Comptage des unités formant colonies (UFC) : Quantifier les bactéries des corps de mouches

- Tout d’abord, collectez les mouches au stade de développement souhaité et placez-les dans un tube stérile. Pour ne compter que le microbiote interne, stérilisez l’extérieur des mouches en les immergeant dans de l’éthanol à 70 %. Pour mesurer à la fois le microbiote interne et externe, sautez cette étape de stérilisation. Ensuite, broyez les mouches dans un petit volume de milieu de croissance bactérienne à l’aide de billes de céramique et d’un homogénéisateur de tissus, ou manuellement avec un pilon. Il faut veiller à ne pas introduire de bactéries provenant de sources externes, afin d’éviter de contaminer les échantillons.

Vous devriez maintenant avoir un mélange homogène contenant des bactéries que vous pouvez cultiver. Augmentez le volume de l’homogénat à l’aide d’un milieu bactérien liquide. Effectuez des dilutions en série de l’homogénat et plaquez un volume constant de ces dilutions sur le milieu de croissance solide approprié pour vos bactéries. Au fur et à mesure que les bactéries se développent, des colonies se forment sur l’assiette. Trouvez la dilution qui a une plage de 10 à 100 colonies pour déterminer les unités formant colonies, ou UFC, de l’échantillon.

Dans l’exe