0 vues • 2:56 min • April 30th, 2023
- Transférez C. elegans lavé dans un liquide sur une lame de verre préalablement recouverte de polylysine, un composé qui aidera les cuticules des vers à adhérer à la surface du verre. Appuyez doucement sur une autre lame de verre vers le bas avec un bord surplombant la glissière inférieure. Pour immobiliser les vers sans les endommager, comprimez les animaux en évitant tout mouvement latéral. Ensuite, placez les lames de verre avec des vers en sandwich sur un bloc métallique à l’intérieur d’un récipient de laboratoire isolé rempli d’un agent de congélation, tel que de l’azote liquide ou de la glace sèche.
Le métal est un conducteur de température efficace, garantissant que la surface du bloc est suffisamment froide pour geler rapidement les cuticules du ver sur les deux surfaces vitrées. Une fois congelés, séparez rapidement les lames de verre pour séparer ou ouvrir les cuticules du ver. Procéder à la fixation et à la coloration des tissus, car la perturbation de la cuticule à faible perméabilité permet aux fixateurs chimiques et aux anticorps de coloration d’accéder aux tissus intérieurs des vers. Dans le protocole suivant, nous verrons une démonstration détaillée de la technique
Consultez la transcription complète et accédez à des milliers de vidéos scientifiques