0 vues • 3:08 min • April 30th, 2023
- Commencez par sélectionner une larve du troisième stade, la plus grande des formes larvaires, dans le milieu de culture, et lavez-la à l’eau pour enlever toute nourriture. Étant donné que les yeux des larves, ou organes de Bolwig, sont situés dans la partie supérieure avant de la larve, placez la larve au centre d’une plaque de gélose avec la source lumineuse au-dessus de l’animal. Éteignez la lumière de la pièce et laissez la larve s’acclimater à l’obscurité.
Étant donné que la larve est à peine détectable dans un point lumineux créé par la lumière visible, allumez les lumières LED infrarouges pour éclairer l’animal pour la caméra. Attendez que l’animal commence à ramper tout droit pour contrôler son chemin. Ensuite, faites pivoter la plaque de manière à ce que la larve rampe directement vers le point lumineux. Enregistrez l’animal rampant dans la lumière, puis loin du point lumineux. Cette tactique d’évitement de la lumière aide les larves à éviter les prédateurs en s’enfouissant dans la nourriture.
Dans l’exemple suivant, nous allons effectuer le test de la tache lumineuse pour tester la capacité de différentes souches génétiques de larves de drosophile à échapper à la lumière.
- Avant d’introduire la larve dans la configuration d’imagerie, procurez-vous une courte vidéo de la position de la lumière et nommez la vidéo d’arrière-plan de contrôle non filtrée « lightarea1 ». Replacez le filtre sur l’objectif de l’appareil photo et allumez une lumière éloignée de l’appareil expérimental à un réglage aussi bas que possible tout en permettant d’observer clairement les larves. À l’aide d’une cuillère, retirez quelques larves du milieu de culture et choisissez délicatement une troisième larve au stade larvaire.
Lavez la larve dans de l’eau distillée et placez la larve au centre de la plaque de gélose. Retirez délicatement tout excès d’eau de la larve et éteignez la lumière de la pièce. Laissez la larve s’acclimater pendant deux minutes dans l’environnement sombre avant d’allumer la lumière LED infrarouge. L’expérience suivante de comportement d’évitement de la lumière doit être réalisée dans l’obscurité. Pour la commodité de la démonstration, nous avons filmé en pleine lumière.
Brossez doucement la larve jusqu’au centre de l’assiette. Lorsque la larve commence à ramper tout droit, tournez la plaque pour que la larve se dirige vers le point lumineux. Cliquez sur Capture, Configuration et Capture vidéo pour sélectionner le chemin d’enregistrement. Et cliquez sur Démarrer l’enregistrement pour enregistrer. Laissez la lave ramper vers le point lumineux, y entrer et le quitter jusqu’à ce qu’il soit presque hors du champ de vision, puis cliquez sur Arrêter l’enregistrement.
Éloignez le filtre de l’appareil photo et obtenez une courte vidéo de la position du point lumineux. Nommez ensuite la publication en tant que vidéo non filtrée, « lightarea2 », et comparez cette vidéo avec la vidéo « lightarea1 » pour vous assurer que la position du spot lumineux n’est pas modifiée.