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Drosophila Aggression Assay: A Method to Test Behavioral Plasticity in Flies

drosophile Essai d’agression : une méthode pour tester la plasticité comportementale chez les mouches

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Transcription

- Pour évaluer l’agressivité chez les mouches, utilisez une chambre de combat fermée équipée de deux points d’entrée et d’un séparateur pour garder les sujets séparés avant l’essai. Placez une source de nourriture au centre de la chambre pour créer un conflit pour les mouches. Ensuite, chargez les mâles préalablement isolés et marqués par les points d’entrée de chaque côté de l’arène. Retirez le séparateur et enregistrez les rencontres des mouches pour quantifier l’agressivité.

Pour établir la dominance, un mâle affiche des comportements offensifs stéréotypés qui augmentent en intensité, de l’approche et de la poursuite de l’adversaire à la fente, un comportement qui indique l’agression, où la mouche attaquante se lève haut sur ses pattes arrière et se heurte à l’adversaire pour tenter de l’attraper. En revanche, l’adversaire affiche des comportements défensifs, comme s’enfuir en retraite de l’attaquant. Ainsi, un perdant et un vainqueur émergent du combat, et un souvenir de défaite ou de victoire se forme chez chaque adversaire.

Dans l’exemple de protocole, nous verrons comment une configuration qui élimine la manipulation des animaux pendant le test d’agression est utilisée pour étudier la formation de la mémoire chez les mouches qui ont perdu leur premier combat, appelé effet « perdant ».

- Commencez les expériences comportementales en insérant des séparateurs en plastique dans chaque chambre de combat. Retirez le bouchon en coton du tube d’isolation et positionnez le tube sous un trou ouvert sur le côté de l’appareil. Permettez à la mouche d’entrer dans la chambre de combat par géotaxie négative. Ensuite, fermez la paroi coulissante une fois que la mouche est entrée dans la chambre. Répétez la procédure pour introduire la deuxième mouche dans la chambre de combat de l’autre côté de l’appareil.

Ensuite, remettez l’appareil en position d’enregistrement vidéo éclairé. Commencez l’enregistrement vidéo et retirez le séparateur en plastique pour permettre aux mouches d’interagir. Pour les expériences d’effet « perdant », enregistrez les premiers combats pendant 20 minutes pour vous assurer de la formation de relations de dominance solides. Au bout de 20 minutes, replacez délicatement le séparateur en plastique dans les chambres de combat pour séparer les mouches et arrêter la vidéo.

- Pour induire une forte mentalité de « perdant », assurez-vous que les mouches établissent et maintiennent une relation de dominance lors des premiers combats, puis minimisez la perturbation des animaux lors de l’insertion des séparateurs pour séparer les mouches.

- Après une période de repos de 10 minutes, commencez l’enregistrement et retirez délicatement le séparateur en plastique. Laissez les mouches interagir pendant 20 minutes supplémentaires. Arrêtez l’enregistrement après 20 minutes. Pour conclure l’expérience, retirez les mouches des chambres comportementales par géotaxie négative en inversant la procédure décrite précédemment.

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