0 vues • 2:57 min • April 30th, 2023
- Sur une lame de microscope chargée positivement, collez deux lamelles de protection avec une distance suffisante entre elles pour créer un espace pour le montage des cerveaux de drosophile. Sous le stéréomicroscope, pipetez les cerveaux dans le support de montage dans cet espace. La charge négative du tissu aidera le cerveau à adhérer à la charge positive à la surface de la lame.
Retirez l’excès de support de montage pour permettre un positionnement précis des cerveaux sur la lame selon un quadrillage avec les lobes antennaires vers le haut, puis pontez les deux lamelles en collant une troisième lamelle pour couvrir les cerveaux.
Pour remplir la cavité, placez le support de montage, une goutte à la fois, dans le bord de la cavité et laissez-le se propager par capillarité afin qu’il ne dérange pas le cerveau.
Scellez la cavité avec du vernis à ongles et conservez-la à moins 20 degrés Celsius dans l’obscurité pour préserver la fluorescence des tissus tachés.
Dans l’exemple de protocole, nous allons monter des cerveaux de drosophile pour l’imagerie confocale de neurones immunomarqués.
- Pour monter les cerveaux, construisez un toboggan de pont. Positionnez deux couvercles de base qu
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