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Article de méthode

Perfusion de lipopolysaccharides comme modèle de choc endotoxémique porcin

1.9K vues

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DOI :

10.3791/66039

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8 décembre 2023

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Dans cet article

Résumé

Nous fournissons un protocole pour un modèle expérimental de choc endotoxémique chez le porc par perfusion de lipopolysaccharide.

Résumé

La septicémie et le choc septique sont fréquemment rencontrés chez les patients traités dans les unités de soins intensifs (USI) et figurent parmi les principales causes de décès chez ces patients. Elle est causée par une réponse immunitaire déréglée à une infection. Même avec un traitement optimisé, les taux de mortalité restent élevés, ce qui rend nécessaire de mieux comprendre la physiopathologie et de nouvelles options de traitement. Le lipopolysaccharide (LPS) est un composant de la membrane cellulaire des bactéries à Gram négatif, qui sont souvent responsables d’infections provoquant une septicémie et un choc septique.

La gravité et la mortalité élevée de la septicémie et du choc septique rendent impossibles les études expérimentales standardisées chez l’homme. Ainsi, un modèle animal est nécessaire pour des études ultérieures. Le cochon est particulièrement bien adapté à cet effet car il ressemble beaucoup aux humains en anatomie, physiologie et taille.

Ce protocole fournit un modèle expérimental pour le choc endotoxémique chez les porcs par perfusion de LPS. Nous avons pu induire de manière fiable des changements fréquemment observés chez les patients en choc septique, notamment une instabilité hémodynamique, une insuffisance respiratoire et une acidose. Cela permettra aux chercheurs d’obtenir des informations précieuses sur cette condition très pertinente et d’évaluer de nouvelles approches thérapeutiques dans un cadre expérimental.

Introduction

La septicémie et le choc septique figurent parmi les principales causes de mortalité chez les patients recevant un traitement en soins intensifs 1,2,3. La septicémie survient lorsqu’une infection déclenche une réponse immunitaire déréglée entraînant une défaillance multiviscérale. Elle se caractérise par des symptômes potentiellement mortels, notamment une instabilité hémodynamique, une détresse respiratoire, une insuffisance hépatique et rénale, ainsi que des troubles cognitifs 4,5. Le choc septique représente un sou....

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Protocole

Les expériences de ce protocole ont été approuvées par le Comité national et institutionnel de protection des animaux (Landesuntersuchungsamt Rheinland-Pfalz, Coblence, Allemagne, TVA G21-1-080). Les expériences ont été menées conformément aux directives ARRIVE. Pour cette étude, six porcs mâles allemands Landrace en bonne santé âgés de 2 à 3 mois et pesant 30 à 35 kg ont été utilisés. La chronologie expérimentale est résumée à la figure 1. Les détails relatifs à tous les matériaux et instruments utilisés dans ce protocole sont énumérés dans le tableau des matériaux.

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Résultats

Pour cette étude, six porcs mâles en bonne santé âgés de 2 à 3 mois et pesant 30 à 35 kg ont été anesthésiés et ont reçu une perfusion de lipopolysaccharide (LPS) pour induit une endotoxémie. Pour déterminer la dose appropriée de LPS nécessaire pour induire systématiquement des symptômes de choc, les porcs ont reçu diverses doses d’induction de LPS allant de 100 μg kg-1 à 200 μg kg-1 sur une période de 30 minutes, suivies d’une dose d’entretien de 1/10 de la dose initiale par heure pour le reste de .......

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Discussion

Nous présentons un protocole d’induction d’endotoxémie expérimentale chez le porc par perfusion de LPS, visant à induire de manière fiable les changements couramment observés dans le sepsis et le choc septique. Plusieurs étapes critiques doivent être prises en compte dans ce protocole. Une sédation adéquate des porcs avant le transport est cruciale pour éviter l’élévation des taux de catécholamines induite par le stress, ce qui pourrait potentiellement compromettre les résultats. L’intubation des porcs peut poser des déf.......

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Déclarations de divulgation

Le dispositif NIRS a été fourni inconditionnellement par Medtronic PLC, États-Unis, à des fins de recherche expérimentale. Alexander Ziebart a reçu des frais de conférence de Medtronic PLC. Aucun des auteurs ne signale de conflits d’intérêts financiers ou autres. Le manuscrit a été relu et édité par ChatGPT® (Python Software, version : 24 mai 2023).

Remerciements

Les auteurs tiennent à remercier Dagmar Dirvonskis pour son excellent soutien technique.

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Matériaux

Liste des matériaux utilisés dans cet article
NomEntrepriseNuméro de catalogueCommentaires
Atracurium Hikma 50 mg/5mLHikma Pharma GmbH, Martinsried
Azaperone (Stresnil) 40 mg/mLLilly Deutschland GmbH, Bad Homburg, Allemagne
BD Discardit II Spritze 2, 5, 10, 20 mLBecton Dickinson S.A. Carretera, Mequinenza Fraga, Espagneseringue
BD Luer Connecta  ;Becton Dickinson Infusion Therapy, AB Helsingborg, Schweden3-way-stopcock
Curafix i.v. classicsLohmann & Rauscher International GmbH & Co. KG, Rengsdorf, Allemagnede rétention de canule
Datex Ohmeda S5GE Healthcare Finland Oy, Helsinki, Finlandemoniteur
Engströ ; m CarestationGE Heathcare, Madison USAventilateur
Fentanyl-Janssen 0,05 mg/mLJanssen-Cilag GmbH, Neussfentanyl
Fü ; hrungsstab, Durchmesser 4.3Rü ; schsonde endotrachéale
Incetomat-line 150 cmFresenius, Kabi Deutschland, GmbHperfuseur
Intrafix PrimelineB. Braun Melsungen AG, Melsungen, AllemagneLigne
Gaine d’introduction 5 Fr.TerumoHealthcare Introducteur artériel  ;
INVOSMedtronic, Dublin, Irlandespectrométrie
JOZA Einmal Nitril Untersuchungshandschuhe  ;JOZA, Mü ; nchen, Allemagnegants
Laryngoscope, 45.48.50, KL 2000Medicon Poignée
Littmann Classic III Stethoscope3M Deutschland GmbH, Neuss, Allemagnestéthoscope
LPS (E. coli ; Sérotype O111 :B4)Sigma-Aldrich, Suisse
MAC Two-Lumen Kit d’accès veineux centralArrow international inc. Reading, PA, USAintroducteur
Mdirected VlieskompresseMdirected GmbH, Neuenkirchen, AllemagneCompresse polaire pour fixer la langue
Masimo LNCS Adtx SpO2 sensorMasimo Corporation Irvine, Ca 92618 USAsaturation clip pour la queue
Masimo LNCS TC-I SpO2 capteur de clip d’oreilleMasimo Corporation Irvine, Ca 92618 USAClip de saturation pour l’oreille
Masimo Radical 7Masimo Corporation Irvine, Ca 92618 USAsaturation périphérique en oxygène  ;   ;   ;
Midazolam 15 mg/3 mLB.Braun Melsungen AG, Allemagne
Midmark Masque canin Petit plastique avec diaphragme FRSCM-0005Midmark Corp., Dayton, Ohio, États-Unisde ventilation pour chien
Suture chirurgicale monocrylJohnson & Johnson, Belgique
B.Braun Melsungen AG, Allemagnesolution
NaCl 0,9 %Sanofi- Aventis, Seutschland GmbH
Octeniderm farblosSchü ; lke & Mayr GmbH, Nordenstedt, AllemagneDésinfectant
Original Perfusor seringue 50 mLB.Braun Melsungen AG, AllemagneSeringue
PA-Katheter Swan Ganz 7.5 Fr 110 cmEdwards Lifesciences LLC, Irvine CA, USASwan-Ganz cathéter
Perfusor FM BraunB.Braun Melsungen AG, Allemagnepousse-seringue
PiCCO cathéterPULSION Medical Systems SE, Feldkirchen, DE
Chlorure de potassium 1 MFresenius, Kabi Germany GmbH
Propofol 2 % 20 mg/mL (flacons de 50 mL)Fresenius, Kabi Deutschland, GmbH
Système de débit cardiaque continu à contour pulsé PiCCO2PULSION Medical Systems SE, Feldkirchen, DE
Rü ; schelit Super Safety Clear >ID 6/6.5 /7.0 mmTeleflex Medical Sdn. Bhd, Malaisieendotrachéal
Sonosite Micromaxx UltrasoundsystemSonosite Bothell, WA, États-Unis  ;échographie  ;
Macintosh en acier inoxydable Grö ; ß ; e 4Welch Allyn69604lame pour laryngoscope
SterofundinB.Braun Melsungen AG, Melsungen, AllemagneSolution
Vasco OP sensitive  ;B.Braun Melsungen AG, Allemagnegants
Vasofix Safety 22 G-16 GB.Braun Melsungen AG, AllemagneCathéter
VBM Manomètre à brassardVBM Medizintechnik GmbH, Sulz a.N., Allemagne  ;manomètre
Pansement hémodynamique introducteur de ligne de de perfusionproche infrarougejetablesde laryngoscopeveineux Masque salinealcooliqueperfuseur tube électrolytique équilibréestérilesveineux de brassard

Références

  1. Vincent, J. -L., Jones, G., David, S., Olariu, E., Cadwell, K. K. Frequency and mortality of septic shock in Europe and North America: a systematic review and meta-analysis. Critical Care. 23 (1), 196(2019).
  2. Reinhart, K., et al.

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Réimpressions et autorisations

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