Dissection de l’intestin moyen d’une mouche adulte : une méthode pour isoler le tube digestif

- Pour commencer, retirez la tête d’une mouche adulte anesthésiée. Couvrez la mouche décapitée avec une solution contenant une solution saline tamponnée au phosphate, ou PBS, et de l’albumine sérique bovine, ou BSA, pour éviter la dessiccation. Tenez la mouche par le thorax avec une pince, puis tirez l’abdomen avec une deuxième paire de pinces pour exposer l’intestin. Étant donné que le jabot, ou le sac de stockage de nourriture, sera attaché au thorax, retirez doucement l’intestin du thorax.

Une fois détaché, retirez le jabot de l’abdomen pour déplier l’intestin. Retirez l’extrémité postérieure de la mouche pour commencer à libérer l’intestin de la cavité abdominale. Continuez à tirer sur l’intestin pour retirer tout le tissu de l’abdomen. Une fois libéré, retirez l’intestin antérieur, les tubules de Malpighian, l’intestin postérieur et les ovaires pour ne laisser que l’intestin moyen disséqué, le principal site de digestion chez la mouche.

Dans l’exemple de protocole, nous disséquerons les intestins moyens de mouches adultes jeunes et âgées pour les analyser plus en détail via le tri cellulaire activé par fluorescence, ou FACS.

- Avant de commencer la dissection, anesthésier un f