Analyse de la durée de vie : Mesure de la longévité de C. elegans

- Pour mesurer la durée de vie moyenne d’une population de nématodes, commencez par des larves L1 synchronisées au développement dans la zone tampon M9. Déterminez la densité des larves, puis ajoutez-en 50 dans chaque plaque. Préparez au moins trois plaques répétées par condition, ainsi que des plaques de secours.

Laissez ces vers se développer normalement jusqu’à ce qu’ils atteignent le stade L4. Maintenant, vous pouvez ajouter du FUdR aux plaques, ce qui empêchera les vers de produire une descendance. Alternativement, vous devrez déplacer les vers vers de nouvelles plaques chaque jour après le comptage, pour vous assurer que vous ne mesurez que la durée de vie d’une seule génération.

Ensuite, retirez tous les mâles. Cela éliminera les variables du sexe et de l’accouplement de l’expérience. Le lendemain, comptez le nombre de vers vivants sur l’assiette en recherchant un mouvement spontané ou une réponse à un toucher doux. Retirez tous les vers morts et notez les numéros. Comptez quotidiennement les vers survivants jusqu’à ce qu’il n’en reste plus. Dans l’exemple de protocole, nous verrons une démonstration d’un test de durée de vie.

- Chargez les plaques préparées avec 50 animaux