Séchage chimique : préparation d’échantillons biologiques pour la microscopie électronique à balayage (MEB)

- Pour commencer, commencez par déshydrater et sécher un échantillon fixe afin de réduire la distorsion de l’échantillon causée par l’élimination des gaz et de l’eau liquide à la pression de fonctionnement réduite des microscopes électroniques à balayage conventionnels, MEB.

Pour déshydrater l’échantillon, lavez-le avec des concentrations croissantes d’éthanol dans l’eau jusqu’à ce que 100 % d’éthanol soit atteint. Répétez ensuite ce processus avec un agent de séchage chimique dans de l’éthanol jusqu’à ce que l’échantillon soit lavé avec un agent de séchage pur. Transférez l’échantillon et le sécheur dans un plat d’évaporation. Couvrez-le d’un minimum d’agent de séchage supplémentaire et laissez-le sécher dans une hotte pendant la nuit.

Ensuite, montez l’échantillon préparé sur le dessus d’un talon de microscope à l’aide de ruban adhésif en carbone. Enfin, appliquez de la peinture argentée sur les bords du talon, puis du bord du talon sur chacun des échantillons, afin de réduire l’accumulation d’électrons en excès, ce qui pourrait entraîner des artefacts d’image indésirables.

Dans cette expérience, des mouches des fruits, Drosophila melanogaster, sont préparées pour l’analyse MEB à