0 vues • 2:37 min • April 30th, 2023
- C. elegans se déplace sur le côté en générant des ondes sinusoïdales le long de son corps. L’animal se déplace vers l’avant lorsque les vagues se propagent de la tête à la queue. À l’inverse, lorsque les ondes sinusoïdales se propagent de la queue à la tête, le ver se déplace vers l’arrière.
La locomotion vers l’arrière, connue sous le nom d’inversions, est brève et se produit spontanément ou est déclenchée par un stimulus sensoriel, par exemple, un léger toucher sur l’avant du ver. Pour effectuer l’essai d’habituation au toucher antérieur, isolez des vers préalablement synchronisés du stade de développement souhaité sur des plaques NGM non ensemencées.
À l’aide d’un cheveu fin stérilisé, effectuez un toucher doux sur la partie antérieure du corps. Cela provoquera une réponse d’échappement où le ver effectuera une inversion. Laissez un intervalle de 10 secondes entre les stimuli pour que le ver récupère et répète le toucher. Pour évaluer l’accoutumance, qui est une forme d’apprentissage non associatif, notez le nombre de contacts jusqu’à ce qu’une inversion ne soit plus observée.
Dans l’exemple de protocole, nous verrons une démonstration du test d’habituation au toucher antérieur.
- Tout d’abord, à l’aide d’un pic en fil de platine de calibre 30 stérilisé au feu pour transférer environ 10 jeunes vers adultes synchronisés dans de nouvelles plaques NGM non ensemencées. Laissez les vers tranquilles pendant cinq minutes pour leur donner le temps de s’acclimater à la nouvelle plaque. Ensuite, stérilisez un poil de sourcil attaché à l’extrémité d’une brochette en bois ou d’un cure-dent en le trempant dans de l’éthanol à 70 %.
Essuyez avec un mouchoir propre et non pelucheux et attendez une minute pour que l’éthanol s’évapore. Touchez doucement le ver sur la tête à l’aide des poils des sourcils. Répétez les contacts en laissant 10 secondes entre les contacts pour permettre au ver de se rétablir.
Continuez à toucher en laissant des intervalles de 10 secondes entre les stimuli jusqu’à ce que le ver ne recule plus. Notez le nombre de contacts nécessaires pour que cette accoutumance se produise.
- Il est important de permettre un intervalle de 10 secondes entre les touchers, car cela permet à l’animal de récupérer son temps et d’obtenir des tests de comportement d’habituation cohérents.