Encyclopédie des expériences JoVE
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- Pour commencer, ensemencez les cellules leucémiques humaines dans un milieu de culture fraîchement préparé et incubez pendant la période souhaitée. Après l’incubation, colorez une petite quantité de cette suspension cellulaire avec du bleu trypan et évaluez la viabilité cellulaire à l’aide d’une lame de compteur de cellules TC20. Les cellules mortes sont perméables et absorbent le colorant chargé négativement, tandis que les cellules viables sont imperméables.
Ensuite, ajoutez de la méthylbêta-cyclodextrine dans le ballon de culture pour épuiser suffisamment le cholestérol des cellules, ce qui les rend sensibles aux ultrasons. Incuber les cellules pendant la période souhaitée. Remplissez le système de sonication cellulaire avec de l’eau déminéralisée et dégazez-le pendant quelques minutes pour éviter les bulles de vide. Transférez la quantité souhaitée de cellules dans le flacon à scintillation et fixez le flacon au dispositif de maintien du système de sonication cellulaire.
Placez le dispositif de maintien sur le dessus de la corne et réglez l'élévation souhaitée par rapport au haut de la corne. Réglez les impulsions requises pendant la durée souhaitée pour soniser les cellules.
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