Dénombrement des algues via une méthodologie de culture

1. Peser un échantillon de 10 g de sol qui a été recueillie humide du champ, ou a l’eau ajoutée à elle afin qu’elle reste humide pendant 2-3 jours. Notez que le sol doit être humide mais non saturé.
2. Préparer une série de dilution de 10 fois en ajoutant le 10 g de sol dans 95 mL d’une Solution de Bristol modifié (Figure 1). Pour créer Solution de Bristol modifié, dissoudre ce qui suit dans 1 000 mL d’eau : 0,25 g NaNO₃, 0,025 g de CaCl₂, 0,075 g MgSO^–₄ · 7H₂O, 0,075 g K₂HPO₄, 0,018 g KH₂PO₄, 0,025 g NaCl et 0,5 mg FeCl_3.
3. Continuer la série de dilution par l’addition de 1 mL de Suspension A dans 9 mL de Solution de Bristol et de dilution séquentielle supplémentaire.
4. Inoculer 5 tubes répétées chaque contenant 9 mL de Solution de Bristol modifié avec 1 mL de la dilution 10^-2 à 10^-6 (tableau 1).
5. Incuber les tubes plafonnés pendant 4 semaines dans un endroit exposé aux rayons du soleil.
6. Observer les tubes pour la croissance des algues une fois tous les 7 jours. Tubes avec la croissance des algues apparaissent vertes.

La figure 1. Comment faire une série de dilution de 10 fois.

Tube	Dilution
B	10-2
C	10-3
D	10-4
E	10-5
F	10-6

Le tableau 1. Tubes et dilutions.