travail. Jusqu’à présent, aucune étude n’a fait état d’une méthode détaillée d’élevage à la main, étape par étape, pour les ouistitis nouveau-nés.

L’objectif de la présente étude est de fournir une méthode d’élevage manuel pour ceux qui s’intéressent au développement des ouistitis, mais qui disposent de ressources limitées. Contrairement à l’ancienne méthode d’élevage collaboratif⁴³, la méthode actuelle est une alternative qui perturbe moins la famille de l’enfant et qui est facile à apprendre. Sur la base des règles de base de l’allaitement maternel et de 5 ans de pratique, cet article décrit une méthode d’élevage manuel pour l’élevage des ouistitis qui comprend la préparation de la nourriture, un calendrier d’alimentation, la configuration de la température et de l’humidité de l’incubateur animal, ainsi que l’adaptation des bébés animaux à l’environnement de la colonie.

Protocole

Toutes les procédures expérimentales ont été approuvées par le Comité d’utilisation et de soins aux animaux de l’Université du Zhejiang et ont suivi les directives des National Institutes of Health (NIH).

1. Logement et élevage⁴⁴

1. Réglez la pièce de la colonie avec un cycle jour/nuit de 12 h :12 h, la température à 26-28 °C et l’humidité relative à 45 %-55 %.
2. Couplez les ouistitis mâles et femelles âgés de 2 à 6 ans et maintenez-les dans des cages (850 mm x 800 mm x 800 mm) avec suffisamment d’espace et d’air frais avec un système de ventilation 24 heures sur 24.
3. Prévoyez des planches de repos, des balançoires, des perchoirs et des hamacs dans les cages.
4. Nourrissez le couple de ouistitis avec de l’eau fraîche et 30 à 40 g de nourriture deux fois par jour, y compris des céréales, des œufs, des patates douces, du miel, des fruits, des légumes et des vers de farine.
   REMARQUE : Les vétérinaires et les expérimentateurs doivent inspecter l’animalerie au moins une fois par jour pour s’assurer que toute personne malade est diagnostiquée et traitée immédiatement.

2. Préparation avant la naissance des bébés ouistitis

1. Soins pour les ouistitis gestantes
   REMARQUE : Le moment de la conception a été diagnostiqué par palpation (généralement 10 à 20 jours après le début de la période embryonnaire), et nous nous sommes également référés à l’histoire de la reproduction des sujets animaux.
   1. Fournir un espace plus grand et un minimum de perturbation humaine pour les couples reproducteurs.
   2. Nourrissez les couples reproducteurs avec des aliments supplémentaires tels que des vers de farine, des œufs, du yaourt et des fruits secs pour garantir la nutrition des femelles.
   3. Prenez soin des ouistitis gestantes et vérifiez-les fréquemment pour les préparer à leur parturition.
      NOTE : La période de gestation du ouistiti est estimée à 148 jours ± 4,3 jours⁴⁵.
2. Préparez les articles suivants : une couveuse pour animaux (855 mm [L] x 470 mm [L] x 440 mm [H]), des serviettes jetables (tailles M/L), des lingettes pour bébés, des jouets en peluche (figure 1A), des rouleaux jouets (figure 1B), des cadres d’escalade (figure 1B), des couvertures (10 cm х 10 cm, figure 1C) et une balance électronique (précision de 0,2 g, figure 1F).
   REMARQUE : Pour éviter que les animaux ne pendent, les jouets en peluche ne doivent pas avoir de structures en boucle.
3. Préparation d’aliments et d’appareils d’alimentation
   1. Préparez les articles suivants : lait maternisé (pour les enfants de 0 à 12 mois), pâte de riz pour bébé (pour les enfants de 0 à 6 mois), bouilloire électrique, bécher (100 ml), coussin chauffant, plat de pesée en plastique (80 mm x 80 mm x 22 mm, figure 1D), tubes à centrifuger stériles (50 ml), seringues stériles jetables (1 à 5 ml), injecteurs intraveineux (pour tétines d’alimentation sur mesure) (figure 1E), et des écouvillons (80-100 cm).
      REMARQUE : Pour fabriquer une tétine pour l’alimentation, une incision est faite à 1 cm de l’extrémité d’un injecteur intraveineux attaché à une seringue (Figure 1E).
4. Préparation du formulaire d’enregistrement
   1. Préparez un formulaire, généralement de plusieurs pages, pour chaque bébé ouistiti afin d’y consigner des informations de base telles que le nom, la date de naissance, le poids à la naissance, les parents, d’autres informations de base d’intérêt telles que la circonférence de la tête et la longueur de la queue, des informations sur la reproduction telles que la date et l’heure de reproduction, la quantité (mL) de la prise alimentaire, l’état de défécation (oui/non, dur/lâche), ainsi que la température et l’humidité de l’incubateur.
      REMARQUE : Habituellement, le poids corporel est mesuré et enregistré deux fois par jour, une fois avant le premier repas et une fois avant le dernier repas.

Figure 1 : Photos des articles dans l’incubateur et des outils et accessoires d’alimentation. a) Jouets en peluche ; (B) les portiques à rouleaux et les structures d’escalade jouets ; (C) couverture ; (D) plat de pesée en plastique ; (E) injecteur intraveineux et seringue muni d’une tétine d’alimentation sur mesure ; (F) balance électronique ; (G) soignant avec équipement de protection individuelle. Veuillez cliquer ici pour voir une version agrandie de cette figure.

3. Procédure d’élevage à la main

1. Nettoyez et stérilisez la pièce avant la date d’échéance.
   1. Vaporisez de l’acide hypochloreux ou de l’alcool éthylique à 75 % sur le sol et la table, laissez agir pendant 30 s, puis essuyez la table et passez la serpillière.
2. Réglez la température de l’incubateur à 35 °C et l’humidité à 40 %. Habituellement, pour simuler la température de base requise par les bébés ouistitis, comme le montre le tableau 1 , avant le jour postnatal 14 (P14), maintenir la température de l’incubateur à 35 °C, et à partir de P15, baisser la température de 0,5 °C tous les 3 jours. Maintenez l’humidité à 40 % à 45 % à l’intérieur de l’incubateur, qui est proche de l’humidité de la colonie et garde la fourrure des nourrissons au sec.
3. Carrelez un tampon à couches jetable pour couvrir le châssis de l’incubateur.
4. Pour minimiser le stress des nourrissons, mettez quelques couvertures et peluches dans l’incubateur avant d’introduire les bébés ouistitis, qui ont tendance à imiter les ouistitis adultes.
   REMARQUE : Les couvertures et les peluches sont placées dans la cage d’accueil des couples reproducteurs pendant 1 jour avant utilisation.
5. Mettez les bébés ouistitis dans l’incubateur et placez-les sur les peluches une fois qu’ils sont séparés de leurs parents dans la cage de la maison.
   REMARQUE : Pour éviter l’isolement social et en accord avec le bien-être des animaux, généralement, deux nourrissons sont choisis ensemble pour l’éducation à la main.
   1. Portez un équipement de protection individuelle (EPI, figure 1G) stérilisé avant de l’alimenter.
   2. Réchauffez quelques couvertures à 35 °C.
   3. Tenez doucement le bébé ouistiti avec des couvertures chaudes et obtenez le poids de l’animal comme poids de naissance.
   4. Transférez le bébé ouistiti dans l’incubateur avec des couvertures chaudes.
   5. Prenez des enregistrements, comme mentionné à l’étape 2.4.
6. Mélangez les ingrédients alimentaires et nourrissez le bébé ouistiti.
   1. Dissoudre 5 g de lait maternisé dans 30 mL d’eau bouillie à 50 °C dans un tube à centrifuger stérile de 50 mL.
      REMARQUE : Les ouistitis infantiles à différents âges postnataux ont besoin de recettes alimentaires différentes. Le tableau 2 comprend les différentes doses de lait maternisé, de pâte de riz et d’eau aux âges postnataux de P1 à P60. La posologie est généralement suffisante pour 1 jour. Mixez les ingrédients avant le premier repas et conservez le reste des aliments dans un réfrigérateur à 4 °C. Chauffez les aliments à 30-35 °C pour chaque repas.
   2. Prenez 1 mL de nourriture avec une seringue de 1 mL et couvrez la seringue avec une tétine d’alimentation faite sur mesure.
      REMARQUE : Sélectionnez une seringue de la bonne taille, en vous référant au tableau 2.
   3. Maintenez la température des aliments à 30-35 °C avec le coussin chauffant.
   4. Réchauffez les mains avant de le nourrir et tenez doucement le bébé ouistiti avec une couverture chaude dans une main dans l’incubateur.
   5. Placez la tétine d’alimentation dans la bouche du bébé ouistiti pendant que la tête du bébé ouistiti est doucement tenue avec le pouce et l’index de la main qui tient le soignant, et poussez lentement la nourriture hors de la seringue à une vitesse constante.
      REMARQUE : Ne poussez jamais la nourriture plus vite que le bébé ouistiti n’avale. Pousser vite peut provoquer un étouffement, avec de la nourriture sortant du nez par la gorge. Cela peut provoquer des maladies telles que la pneumonie, qui peut même entraîner la mort. Si la nourriture déborde, le bébé ouistiti aura du mal. Chaque fois que cela se produit, arrêtez de nourrir et essuyez soigneusement la nourriture du visage de l’animal. Continuez à vous nourrir une fois que le ouistiti a commencé à se comporter normalement.
7. Une fois que le bébé ouistiti a consommé une quantité appropriée de nourriture, essuyez son anus avec un coton-tige avec de l’eau tiède, ce qui nettoie l’anus et favorise la défécation.
8. Observez l’animal pendant quelques minutes et vérifiez la locomotion et la défécation de l’animal.
9. Notez l’heure d’alimentation, la quantité (mL) de nourriture ingérée, l’état de défécation (oui/non, dur/lâche) ainsi que la température et l’humidité de l’incubateur.
   REMARQUE : Enveloppez le bébé ouistiti avec des couvertures chaudes pendant la pesée pour éviter que le bébé n’ait froid ou ne se blesse.
10. Gardez le châssis de l’incubateur propre en ramassant les matières fécales solides ou en passant à un nouveau tampon à couches jetable.
11. Avant P50, nourrissez les bébés ouistitis en suivant les étapes 3.3 à 3.7 et utilisez la dose d’ingrédients alimentaires ainsi que la durée et la fréquence d’alimentation indiquées dans le tableau 2.
12. À partir de P50, le bébé ouistiti est généralement prêt à être mangé volontairement.
    1. Utilisez des boîtes de pesée en plastique au lieu de seringues. Préparez les aliments en mélangeant les ingrédients alimentaires directement dans le plat ; se reporter au tableau 2 pour connaître les montants.
    2. Mettez le plat de nourriture dans l’incubateur et fixez le fond au cas où il serait retourné. Observez pendant quelques minutes pour vous assurer que les bébés ouistitis mangent la nourriture. Pour les premières fois, guidez l’animal pour qu’il mange volontairement en l’attirant vers le plat de nourriture et en guidant sa bouche pour qu’elle touche la nourriture plusieurs fois.
       REMARQUE : Ne laissez jamais le nez de l’animal toucher la nourriture. Habituellement, l’animal apprend à manger volontairement en 1 jour.

4. Acclimatation avant le retour des bébés ouistitis à la colonie

REMARQUE : Habituellement, l’élevage à la main est terminé lorsque les bébés ouistitis apprennent à manger par eux-mêmes. Il y a quelques procédures d’adaptation à effectuer avant qu’ils ne soient ramenés dans la cage d’origine de la colonie de ouistitis.

1. Déplacez les ouistitis de l’incubateur de l’animal vers de petites cages (45 cm x 45 cm x 40 cm), qui ressemblent à une cage à oiseaux. Accrochez une bouteille d’eau (50 ml) sur chaque petite cage.
2. Transférez les petites cages avec les bébés ouistitis à la colonie et placez-les près de la cage familiale.
3. Nourrissez les bébés ouistitis séparément avec un plat de pesée en plastique pendant 1 semaine, en mélangeant la nourriture selon les recettes quotidiennes préparées pour toute la colonie.
4. Enregistrez le poids corporel et l’état de défécation une fois par jour.

5. Retour des bébés ouistitis dans la cage familiale

REMARQUE : Après avoir vécu dans la petite cage pendant 7 à 10 jours, les bébés ouistitis s’adaptent généralement bien à l’environnement de la colonie et ne présentent plus d’anxiété.

1. Remettez les bébés ouistitis dans la cage familiale le matin.
2. Observez les animaux pendant au moins 15 minutes pour vous assurer qu’il n’y a pas de morsures, de combats ou de poursuites entre les membres de la famille et les nouveaux arrivants.
   REMARQUE : Si vous mordez, vous battez ou vous poursuivez, séparez le bébé des autres dès que possible ; et essayez de rendre l’enfant à sa famille une fois de plus un autre jour. Si l’échec se reproduit, choisissez une autre famille pour l’accueillir. Les groupes familiaux qui ont une riche expérience parentale sont le premier choix pour le placement en famille d’accueil. Mettez une peluche dans une nouvelle cage pour accompagner le bébé singe si aucune famille ne l’accepte.
3. Arrêtez de nourrir les bébés ouistitis séparément et commencez à les nourrir en utilisant le régime alimentaire de la colonie.
4. Portez une attention particulière à l’activité des bébés ouistitis pendant 1 semaine après leur retour dans la cage familiale.
5. Mesurez le poids corporel des bébés ouistitis tous les 2 jours et notez-les. S’ils perdent du poids, donnez-leur des aliments nutritifs supplémentaires à l’aide d’une seringue dans la cage familiale.
6. Assurer des soins quotidiens aux bébés ouistitis, comme aux ouistitis de la colonie.

Résultats

Le poids corporel est un indice clé du développement corporel de l’animal et est utilisé comme indicateur de l’état de santé des ouistitis dans ce protocole. Dans ce travail, le poids corporel des animaux élevés à la main augmentait progressivement avec l’âge (Figure 2A, n = 16), similaire au poids des nouveau-nés dans une étude antérieure⁴⁶. Afin de minimiser le dérangement des familles reproductrices de la colonie, nous n’avons pas pesé les bébés ouistitis de la col...

Discussion

Le ouistiti commun est un modèle de PSN très utile pour la recherche biomédicale et en neurosciences. Cependant, les ressources en ouistitis sont trop limitées pour répondre aux besoins en croissance rapide. Dans ce travail, nous avons développé une méthode d’élevage à la main qui non seulement augmente le taux de survie des bébés ouistitis, mais offre également la possibilité d’étudier leur développement postnatal. Cette méthode d’élevage à la main est pratique et facile à apprendre et est donc facilement applicable à d...

Matériaux

Liste des matériaux utilisés dans cet article

Nom	Entreprise	Numéro de catalogue	Commentaires
incubateur pour animaux	RCOM, Corée		MX - BL600N, 855 mm (L) x 470 mm (L) x 440 mm (H)
lait en poudre pour bébé	Meadjohnson, Amérique		convient aux enfants de 0 à 12 mois, norme exécutive - pâte
riz pour bébé	GB25596 HEINZ, Chine		convient aux enfants de 0 à 6 mois, norme exécutive - lingettes pour bébés GB10769
	puériculture, Chine		douce
bécher	ShuNiu, Chine		100 mL
couvertures	Grace, Chine		10 cm × ; 10 cm,
cadre d’escalade	WowWee, Chine		fermes et pas de petites structures circulaires
coussinets de couches jetables	Hi Health Pet, Chine		soit M ou L taille
Seringue stérile jetable	Cofoe, Chine		1 mL, 2,5 mL, 3 mL, 5 mL, 10 mL
balance électronique	YouSheng, Chine		plage de mesure de 0 à 6 000 g avec une précision de 0,2 g
injecteur intraveineux	HD, Chine		0,55 mm x 20 mm
bouilloire	FGA, Chine		bouilloire de maintien au chaud 1 500 mL
lactulose	BELCOL, Chine		pour résoudre la constipation
plat de pesée en plastique	SKSLAB, Chine		80 mm x 80 mm x 22 mm, utilisé comme bol
jouet en peluche	Lebiyou, Chine
poudre probiotique	G-Pet, Chine		pour réguler l’environnement gastro-intestinal
tube de centrifugeuse stérile	NEST, Chine		50 mL
écouvillon	OYEAH, Chine		80 - 100 mm
jouet rouleau	WowWee, Chine		ferme et pas de petites structures circulaires