Coloration rouge du Nil de C. elegans : une méthode pour visualiser les gouttelettes lipidiques chez les animaux fixes

- Lors de la visualisation de gouttelettes lipidiques, les organites de stockage intracellulaires des lipides neutres, commencent par ajouter une solution détergente, telle que celle contenant du Triton X-100, à l’échantillon. Cela permettra de perméabiliser les cellules du ver. Ensuite, fixez l’échantillon à la concentration appropriée d’isopropanol, par exemple 40 %.

Ensuite, ajoutez Nile Red à l’échantillon et protégez-le de la lumière, car le colorant est sensible à la lumière. La fixation permet au colorant d’accéder aux gouttelettes lipidiques dans tout l’animal. Nile Red est un colorant lipophile dont le spectre d’émission de fluorescence dépend de la polarité de l’environnement lipidique local.

Lorsqu’il est exposé à des lipides polaires, tels que les phospholipides, le spectre d’émission du rouge du Nil se situe dans les longueurs d’onde rouges supérieures. Lorsqu’il est exposé à des lipides neutres, tels que les triacylglycérols et les esters de stérols dans le noyau neutre des gouttelettes lipidiques, le spectre d’émission du rouge du Nil se déplace vers les longueurs d’onde inférieures, jaune-or.

Par conséquent, utilisez le canal vert d’un microscope fluorescent, qui co