Essai de ponte : une méthode pour quantifier le comportement de ponte de C. elegans

0 views • 2:25 min • April 30th, 2023

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- Des expériences visant à quantifier la ponte des œufs ont révélé les composants neurologiques et les signaux environnementaux qui ont un impact sur ce comportement. Des changements dans le comportement de ponte peuvent indiquer des effets toxiques sur les systèmes neuromusculaire ou reproducteur.

Pour tester la toxicité, élever des œufs synchronisés au développement sur des plaques de milieu de croissance de nématodes avec et sans le composé d’intérêt. Ces expériences utilisent de la nourriture bactérienne tuée par la chaleur pour empêcher les bactéries de métaboliser le composé. Permettez à cette génération de grandir jusqu’à ce qu’elle devienne de jeunes adultes.

Ensuite, déplacez les vers sur de nouvelles plaques dans les conditions de contrôle ou d’expérimentation appropriées, et laissez-les pondre des œufs pendant 24 heures. Chaque jour, transférez les adultes dans une nouvelle assiette et comptez les œufs sur l’assiette précédente. Continuez jusqu’à ce que les adultes cessent de pondre, environ cinq jours pour les vers de type sauvage. Calculez le nombre d’œufs pondus par ver adulte chaque jour et additionnez le total à la fin de l’expérience.

Dans l’exemple de protocole, nous utiliserons le test de ponte d’œufs de C. elegans pour tester l’étoposide - un médicament de chimiothérapie - pour la toxicité pour la reproduction.

- Incuber les œufs synchronisés selon l’âge sur la plaque NGM contenant du DMSO ou de l’étoposide à 20 degrés Celsius pendant 64 heures, jusqu’au stade de jeune adulte. Transférez cinq vers adultes dans de nouvelles plaques NGM sans produits chimiques ou de nouvelles plaques NGM contenant le même prétraitement chimique, et incubez-les pendant 24 heures.

Transférez les adultes dans de nouvelles plaques NGM, comme nous venons de le démontrer, et comptez le nombre d’œufs chaque jour. De plus, comptez les vers qui se sont échappés, sont morts ou ont éclos à l’intérieur. Effectuer des calculs selon le protocole texte.

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Mesurer les effets des bactéries sur C. Elegans Comportement aide d'un test de rétention d'oeufs

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Last updated: 25 July 2026