Nous décrivons un modèle murin d’iléus postopératoire généré par manipulation intestinale. La fonction du transit gastro-intestinal, les changements pathologiques et l’activation des cellules immunitaires ont été évalués 24 h après la chirurgie.
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Article de méthode
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Nous décrivons un modèle murin d’iléus postopératoire généré par manipulation intestinale. La fonction du transit gastro-intestinal, les changements pathologiques et l’activation des cellules immunitaires ont été évalués 24 h après la chirurgie.
La plupart des patients souffrent d’iléus postopératoire (POI) après la chirurgie, ce qui est associé à une augmentation de la morbidité, de la mortalité et du temps d’hospitalisation. Le POI est une conséquence de dommages mécaniques pendant la chirurgie, entraînant une perturbation de la motilité dans le tractus gastro-intestinal. Les mécanismes de l’IOP sont liés à une sensibilité neuronale aberrante, à une altération de la fonction de barrière épithéliale et à une augmentation de l’inflammation locale. Cependant, les détails restent énigmatiques. Par conséquent, les modèles murins expérimentaux sont cruciaux pour élucider la physiopathologie et le mécanisme des lésions POI et pour le développement de nouvelles thérapies.
Ici, nous introduisons un modèle murin de POI généré par manipulation intestinale (IM) qui est similaire à la chirurgie clinique ; Ceci est réalisé par des dommages mécaniques à l’intestin grêle en massant l’abdomen 1 à 3 fois avec un coton-tige. Retard du transit gastro-intestinal IM 24 h après la chirurgie, tel qu’évalué par gavage FITC-dextran et détection par fluorescence du tube digestif segmentaire. De plus, le gonflement tissulaire de la sous-muqueuse et l’infiltration des cellules immunitaires ont été étudiés par coloration à l’hématoxyline et à l’éosine et par cytométrie en flux. Une pression appropriée de l’IM et un effet hyperémique sur l’intestin sont essentiels pour la procédure. Ce modèle murin de POI peut être utilisé pour étudier les mécanismes de lésions intestinales et de récupération après une chirurgie abdominale.
L’iléus postopératoire (POI) est un syndrome qui pose un défi important dans le domaine de la santé humaine, notamment dans la prise en charge des patients subissant une chirurgie abdominale. Caractérisé par une récupération retardée de la motilité gastro-intestinale, le POI contribue à des séjours prolongés à l’hôpital et à une augmentation des coûts des soins de santé, mais il n’existe aucune définition, étiologie ou traitement établi1. Des recherches récentes ont mis en lumière le rôle central des cellules immunitaires dans la progression de POI 2,3,4
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Les soins aux animaux et les procédures expérimentales ont été menés conformément aux Principes directeurs relatifs au soin et à l’utilisation des animaux (Chine) et ont été approuvés par le Comité d’éthique de l’hôpital de l’amitié de Pékin (n° 20-2056). Des souris C57BL/6 (âgées de 8 à 12 semaines) ont été utilisées pour l’étude.
1. Préparation à l’opération
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Dans ce protocole, le POI a été induit chirurgicalement par une manipulation intestinale (MI), ce qui est similaire à l’effet de la chirurgie clinique. Dans le groupe fictif, une incision a été pratiquée sans l’IM. Les souris POI ont été sacrifiées 24 heures après la chirurgie POI avec des souris témoins factices. La fonction critique du tube digestif, la fonction de transit du contenu, a été détectée par gavage de FITC-dextran. Le modèle POI a été considéré comme un succès parce que l’intensité de la FITC a augmenté dan.......
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Le succès de la chirurgie repose sur plusieurs étapes critiques. Tout d’abord, il est impératif de maintenir la cohérence pendant la chirurgie intra-muros intestinale (IM) pour induire des lésions étendues à l’intestin grêle. Une pression appropriée appliquée pendant la procédure IM et l’effet hyperémique qui en résulte sur l’intestin sont cruciaux pour le succès de l’opération. L’observation de l’ensemble du tube digestif devenant rose et affichant des taches hémorragiques rouges après .......
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Les auteurs n’ont rien à divulguer.
Nous sommes reconnaissants envers le Centre des animaux de laboratoire, l’Institut de recherche clinique de Pékin et l’Hôpital de l’amitié de Pékin pour les soins qu’ils ont prodigués aux animaux. Ce travail a été soutenu par le Programme national de R&D sur les technologies clés (n° 2015BAI13B09), la Fondation des sciences naturelles de Pékin (n° 7232035), la Fondation nationale des sciences naturelles de Chine (n° 82171823, 82374190) et les jeunes chercheurs distingués de l’Hôpital de l’amitié de Pékin (n° yyqcjh2022-4).
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| Nom | Entreprise | Numéro de catalogue | Commentaires |
|---|---|---|---|
| 1 M HEPES | Thermo | 15630080 | |
| APC anti-souris I-A/I-E (MHC-II)Biolegend | 107614 | ||
| APC anti-souris TCRb | Biolegend | 109212 | |
| APC/Cy7 anti-souris CD4 | Biolegend | 100414 | |
| APC/Cy7 anti-souris Ly6G | Biolegend | 127624 | |
| Brilliant Violet 421 anti-souris CD69 | Biolegend | 104545 | |
| Brilliant Violet 421 anti-souris F4/80 | Biolegend | 123132 | |
| Brilliant Violet 785 anti-souris/humain CD44 | Biolegend | 103041 | |
| BUV395 anti-souris CD8a | BD | 563786 | |
| BUV737 anti-souris CD3e | BD | 612771 | |
| Collagénase IV | Sigma-Aldrich | C5138 | |
| Microscope de culture | CKX53 | Olympus | |
| Désoxyribonucléase I du pancréas bovin (DNase I) | Sigma-Aldrich | DN25-5G | |
| DL-Dithiothreitol solution | Sigma-Aldrich | 43816-10ML | |
| EDTA | Sigma-Aldrich | EDS-100G | |
| FITC anti-souris CD45 | Biolegend | ||
| FITC-dextran (70 kWM) | Sigma-Aldrich | FD70-100MG | Gastrointestinal Transit Assay |
| Kit de coloration HE | solarbio | G1120 | |
| PE anti-souris CD11b | Biolegend | 101208 | |
| PE anti-souris-1 | Biolegend | 114118 | |
| PE/Cy7 anti-souris CD11c | Biolegend | 117318 | |
| Percoll | GE (Pharmacia) | 17-0891-01 | |
| Symphony A5 Cytomètre en flux | BD-Immune | détection et tri des cellules | |
| Tribromoéthanol | Sigma-Aldrich | T48402 | Anesthésie |
| Varioskan LUX | Thermo | N16699 | Lecteur de microplaques multimode |
| Zombie Aqua Fixable Kit de viabilité | Biolegend | 423102 | Fluorescent teinture de viabilité ; |
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