0 vues • 2:40 min • April 30th, 2023
- Pour tester la préférence d’une mouche femelle pour la ponte ou les sites de ponte, donnez à une mouche femelle le choix entre deux substrats différents sur lesquels déposer ses œufs dans une chambre d’essai. La mouche comparera les options disponibles et choisira les sites qu’elle préfère, généralement le substrat le mieux adapté à sa progéniture.
Assurez-vous que la mouche est prête à pondre de nombreux œufs, afin qu’il y ait un nombre élevé d’œufs dans chaque essai. À la fin de l’expérience, retirez la mouche et comptez les œufs sur chaque substrat pour déterminer la préférence de ponte de la mouche.
Dans l’exemple de protocole, nous utiliserons un test à haut débit pour tester la préférence de ponte pour les substrats d’agarose nature ou contenant du saccharose.
- Poursuivez l’expérience en obtenant des chambres de ponte en acrylique préalablement construites. Insérez des feuilles de plastique dans le haut, en chargeant un morceau de la chambre pour servir de surface inférieure.
Ensuite, anesthésez les femelles sur une plaque de dioxyde de carbone et chargez-les individuellement dans chaque arène de ponte. Laissez les mouches se remettre du dioxyde de carbone pendant 30 minutes et s’acclimater au nouvel environnement. Pendant que les mouches s’ajustent, remplissez un tube d’agarose jusqu’à 10 millilitres. Ensuite, préparez un substrat de saccharose de 150 millimolaires en plaçant 750 microlitres de solution de saccharose à 2 molaires dans le tube. Conservez une bouteille d’agarose 1 % fondu dans un bain-marie.
Préparez le substrat ordinaire de la même manière, mais remplacez la solution de saccharose par de l’eau distillée. Ensuite, prenez le morceau de substrat de la chambre et pipetez 1 000 microlitres de substrat d’agarose dans chaque auge. Laisser l’agarose se solidifier pendant 30 minutes.
Une fois que les substrats d’agarose et les mouches sont prêts, assemblez les trois pièces de la chambre de ponte, puis retirez les feuilles de plastique. Placez les chambres dans des incubateurs à mouches pendant la nuit.
Anesthésier les femelles en injectant du dioxyde de carbone dans la chambre. Démontez la chambre et jetez les mouches anesthésiées. Enfin, prenez des photos des œufs pour tenir des registres.