Trypsinisation et Repiquage des cellules de mammifères

Résumé

Comme les cellules atteignent la confluence, elles doivent être repiquées ou passages. Cette vidéo va démontrer une procédure de repiquage deux adhérentes et les cellules en suspension.

Résumé

Comme les cellules atteignent la confluence, elles doivent être repiquées ou passages. Le défaut de sous-culture des cellules dans les résultats confluentes index mitotique réduit et éventuellement à la mort cellulaire. La première étape de repiquage est de détacher les cellules de la surface du récipient de culture primaire par trypsinisation ou des moyens mécaniques. La suspension cellulaire obtenue est ensuite subdivisée, ou réensemencés, dans les cultures fraîches. Cultures secondaires sont vérifiés pour la croissance et alimenté périodiquement, et peuvent ensuite être repiquées pour produire des cultures tertiaires. Le temps entre repiquage de cellules varie en fonction de la lignée cellulaire et dépend du taux de croissance.

Protocole

Le protocole texte complet de cette approche expérimentale est disponible en Current Protocols in Cell Biology .