Injection de mouches drosophiles adultes : méthode d’administration d’un composé ou d’une étiquette

- Préparez les aiguilles d’injection coniques en tirant sur les capillaires en verre à paroi mince à l’aide d’un extracteur d’aiguille. Tenez une aiguille sous un microscope et cassez la pointe, en vous assurant que l’ouverture est juste assez grande pour percer la cuticule de la mouche adulte sans la blesser plus que nécessaire. Mesurez le volume d’injection en chargeant votre aiguille d’une solution stérile de colorant et de tampon salin, puis en l’éjectant sur une goutte d’huile minérale sur un micromètre platinal. Utilisez l’échelle du micromètre pour mesurer le diamètre de la gouttelette éjectée, qui peut être utilisée pour calculer le volume distribué, et calibrez les paramètres de votre injecteur en conséquence.

Chargez l’aiguille avec votre solution d’injection et montez-la sur une buse d’injection. Anesthésiez vos mouches avec du CO2 et disposez-les sur un coussin anti-mouches au CO2 qui les maintiendra anesthésiées. Une fois que les mouches sont dans la bonne orientation pour votre expérience, procédez aux injections. Dans l’exemple de protocole, nous injecterons des mouches adultes avec des particules marquées à la fluorescéine pour l’imagerie in vivo.

- Après avoir tiré