Transfert nucléaire dans des ovocytes de la souris

Nous faisons donc le transfert nucléaire NU parce que notre groupe est intéressé par la reprogrammation. Il s’agit d’un processus fascinant dans la mesure où le noyau différencié peut être reprogrammé dans un état embryonnaire. Il s’agit des réactifs, cas SUM et HCCV, et il s’agit de l’hyaluronidase.

Et d’abord, je prépare un plat avec, et cela ira dans les incubateurs pour équivaloir à un CO2. Ce sont des gouttes, ce sont plusieurs gouttes pour Turing qui sont recouvertes d’huile minérale. Ils calibrent donc l’atmosphère de CO2.

Maintenant, faites tomber de HCZB. Celui-ci sera utilisé pour le lavage. C’est élevé le jour et encore une fois couvert dans cette huile minérale.

Ce haut, cela baisse avec l’hyaluronidase. Cette partie ici n’est que des gouttes HCCP. Ceux-ci sont pour le lavage.

Il s’agit de supprimer les cellules ulu du côté O. Cette étape est chauffée pour qu’elle se réchauffe jusqu’à ce que je revienne et que j’obtienne les signes d’huile des souris et que je recouvre le tout d’huile minérale. Voici des gouttes PVP pour le nettoyage de l’aiguille et pour mettre les cellules dedans, et c’est HCCB plus Cyla B.Et ici, je vais faire les manipulations.

D’accord, voici une couleur d’aiguille. Ce que je fais maintenant, c’est que je tire une aiguille. D’accord, maintenant j’ai une très belle aiguille, très fine.

Et maintenant, c’est une micro-forge. Je dois couper l’aiguille à une certaine position pour avoir la bonne taille de pipette de maintien. Je chauffe la boule de verre, je descends avec l’aiguille qui fond dessus, et maintenant elle est cassée.

Je repousse ça. Vous voyez, l’aiguille cassée est parfaite. Maintenant, je descends ici, je fais monter la chaleur.

Maintenant, la boule de verre va devenir rouge, elle va fondre, pousser la boule de verre et elle, elle fait une courbe. Ça suffit. Je l’enlève.

Vous voyez, alors j’insère l’aiguille. Nous avons juste fait en sorte que la pipette de maintien l’enfonce dans cette tête. Maintenant, réinsérez-le dans le microscope.

Micro pipette, capillaire et moi chargé de mercure. Je l’ai chargé dans cette astuce. Le mercure charge ce capillaire ici avec du mercure.

Il va à l’intérieur. Placez l’aiguille ici dans cette tête. Vissez fermez, tirez-le vers l’arrière.

En tournant dans le sens des aiguilles d’une montre, vous pousserez le mercure vers l’avant pour que vous puissiez le voir. Et maintenant, la pointe dans l’huile. Voir? Alors maintenant, je descends l’aiguille pour obtenir la vision.

Expulsez quelques gouttelettes de mercure et aspirez un peu de QVP. Ce n’est pas grave. Et puis remontez-le.

Je vais au HCCB et je descends dans le trou. Ma tête, je vais à P, qui est la pipette de la souris. J’ai besoin de préparer un capillaire pour l’insérer ici. Merci.Déjà.Bien.

Faites donc un peu de capillaire. D’accord. Et dans le tuyau. Je suis ley.

Je viens de Suisse et j’ai commencé ce travail il y a un an et je suis venu au laboratoire de K et j’ai commencé à apprendre le transfert nucléaire. C’est vraiment, c’est un endroit formidable ici et c’est formidable de travailler ici. Et, et bien sûr, il s’agit d’une expérience très complexe et de nombreux problèmes peuvent survenir en la faisant.

Ainsi, lorsque vous commencez, vous pouvez rencontrer des problèmes tels que la lyse de nombreuses cellules pendant que vous nucléez ou pendant que vous effectuez le transfert. Ou alors, vous constatez que même si vous transférez avec succès, ils ne se développent pas. Et il y a toujours, il peut y avoir de nombreuses raisons.

Je veux dire que vous pouvez commencer à partir du système de culture de tous les sites. On a donc toujours besoin de quelques contrôles comme les parties du contrôle génétique ou des empereurs fertilisés pour tester le système de culture, les incubateurs. Et puis vous devez également améliorer les compétences du microscope.

Il faut donc beaucoup de pratique jusqu’à ce que vous puissiez instituer de manière fiable le côté et ensuite le transférer vers l’arrière. Ce n’est qu’une question de pratique et nous prendrons quelques semaines ou ou mois jusqu’à ce que vous soyez bon dans ce domaine. Et sinon, il est prêt pour de longues expériences.

Il est donc bon de lui réserver une journée entière. Et puis, quelque chose de délicat au début, c’est aussi le pipetage de la souris. Donc, pour ne pas faire de bulles, pour bien le contrôler et pour ne pas perdre la surveillance ou surtout vous pouvez également endommager un clone, en particulier parce que la couche externe, le so de lucita est ouvert, c’est en fait possible lorsque vous bouchez, vous endommagez ce clone et il s’échappe en quelque sorte de ce sonar lucita.

Donc, quand il faut également faire attention à ne pas avoir d’huile dans ce tuyau buccal. Ne pas trop sucer et ne pas trop souffler, mais c’est relativement facile à acquérir, cette compétence.