Préparation de filets larvaires : une méthode pour visualiser des neurones sensoriels intacts et des cellules épidermiques associées

- Pour orienter une larve en vue de la dissection du filet, placez-la dans un plat recouvert de silicone contenant une solution saline froide et identifiez ses faces dorsale et ventrale. Des tubes trachéaux qui s’étendent sur toute sa longueur marquent la face dorsale, tandis que des ceintures de denticules abdominaux identifient la face ventrale.

Ensuite, avec le côté ventral vers le haut, étirez doucement la larve et épinglez chaque extrémité au fond du plat. Cette position maintiendra intacts les amas dorsaux de neurones sensoriels multi-dendritiques et les cellules épidermiques associées au fur et à mesure que la dissection se poursuit.

Utilisez des ciseaux de dissection pour couper le long de la ligne médiane ventrale de la larve. Épinglez la cuticule sur la plaque pour aplatir la préparation et retirez les structures internes pour révéler le tissu musculaire sous-jacent. Ensuite, retirez soigneusement le muscle approprié pour exposer l’épiderme et accéder aux neurones préalablement obscurcis tout en préservant leur morphologie dendritique.

Dans l’exemple de protocole, nous verrons une démonstration détaillée de la préparation du filet larvaire et de l’ablation musculaire pour