drosophile Dissection de glande accessoire mâle : une méthode pour isoler des cellules secondaires

- Sous un microscope de dissection et dans un milieu supplémenté en sérum, retirez l’appareil reproducteur de chaque mouche à l’aide d’une pince. Tout d’abord, retirez les parties du tube digestif qui ont pu accompagner l’appareil reproducteur. Pour isoler les glandes accessoires et le canal éjaculaire, retirez les testicules, le bulbe éjaculateur et le terminalia. Lavez le mouchoir pendant une à deux minutes dans du PBS pour retirer le sérum. Ensuite, transférez-le dans une solution de dissociation.

Pour exposer les cellules à l’intérieur des glandes à la solution de dissociation, tenez le centre de chaque glande avec une pince et coupez la glande avec une paire de pinces tranchantes. Retirez la partie proximale de la glande et le canal éjaculateur pour laisser derrière vous l’extrémité distale des glandes contenant la rare population de cellules secondaires responsables de la sécrétion de protéines impliquées dans l’accouplement. Enfin, transférez les pointes de presse-étoupes accessoires dans un microtube de centrifugation en préparation de la digestion. Dans le protocole suivant, nous disséquerons les glandes accessoires afin d’isoler les cellules secondaires pour l’analyse du